<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE root>
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/" article-type="brief-report" dtd-version="1.2" xml:lang="en"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">Russian Journal of Immunology</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="en">Russian Journal of Immunology</journal-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Российский иммунологический журнал</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn publication-format="print">1028-7221</issn><issn publication-format="electronic">2782-7291</issn><publisher><publisher-name xml:lang="en">Russian Society of Immunology</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="publisher-id">17236</article-id><article-id pub-id-type="doi">10.46235/1028-7221-17236-AEO</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en"><subject>SHORT COMMUNICATIONS</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru"><subject>КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="article-type"><subject>Short Communication</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title xml:lang="en">Assessing effects of an antigen complex from opportunistic bacteria on activation of CD54 receptor expression by human promonocytic U937 cell line</article-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Оценка влияния комплекса антигенов условно-патогенных бактерий на активацию экспрессии рецептора CD54 клетками промоноцитарной линии человека U937</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kalinichenko</surname><given-names>Evgeniy O.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Калиниченко</surname><given-names>Евгений О.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (Medicine), Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>к.м.н., научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета</p></bio><email>gladius.domini@gmail.com</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kozyreva</surname><given-names>Olga V.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Козырева</surname><given-names>Ольга В.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета</p></bio><email>kozyreva-11@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Sidorov</surname><given-names>Nikita G.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Сидоров</surname><given-names>Никита Геннадьевич</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>Postgraduate Student, Junior Researcher, Laboratory of Protective Antigens</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>аспирант, младший научный сотрудник лаборатории протективных антигенов</p></bio><email>deel@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Sorokina</surname><given-names>Ekaterina V.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Сорокина</surname><given-names>Екатерина В.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д.м.н., профессор, заведующая лабораторией механизмов регуляции иммунитета</p></bio><email>sorokina-cathrine@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Mikhailova</surname><given-names>Natalia A.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Михайлова</surname><given-names>Наталья А.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Laboratory of Protective Antigens</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д.м.н., профессор, заведующая лабораторией протективных антигенов</p></bio><email>n_michailova@inbox.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff1"><aff><institution xml:lang="en">I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток имени И.И. Мечникова»</institution></aff></aff-alternatives><pub-date date-type="preprint" iso-8601-date="2025-07-22" publication-format="electronic"><day>22</day><month>07</month><year>2025</year></pub-date><pub-date date-type="pub" iso-8601-date="2025-09-28" publication-format="electronic"><day>28</day><month>09</month><year>2025</year></pub-date><volume>28</volume><issue>4</issue><issue-title xml:lang="en"/><issue-title xml:lang="ru"/><fpage>919</fpage><lpage>924</lpage><history><date date-type="received" iso-8601-date="2025-04-16"><day>16</day><month>04</month><year>2025</year></date><date date-type="accepted" iso-8601-date="2025-06-22"><day>22</day><month>06</month><year>2025</year></date></history><permissions><copyright-statement xml:lang="en">Copyright ©; 2025, Kalinichenko E.O., Kozyreva O.V., Sidorov N.G., Sorokina E.V., Mikhailova N.A.</copyright-statement><copyright-statement xml:lang="ru">Copyright ©; 2025, Калиниченко Е.О., Козырева О.В., Сидоров Н.Г., Сорокина Е.В., Михайлова Н.А.</copyright-statement><copyright-year>2025</copyright-year><copyright-holder xml:lang="en">Kalinichenko E.O., Kozyreva O.V., Sidorov N.G., Sorokina E.V., Mikhailova N.A.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="ru">Калиниченко Е.О., Козырева О.В., Сидоров Н.Г., Сорокина Е.В., Михайлова Н.А.</copyright-holder><ali:free_to_read xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/"/><license><ali:license_ref xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/">https://creativecommons.org/licenses/by/4.0</ali:license_ref></license></permissions><self-uri xlink:href="https://rusimmun.ru/jour/article/view/17236">https://rusimmun.ru/jour/article/view/17236</self-uri><abstract xml:lang="en"><p>Opportunistic pathogens play an important role in development of respiratory infections, causing high morbidity and mortality rates. A promising approach is the use of antigen-based drugs from opportunistic bacteria that stimulate the immune system. Search for appropriate assay techniques and biomarkers of immune response is an important task in their development. Potential stimulation of myeloid cells is of particular interest for these purposes. The U937 cell line is widely used as a model for analyzing the functional activity of monocytes and macrophages, being derived from human histiocytic lymphoma cells and exhibiting promonocyte characteristics, The CD54 (ICAM-1) molecule is a surface glycoprotein that functions as an adhesion receptor and plays a key role in targeted migration of leukocytes from bloodstream to inflamed tissues. Under the inflammatory stimulation, expression of ICAM-1 increases significantly on the surface of immune cells, making it a potential activation marker in certain components of innate immune system, including U937 cell model. This study considered activation of CD54 (ICAM-1) receptor expression in human U937 promonocytic cells under the influence of two different antigen complex from opportunistic pathogens, supplied with immunostimulatory copolymer, or without its addition. The test antigen complex included antigens from four species of opportunistic bacteria: <italic>Escherichia coli, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae</italic>. As an additional immunostimulating agent, a copolymer of 2-methyl-5-vinylpyridine and N-vinylpyrrolidone hydrochloride was used. Flow cytometry was applied in order to assess CD54 (ICAM- 1) expression on U937 cells, The cells were stimulated with peptidoglycan from <italic>S. aureus</italic> (positive control), and with mentioned variants of the antigen complex form opportunistic bacteria. The cell activity was evaluated using the activation coefficients, which reflected the increase in CD54 expression. The activation coefficient for positive controls was considered significant if it reached, at least, 50% (activation of cells by the reference antigen), whereas cell activation by the studied bacterial antigen complexes was considered significant at an activation coefficient of at least 30%. It was shown that both variants and the positive control induced a dose-dependent increase in CD54 expression. The optimal stimulation concentration was 25 µg/mL. These effects confirmed ability of the antigen complex from opportunistic pathogens to activate monocyte-macrophage cells and enhance the innate immune response. The obtained results emphasize the importance of using ICAM-1 as a marker of immune cell activation. The tested method seems to be promising in order to test effectiveness of drugs based on opportunistic bacteria.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="ru"><p>Условно-патогенные бактерии играют важную роль в развитии респираторных инфекций, характеризующихся высокой заболеваемостью и смертностью. Перспективным направлением является применение препаратов на основе условно-патогенных бактерий, стимулирующих иммунитет. Важной задачей при их создании становится определение методов оценки и маркеров, отражающих усиление иммунного ответа. Известно, что для таких целей представляет интерес стимуляция миелоидных клеток. В качестве модели для анализа функциональной активности моноцитов и макрофагов широко применяется клеточная линия U937, происходящая из клеток гистиоцитарной лимфомы человека и обладающая характеристиками, близкими к промоноцитам. Рецептор молекулы CD54 (ICAM-1) представляет собой поверхностный гликопротеин, выполняющий функции адгезионного рецептора и играющий важную роль в обеспечении направленной миграции лейкоцитов из кровотока в воспаленные ткани. В условиях воспалительной стимуляции экспрессия ICAM-1 значительно возрастает на поверхности иммунных клеток, что позволяет рассматривать его как маркер активации компонентов врожденного иммунитета, включая клетки линии U937. В исследовании изучена активация экспрессии рецептора CD54 (ICAM-1) клетками человеческой промоноцитарной линии U937 под воздействием двух вариантов комплекса антигенов условно-патогенных бактерий: с добавлением иммуностимулируюшего сополимера и без него. В состав комплекса антигенов входили антигены из 4 видов условно-патогенных бактерий: <italic>Escherichia coli</italic>, <italic>Proteus vulgaris</italic>, <italic>Staphylococcus aureus</italic>, <italic>Klebsiella pneumoniae. </italic>В качестве дополнительного иммуностимулирующего агента использовали сополимер 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона гидрохлорида. Для оценки экспрессии CD54 (ICAM-1) на клетках U937 использовали метод проточной цитометрии. Клетки стимулировали пептидогликаном <italic>S. aureus</italic> (положительный контроль) и исследуемыми вариантами комплекса антигенов условно-патогенных бактерий. Активность клеток оценивали с помощью коэффициента активации, отражающего увеличение экспрессии CD54. Значение коэффициента активации положительного контроля считалось убедительным при достижении не менее 50% (активация клеток эталонным антигеном), в то время как активация клеток под действием исследуемых вариантов комплекса антигенов условно-патогенных бактерий признавалась значимой при коэффициенте активации не менее 30%. Показано, что оба варианта и положительный контроль индуцировали дозозависимое увеличение экспрессии CD54. Оптимальная концентрация стимуляции соответствовала 25 мкг/мл. Выявленный эффект подтвердил способность комплекса антигенов условно-патогенных бактерий активировать клетки моноцитарно-макрофагального ряда и усиливать врожденный иммунный ответ. Полученные результаты подчеркивают значимость использования ICAM-1 как маркера активации иммунных клеток. Апробированный метод является перспективным для оценки эффективности препаратов на основе условно-патогенных бактерий.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="en"><kwd>U937</kwd><kwd>monocytes</kwd><kwd>cell activation</kwd><kwd>innate immunity</kwd><kwd>ICAM-1</kwd><kwd>CD54</kwd><kwd>opportunistic bacteria antigens</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>U937</kwd><kwd>моноциты</kwd><kwd>активация клеток</kwd><kwd>врожденный иммунитет</kwd><kwd>ICAM-1</kwd><kwd>CD54</kwd><kwd>антигены условно-патогенных бактерий</kwd></kwd-group><funding-group/></article-meta></front><body></body><back><ref-list><ref id="B1"><label>1.</label><mixed-citation>Михайлова Н.А., Солдатенкова А.В., Грубер И.М., Курбатова Е.А., Свитич О.А., Зверев В.В., Лазарев С.А., Асташкина Е.А. Способ получения поликомпонентной вакцины на основе антигенов условно-патогенных микроорганизмов. Патент RU 2799527 CI, 05.07.2023. [Mikhajlova N.A., Soldatenkova A.V., Gruber I.M., Kurbatova E.A., Svitich O.A., Zverev V.V., Lazarev S.A., Astashkina E.A. Method of obtaining a multicomponent vaccine based on antigens of opportunistic microorganisms. Patent RU 2799527CI, 05.07.2023].</mixed-citation></ref><ref id="B2"><label>2.</label><mixed-citation>Ade N., Martinozzi-Teissier S., Pallardy M., Rousset F. Activation of U937 cells by contact sensitizers: CD86 expression is independent of apoptosis. J. Immunotoxicol., 2006, Vol. 3, no. 4, pp. 189-197.</mixed-citation></ref><ref id="B3"><label>3.</label><mixed-citation>Bui T.M., Wiesolek H.L., Sumagin R. ICAM-1: A master regulator of cellular responses in inflammation, injury resolution, and tumorigenesis. J. Leukoc. Biol., 2020, Vol. 108, no. 3, pp. 787-799.</mixed-citation></ref><ref id="B4"><label>4.</label><mixed-citation>Calderaro A., Buttrini M., Farina B., MontecchiniS., De Conto F., Chezzi C. Respiratory tract infections and laboratory diagnostic methods: a review with a focus on syndromic panel-based assays. Microorganisms, 2022, Vol. 10, no. 9, 1856. doi: 10.3390/microorganisms10091856.</mixed-citation></ref><ref id="B5"><label>5.</label><mixed-citation>Cazzola M., Anapurapu S., Page C.P. Polyvalent mechanical bacterial lysate for the prevention of recurrent respiratory infections: a meta-analysis. Pulm. Pharmacol. Ther. 2012, Vol. 25, no. 1, pp. 62-68.</mixed-citation></ref><ref id="B6"><label>6.</label><mixed-citation>GBD 2021 Upper Respiratory Infections Otitis Media Collaborators. Global, regional, and national burden of upper respiratory infections and otitis media, 1990–2021: a systematic analysis from the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Infect. Dis., 2025, Vol. 25, no. 1, pp. 36-51.</mixed-citation></ref><ref id="B7"><label>7.</label><mixed-citation>Lee R.A., Boucher H.W. Respiratory tract infections in the postpandemic era: a return to basics and call to action. Infect. Dis. Clin. North Am., 2024, Vol. 38, no.1, pp. xiii–xv.</mixed-citation></ref><ref id="B8"><label>8.</label><mixed-citation>Nascimento C.R., Rodrigues Fernandes N.A., Gonzalez Maldonado L.A., Rossa Junior C. Comparison of monocytic cell lines U937 and THP-1 as macrophage models for in vitro studies. Biochem. Biophys. Rep., 2022, Vol. 32, 101383. doi: 10.1016/j.bbrep.2022.101383.</mixed-citation></ref><ref id="B9"><label>9.</label><mixed-citation>Piroird C., Ovigne J.M., Rousset F., Martinozzi-Teissier S., Gomes C., Cotovio J., Alépée N. The Myeloid U937 Skin Sensitization Test (U-SENS) addresses the activation of dendritic cell event in the adverse outcome pathway for skin sensitization. Toxicol. In Vitro, 2015, Vol. 29, no. 5, pp. 901-916.</mixed-citation></ref><ref id="B10"><label>10.</label><mixed-citation>Sundström C., Nilsson K. Establishment and characterization of a human histiocytic lymphoma cell line (U-937). Int. J. Cancer, 1976, Vol. 17, no. 5, pp. 565-577.</mixed-citation></ref></ref-list></back></article>
