PhD (Medicine), Senior Researcher, Laboratory of Molecular Genetics and Biochemistry, Mental Health Research Institute
к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики и биохимии НИИ психического здоровья
Student
студент
Student
студент
Junior Researcher, Laboratory of Molecular Genetics and Biochemistry, Postraduate Student, Mental Health Research Institute
младший научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики и биохимии, очный аспирант Научно-исследовательского института психического здоровья
PhD (Medicine), Senior Researcher, Abdominal Oncology Department, Cancer Research Institute
к.м.н., старший научный сотрудник отделения абдоминальной онкологии Научно-исследовательского института онкологии
MD,
д.м.н., главный научный сотрудник лаборатории биохимии опухолей НИИ онкологии Томского НИМЦ, профессор кафедры биохимии и молекулярной диагностики с курсом клинической лабораторной диагностики ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России
The study of antibodies with catalytic properties, in particular IgG with oxidoreductase activities, is a relatively new direction in cancer pathology, with very few publications. The aim of the present work was to investigate the catalase and superoxide dismutase (SOD) activities of IgG from patients with colorectal cancer (CRC) depending on the clinical and morphologic parameters of the disease. Blood serum samples from 20 patients with colorectal cancer (T3-4N0-2M0) with high- and low-differentiated tumors and 18 conditionally healthy donors was used in the study. The groups were comparable by sex and age. IgG was purified from serum by affine chromatographic method on column with Protein-G-Sepharose using a AKTA pure chromatograph (GE, USA). Dialysis of antibodies was performed against 20 mM phosphate buffer, pH = 7.0. IgG concentration was determined by spectrophotometric method on a Varioskan LUX multifunctional reader (Thermo Scientific, USA). Electrophoretic analysis of the obtained samples was carried out according to the Lemmli method in PAGE gradient (4-18%). Visualization of the gels was performed using an iBright Imaging Systems FL1500 (Thermo Scientific, USA). Catalase and SOD activities of the antibody samples were spectrophotometrically determined on a Varian Cary 60 UV-Vis spectrophotometer (Agilent, USA). Statistical processing of the data was carried out in Statistica 12.0 program. In the present work, we have shown for the first time that IgG’s of CRC patients are able to catalyze catalase and SOD reactions, and that this activity is an intrinsic property of the antibodies. It was revealed that both studied IgG activities were significantly increased in patients compared to healthy individuals. It has been shown that IgG catalase activity in CRC patients at the II stage of malignancy is 1.8 times higher (p = 0.015) than in CRC patients with the III stage of tumor process. The IgG catalase activity in patients with low-differentiated CRC proved to be two-fold lower (p = 0.045) than in patients with highly differentiated CRC. On the contrary, IgG SOD activity in patients with highly differentiated CRC is 1.7 times lower (p = 0.021) in comparison with patients with low-differentiated CRC. Thus, the studied oxidoreductase activities of abzymes in patients with CRC obviously make a significant contribution to the pathogenesis of CRC and may be used for prognosis of the disease development.
Изучение антител, обладающих каталитическими свойствами, в частности IgG с оксидоредуктазными активностями при онкологической патологии, – это относительно новое направление в онкологии, с крайне небольшим количеством публикаций. Целью настоящей работы явилось исследование каталазной и супероксиддисмутазной (СОД) активностей IgG-пациентов с колоректальным раком (КРР) в зависимости от клинико-морфологических параметров заболевания. В работе использовалась сыворотка крови от 20 пациентов с КРР (T3-4N0-2M0) с высоко- и низкодифференцированными опухолями и 18 условно здоровых доноров. Группы были сопоставимы по полу и возрасту. Выделение IgG из сыворотки крови проводили с помощью аффинной хроматографии на колонках с Protein-G-Sepharose на хроматографе AKTA pure (GE, США). Диализ антител проводили против 20 мМ фосфатного буфера, pH = 7,0. Концентрацию IgG определяли спектрофотометрическим методом на многофункциональном ридере Varioskan LUX (Thermo Seinctific, США). Электрофоретический анализ полученных препаратов проводился по Леммли в градиентном 4-18% ПААГ. Визуализация гелей проводилась с помощью системы iBright Imaging Systems FL1500 (Thermo Scientific, США). Каталазную и СОД-активность препаратов антител определяли спектрофотометрическим методом на спектрофотометре Varian Cary 60 UV-Vis (Agilent, США). Статистическая обработка данных проводилась в программе Statistica 12.0. В представленной работе впервые показано, что IgG пациентов с КРР способны катализировать каталазную и СОД-реакции и что данная активность является собственным свойством антител. Выявлено, что обе изучаемые активности абзимов достоверно увеличены у больных в сравнении со здоровыми лицами. Показано, что у больных КРР со II стадией опухолевого процесса каталазная активность антител в 1,8 раза выше (p = 0,015) по сравнению с аналогичной активностью у пациентов с III стадией КРР. Каталазная активность IgG статистически значимо снижена в 2 раза у больных с низкодифференцированным КРР по сравнению с пациентами с высокодифференцированным КРР (p = 0,045). СОД-активность абзимов у больных с высокодифференцированным КРР, напротив, в 1,7 раза ниже, чем у пациентов с низкодифференцированным КРР (p = 0,021). Таким образом, изучаемые оксидоредуктазные активности абзимов у больных КРР, очевидно, вносят значимый вклад в патогенез КРР и могут использоваться для прогноза развития заболевания.