Russian Journal of ImmunologyRussian Journal of ImmunologyРоссийский иммунологический журнал1028-72212782-7291Russian Society of Immunology1727510.46235/1028-7221-17275-LCFSHORT COMMUNICATIONSКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯShort CommunicationLaboratory criteria for improving the diagnosis of autoimmune hepatitis and Wilson’s disease in childrenЛабораторные критерии для совершенствования диагностики аутоиммунного гепатита и болезни Вильсона у детейhttps://orcid.org/0000-0002-6292-7229ZhuzhulaAnastasia A.ЖужулаАнастасия Андреевна
Russian Federation

Junior Researcher, Laboratory of Experimental Immunology and Virology

младший научный сотрудник лаборатории экспериментальной иммунологии и вирусологии

anas-zh@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9213-5281KurbatovaOlga V.КурбатоваОльга Владимировна
Russian Federation

PhD (Medicine), Senior Researcher, Laboratory of Experimental Immunology and Virology

к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной иммунологии и вирусологии

putintseva@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0896-6996PetrichukSvetlana V.ПетричукСветлана Валентиновна
Russian Federation

PhD, MD (Biology), Professor, Chief Researcher, Laboratory of Experimental Immunology and Virology

д.б.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории экспериментальной иммунологии и вирусологии

cito@list.ruFisenkoAndrei P.ФисенкоАндрей Петрович
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Professor, Director

д.м.н., профессор, директор

Putintseva@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5263-6743SnovskayaMarina A.СновскаяМарина Андреевна
Russian Federation

PhD (Medicine), Leading Researcher, Laboratory of Experimental Immunology and Virology

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории экспериментальной иммунологии и вирусологии

snows@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2881-4703MovsisyanGoar B.МовсисянГоар Борисовна
Russian Federation

PhD (Medicine), Senior Researcher, Laboratory of Rare Hereditary Diseases; Gastroenterologist, Gastroenterology Department with the Hepatological Group

к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории редких наследственных болезней, врач-гастроэнтеролог гастроэнтерологического отделения с гепатологической группой

movsisyan@nczd.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4905-2373PotapovAlexander S.ПотаповАлександр Сергеевич
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Professor, Chief Researcher, Laboratory of Scientific Foundations of Pediatric Gastroenterology and Hepatology, Head of Gastroenterology Department with Hepatology Group, Professor, Department of Pediatrics and Pediatric Rheumatology

д.м.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории научных основ детской гастроэнтерологии и гепатологии, заведующий гастроэнтерологическим отделением с гепатологической группой, профессор кафедры педиатрии и детской ревматологии

potapov@nczd.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8923-4652SemikinaElena L.СемикинаЕлена Леонидовна
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Head, Laboratory Department, Professor, Department of Pediatrics and Pediatric Rheumatology

д.м.н., руководитель лабораторного отдела, профессор кафедры педиатрии и детской ревматологии

semikinaelena@yandex.ruNational Medical Research Center for Children’s HealthФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения РФI. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)ФГАОУ «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения РФ (Сеченовский университет)18072025280920252849719781505202522062025Copyright ©; 2025, Zhuzhula A.A., Kurbatova O.V., Petrichuk S.V., Fisenko A.P., Snovskaya M.A., Movsisyan G.B., Potapov A.S., Semikina E.L.Copyright ©; 2025, Жужула А.А., Курбатова О.В., Петричук С.В., Фисенко А.П., Сновская М.А., Мовсисян Г.Б., Потапов А.С., Семикина Е.Л.2025Zhuzhula A.A., Kurbatova O.V., Petrichuk S.V., Fisenko A.P., Snovskaya M.A., Movsisyan G.B., Potapov A.S., Semikina E.L.Жужула А.А., Курбатова О.В., Петричук С.В., Фисенко А.П., Сновская М.А., Мовсисян Г.Б., Потапов А.С., Семикина Е.Л.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://rusimmun.ru/jour/article/view/17275

Specification of laboratory criteria for improving differential diagnostics of children with autoimmune hepatitis (AIH) and Wilson’s disease (WD) is a relevant task in pediatrics. Increased titers of antinuclear factor (ANF) in blood serum is among laboratory criteria for diagnostics of AIH. Some WD cases have been described which can manifest as autoimmune hepatitis (AIH) with detection of non-specific autoantibodies, thus complicating the differential diagnosis. The aim of our study was to identify the specific features for determination of antinuclear factor on the Hep-2 cell line and specific autoantibodies using a triple cell substrate in children with autoimmune hepatitis and WD. We have examined 62 pediatric patients with WD and 28 children with AIH. ANF was determined on the HEp-2 cell line (ANA-HEp-2, AESKUSLIDES®, Germany). Specific auto-antibodies were detected by means of a triple substrate obtained from rodents, which included samples of kidney, liver and stomach tissues (LKS Mouse, Germany) using indirect fluorescence reactions applying an automated analyzer HELIOS® (Germany). The analysis revealed ANF positivity in 15 out of 62 (24%) children with WD. Positive ANF results were obtained in 26 out of 28 children AIH (93%), being significantly more common in AIH compared with WD. The study of specific autoantibodies using a triple substrate revealed positive results in 34 children with WD (55%), versus 26 children with AIH (93%), Hence, the specific auto-antibodies on the triple substrate are more commonly found in children with AIH (p < 0.001) than in children with WD. In children with suspected AIH, when a homogeneous type of luminescence is detected on the HEp-2 cell line, and with a combination of different luminescence types on a triple substrate, the presence of Wilson’s disease in patients cannot be excluded.

Определение лабораторных критериев для совершенствования дифференциальной диагностики детей с аутоиммунным гепатитом (АИГ) и болезнью Вильсона (БВ) является актуальным в педиатрии. Одним из критериев постановки диагноза АИГ является повышение титров антинуклеарного фактора (АНФ) в сыворотке крови. Описаны случаи, когда БВ может клинически протекать по типу АИГ с выявлением неспецифических аутоантител, что затрудняет дифференциальную диагностику. Цель исследования – выявить особенности определения антинуклеарного фактора на клеточной линии Hep-2 и специфических аутоантител с использованием тройного субстрата у детей с АИГ и БВ. Обследовано 62 ребенка с БВ и 28 детей с АИГ. Определяли антинуклеарный фактор (АНФ) на клеточной линии HEp-2 (клетки аденокарциномы гортани человека, ANA-HEp-2, AESKUSLIDES®, Германия) и специфические аутоантитела с использованием тройного субстрата, полученного от грызунов, который включает образцы тканей почки, печени и желудка (LKS Mouse, separated, Германия) с помощью реакции непрямой флюоресценции с использованием автоматического анализатора HELIOS® (Германия). Проведенный анализ выявил положительные результаты исследования АНФ у 15 детей из 62 (24%) с БВ. Положительные результаты АНФ получены у 26 детей из 28 (93%) с АИГ, достоверно чаще АНФ выявляется у детей с АИГ по сравнению с БВ. При исследовании специфических аутоантител с использованием тройного субстрата были выявлены положительные результаты у 34 детей с БВ (55%) и у 26 детей с АИГ (93%), достоверно чаще специфические аутоантитела на тройном субстрате выявляются у детей с АИГ (р < 0,001), чем у детей с БВ. При обследовании ребенка с подозрением на АИГ при выявлении гомогенного типа свечения на клеточной линии HEp-2 и при комбинации различных типов свечения на тройном субстрате нельзя исключать наличие у пациентов БВ.

childrenautoimmune hepatitisWilson’s diseaseantinuclear factorHep-2 cell linetriple LKS murine substrateautoantibodies to microsomesLKM-1 antibodiesliverkidneyssmooth muscle antibodiesmitochondrial autoantibodiesgastric parietal cell autoantibodiesдетиаутоиммунный гепатитболезнь Вильсонаантинуклеарный фактор на клеточной линии Hep- 2тройной субстрат LKS Mouseаутоантитела к микросомам печени и почек 1-го типааутоантитела к гладким мышцамаутоантитела к митохондриямаутоантитела к париетальным клеткам желудкаГригорьев К.И., Выхристюк О.Ф. Аутоиммунный гепатит у детей // Лечебное дело, 2022. № 3-4. С. 4-13. [Grigoriev K.I., Vykhristyuk O.F. Autoimmune hepatitis in children. Lechebnoe delo = Medicine, 2022, no. 3-4, pp. 4-13. (In Russ.)]Жужула А.А., Курбатова О.В., Сновская М.А., Фисенко А.П., Петричук С.В., Коноплева Т.Н., Семикина Е.Л. Специфические антинуклеарные антитела при разных типах свечения антинуклеарного фактора на клеточной линии HEp-2 у детей с аутоиммунными заболеваниями // Российский иммунологический журнал, 2025. Т. 28, № 2. C. 247-254. [Zhuzhula A.A., Kurbatova O.V., Snovskaya M.A., Fisenko A.P., Petrichuk S.V., Konopleva T.N., Semikina E.L. Specific antinuclear antibodies in different fluorescence patterns of antinuclear factor on the HEp-2 cell line in children with autoimmune diseases. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Immunology, 2025, Vol. 28, no. 2, pp. 247-254. (In Russ.)] doi: 10.46235/1028-7221-17038-SAA.Жужула А.А., Курбатова О.В., Петричук С.В., Парахина Д.В., Сновская М.А., Мовсисян Г.Б., Семикина Е.Л., Потапов А.С., Фисенко А.П. Диагностическая значимость определения антинуклеарных антител у детей с аутоиммунным гепатитом // Аллергология и иммунология в педиатрии, 2024. № 1. С. 36-40. [Zhuzhula A.A., Kurbatova O.V., Petrichuk S.V., Parakhina D.V., Snovskaya M.A., Movsisyan G.B., Semikina E.L., Potapov A.S., Fisenko A.P. Diagnostic significance of the determination of antinuclear antibodies in children with autoimmune hepatitis. Allergologiya i immunologiya v pediatrii = Allergology and Immunology in Paediatrics, 2024, no. 1, pp. 36-40. (In Russ.)]Курбатова О.В., Жужула А.А., Лапин С.В., Сновская М.А., Козлова Д.И., Петричук С.В., Купцова Д.Г., Кузнецова Д.А., Мовсисян Г.Б., Комарова А.Д., Радыгина Т.В., Гуслев А.Б., Холопова И.В., Семикина Е.Л., Макарова С.Г., Потапов А.С., Фисенко А.П. Антинуклеарные антитела у детей с болезнью Вильсона // Аллергология и иммунология в педиатрии, 2024. № 1. С. 48-52. [Kurbatova O.V., Zhuzhula A.A., Lapin S.V., Snovskaya M.A., Kozlova D.I., Petrichuk S.V., Kuptsova D.G., Kuznetsova D.A., Movsisyan G.B., Komarova A.D., Radygina T.V., Guslev A.B., Kholopova I.V., Semikina E.L., Makarova S.G., Potapov A.S., Fisenko A.P. Antinuclear antibodies in children with Wilson’s disease. Allergologiya i immunologiya v pediatrii = Allergology and Immunology in Paediatrics,2024, no. 1, pp. 48-52. (In Russ.)]Курбатова О.В., Мовсисян Г.Б., Петричук С.В., Купцова Д.Г., Демьянов Д.C., Парахина Д.В., Радыгина Т.В., Семикина Е.Л., Потапов А.С., Анушенко А.О., Фисенко А.П. Показатели клеточного иммунитета и метаболизм лимфоцитов у детей с аутоиммунным гепатитом первого типа при разных стадиях фиброза печени // Иммунопатология, аллергология, инфектология, 2024. № 2. С. 75-83. [Kurbatova O.V., Movsesyan G.B., Petrichuk S.V., Kuptsova D.G., Demyanov D.S., Parakhina D.V., Radygina T.V., Semikina E.L., Potapov A.S., Anushenko A.O., Fisenko A.P. Indicators of cellular immunity and lymphocyte metabolism in children with type I autoimmune hepatitis at different stages of liver fibrosis. Immunopatologiya, allergologiya, infektologiya = Immunopathology, Allergology, Infectology, 2024, no. 2, pp. 75-83. (In Russ.)]Курбатова О.В., Мовсисян Г.Б., Петричук С.В., Парахина Д.В., Демьянов Д.C., Купцова Д.Г., Радыгина Т.В., Семикина Е.Л., Потапов А.С., Фрейдлин Е.В. Информативность лабораторных маркеров в оценке стадии фиброза печени у детей с аутоиммунным гепатитом первого типа // Аллергология и иммунология в педиатрии, 2023. № 1. С. 53-55. [Kurbatova O.V., Movsisyan G.B., Petrichuk S.V., Parakhina D.V., Demyanov D.S., Kuptsova D.G., Radygina T.V., Semikina E.L., Potapov A.S., Freidlin E.V. Informative value of laboratory markers in assessing the stage of liver fibrosis in children with type 1 autoimmune hepatitis. Allergologiya i immunologiya v pediatrii = Allergology and Immunology in Paediatrics, 2023, no. 1, pp. 53-55. (In Russ.)]Рекомендации EASL по лечению аутоиммунного гепатита // Journal of Hepatology. Русское издание, 2015. Т. 1, № 5. С. 111-150. [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://easl.eu/wp-content/uploads/2018/10/2015-AIH_RU.pdf. [EASL recommendations for the treatment of autoimmune hepatitis. Journal of Hepatology. Russkoe izdanie = Journal of Hepatology. Russian edition, 2015, Vol. 1, no. 5, pp. 111-150. [Electronic resource]. Available at: https://easl.eu/wp-content/uploads/2018/10/2015-AIH_RU.pdf. (In Russ.)]Нарушения обмена меди (болезнь Вильсона): клинические рекомендации. М., 2014. 79 с. [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://cr.minzdrav.gov.ru/view-cr/376_3. [Copper metabolism Disorders (Wilson’s disease): Clinical Guidelines. Moscow, 2014. 79 p. [Electronic resource]. Available at: https://cr.minzdrav.gov.ru/view-cr/376_3.Фисенко А.П., Сурков А.Н., Потапов А.С., Анушенко А.О., Батырова А.С., Дворяковский И.В., Журкова Н.В., Кулебина Е.А., Кустова О.В., Лазуренко С.Б., Мовсисян Г.Б., Свиридова Т.В., Туманова Е.Л., Четкина Т.С. Болезнь Вильсона у детей. М.: НМИЦ здоровья детей, 2019. 84 с. [Fisenko A.P., Surkov A.N., Potapov A.S., Anushenko A.O., Batyrova A.S., Dvoryakovsky I.V., Zhurkova N.V., Kulebina E.A., Kustova O.V., Lazurenko S.B., Movsisyan G.B., Sviridova T.V., Tumanova E.L., Chetkina T.S. Wilson’s disease in children]. Moscow: National Medical Research Center for Children’s Health, 2019. 84 p.Циммерман Я.С. Болезнь Вильсона – гепатоцеребральная дистрофия // Клиническая медицина, 2017. Т. 95, № 4. С. 310-315. [Tsimmerman Ya.S. Wilson’s disease – hepatocerebral dystrophy. Klinicheskaya meditsina = Clinical Medicine, 2017, Vol. 95, no. 4, pp. 310-315. (In Russ.)]Юсупов Ф.А., Юлдашев А.А. Болезнь Вильсона-Коновалова: обзор литературы и случай из практики // Бюллетень науки и практики, 2023. Т. 9, № 3. С. 194-210. [Yusupov F.A., Yuldashev A.A. Wilson-Konovalov disease: case practices do not decrease literature review. Byulleten nauki i praktiki = Bulletin of Science and Practice, 2023, Vol. 9, no. 3, pp. 194-210. (In Russ.)]Engel B., Diestelhorst J., Hupa-Breier K.L., Kirchner T., Henjes N., Loges S., Yuksel M., Janczyk W., Lalanne C., Zachou K., Oo Y.H., Gournay J., Pape S., Drenth J.P.H., Renand A., Dalekos G.N., Muratori L., Socha P., Ma Y., Arikan C., Baumann U., Manns M.P., Wedemeyer H., Junge N., Jaeckel E., Taubert R. Detection of polyreactive immunoglobulin G facilitates diagnosis in children with autoimmune hepatitis. Hepatol. Int., 2024, Vol. 18, no. 4, pp. 1214-1226.Gromadzka G., Czerwińska J., Krzemińska E., Przybyłkowski A., Litwin T. Wilson’s disease-crossroads of genetics, inflammation and immunity/autoimmunity: clinical and molecular issues. Int. J. Mol. Sci., 2024, Vol. 25, no. 16, 9034. doi: 10.3390/ijms25169034.Klotz W., Herold M. How to test antinuclear antibodies to diagnose autoimmune hepatitis. J. Hepatol., Vol. 79, no. 5, pp. e206-e207.