Junior Researcher at the Laboratory of Inflammation Immunology; Assistant Professor at the Department of Normal Physiology
младший научный сотрудник лаборатории иммунологии воспаления; ассистент кафедры нормальной физиологии
Student
студент
Student
студент
Student
студент
PhD (Medicine), Senior Researcher at the Laboratory of Inflammation Immunology
к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории иммунологии воспаления
Acetaminophen (paracetamol) is one of the most common analgesic and antipyretic agents. Therefore, the overdosage with this drug are often observed, being associated with acute hepatotoxicity and systemic inflammation, worsening the clinical prognosis. In this case, systemic inflammation is characterised by systemic activation of immune system. However, the contribution of different types of immune cells to pathogenesis of acetaminophen poisoning has not been sufficiently studied thus determining the purpose of this work. The aim of this study was to evaluate changes in the number of cells expressing CD3+, CD20+, CD45+ in organs of C57Bl/6 mice during acute acetaminophen poisoning. The study was performed with sexually mature male C57Bl/6 mice. The mice were divided into 2 groups of 7 mice in each group. The experimental group included animals treated with acetaminophen solution (Sigma-Aldrich, USA) at a dose of 600 mg/kg at (14 mg/mL). An equivalent volume of physiological solution was administered to the control group. The animals were taken out of the experiment after 24 hours, and internal organs were removed. Primary rabbit antibodies from Sigma-Aldrich (C7930), Thermo Fisher Scientific (PA5-16701), Abcam (ab281586) were used for immunohistochemical study for CD3+, CD20+, CD45+ cells. Secondary antibodies were purchased from Thermo Fisher Scientific (31820). When assessing the content of CD20+ cells in organ tissues of C57Bl/6 mice, only single cells were observed in the field of view. Statistically significant differences were not revealed by Mann–Whitney U test thus suggesting absence of B cell contribution to the pathogenesis of acetaminophen poisoning in the first 24 hours. A statistically significant decrease in the number of CD3+ cells in heart tissue was determined. 24 hours after the toxicant administration, an increased number of CD45+ expressing immune cells was noted in liver, mainly, as segmented neutrophils. Hence, we did not find any significant changes in cell numbers of CD3+ and CD20+ expressing cells in the studied tissues by 24 hours after acute acetaminophen poisoning in experimental animals. At the same time, there is an increased content of immune cells in the liver tissue, mainly due to neutrophils.
Ацетаминофен (парацетамол) – одно из наиболее распространенных анальгезирующих и антипиретических средств, из-за чего часто возникают передозировки данным препаратом, связанные с острой гепатотоксичностью и последующим развитием системного воспаления, ухудшающим прогноз для пациента. При этом системное воспаление характеризуется системной активацией иммунной системы. Однако, по данным литературы, еще недостаточно изучен вклад разных типов иммунных клеток в патогенез отравления ацетаминофеном, что и определило цель данной работы. Цель работы – оценить изменения количества клеток, экспрессирующих CD3+, CD20+, CD45+ в тканях органов мышей линии C57Bl/6 при остром отравлении ацетаминофеном. Исследование было выполнено на половозрелых мышах-самцах линии C57Bl/6. Возраст животных на момент начала эксперимента составлял 10 недель. Мыши были разделены на 2 группы по 7 мышей в каждой. В экспериментальную группу входили животные, которым вводили раствор ацетаминофена (Sigma-Aldrich, США) в дозе 600 мг/кг в концентрации 14 мг/мл. Контрольной группе вводили эквивалентный объем физиологического раствора. Животных выводили из эксперимента через 24 часа, проводя изъятие внутренних органов (печени, почек, поджелудочной железы, легких, сердца). Для проведения иммуногистохимического исследования на CD3+, CD20+, CD45+ были использованы первичные кроличьи антитела компаний Sigma-Aldrich (США, C7930), Thermo Fisher Scientific (США, PA5-16701), Abcam (Великобритания, ab281586) с разведением дилюентом (Leica Microsystems, Германия). Вторичные антитела были взяты компании Thermo Fisher Scientific (США, 31820). Анализ окрашенных срезов проводили на световом микроскопе Leica DM2500 (Leica Microsystems, Германия) с видеокамерой Leica DFC420 (Leica Microsystems, Германия). Статистический анализ данных осуществляли с применением программного обеспечения Statistica v.10 (Statsoft, США). При оценке содержания CD20+ клеток в тканях органов мышей C57Bl/6 наблюдали единичные клетки в поле зрения. Статистически значимых различий при этом по U-критерию Манна–Уитни выявлено не было, что говорит об отсутствии вклада B-лимфоцитов в патогенез отравления ацетаминофеном в первые 24 часа. Было определено статистически значимое снижение количества CD3+ клеток в ткани сердца. Через 24 часа после введения токсиканта отмечается увеличение количества CD45+ экспрессирующих иммунных клеток в печени, преимущественно за счет сегментоядерных нейтрофилов. Таким образом, в первые сутки после острого отравления ацетаминофеном у экспериментальных животных не отмечается значимого изменения CD3+ и CD20+ экспрессирующих клеток в тканях. При этом происходит увеличение содержания иммунных клеток к ткани печени, преимущественно за счет нейтрофилов.