Russian Journal of ImmunologyRussian Journal of ImmunologyРоссийский иммунологический журнал1028-72212782-7291Russian Society of Immunology1728110.46235/1028-7221-17281-IAIORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleEvaluation of ILl-10 and IL-17 in cell culture supernatants during the expansion of gamma delta T cells from the blood of patients with reactive erythemaОпределение IL-10 и IL-17 в супернатантах клеточных культур при экспансии γδ Т-лимфоцитов, выделенных из крови больных реактивными эритемамиhttps://orcid.org/0000-0002-1188-65781052-6474SorokinaEkaterina V.СорокинаЕкатерина Вячеславовна
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity, I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera; Professor, Department of Dermatovenerology and Cosmetology, Academy of Postgraduate Education, Federal Research and Practical Center of Specialized Medical Care and Medical Technologies, Federal Medical-Biological Agency

д.м.н., профессор, заведующая лабораторией механизмов регуляции иммунитета ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток имени И.И. Мечникова»; профессор кафедры дерматовенерологии и косметологии Академии постдипломного образования ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий» Федерального медико-биологического агентства

sorokina-cathrine@yandex.ruKalinichenkoEugen O.КалиниченкоЕвгений Олегович
Russian Federation

PhD (Medicine), Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity

к.м.н., научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета

gladius.domini@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-8143-73569846-1006BishevaIrina V.БишеваИрина Васильевна
Russian Federation

Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity

научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета

ibisheva@yandex.ruStolpnikovaVera N.СтолпниковаВера Николаевна
Russian Federation

PhD (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity

к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета

stolpnikova@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2342-9307SkhodovaSvetlana A.СходоваСветлана Анатольевна
Russian Federation

PhD (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Mechanisms of Regulation of Immunity

к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории механизмов регуляции иммунитета

skhodova2009@yandex.ruI.I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Serums, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian FederationФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, Москва, РоссияFederal Research and Clinical Center for Specialized Medical Care and Medical Technologies, Federal Medical and Biological Agency, Moscow, Russian FederationФедеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий Федерального медико-биологического агентства050820251801202629181921206202524072025Copyright ©; 2026, Sorokina E.V., Kalinichenko E.O., Bisheva I.V., Stolpnikova V.N., Skhodova S.A.Copyright ©; 2026, Сорокина Е.В., Калиниченко Е.О., Бишева И.В., Столпникова В.Н., Сходова С.А.2026Sorokina E.V., Kalinichenko E.O., Bisheva I.V., Stolpnikova V.N., Skhodova S.A.Сорокина Е.В., Калиниченко Е.О., Бишева И.В., Столпникова В.Н., Сходова С.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://rusimmun.ru/jour/article/view/17281

Reactive erythemas represent a group of dermatoses with complex immunogenesis as in a number of autoinflammatory disorders, with probable involvement of γδ T cell subpopulations. Despite important role of IL-17, its excessive synthesis, e.g., by γδ T cells, may induce autoinflammation. On the contrary, IL-10 plays a key role in the control of innate immune responses by suppressing the function of monocytes/macrophages and reducing production of pro-inflammatory cytokines by these cells. Our aim was to assess the content of IL-17 and IL-10 in cell culture supernatants from γδ T cells expanded by in vitro cultivation of blood lymphocytes from the patients with erythema. The cultures were supplied by zoledronate, IL-2 and IL-15. Materials and methods: Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated from 8 patients with reactive erythema (5 patients with erythema multiforme, 1 patient with ring–shaped centrifugal erythema, 2 patients with erythema migrans, an early form of Lyme disease) and two healthy donors aged 23 to 70 years. A modified van Ackeretal method (2016) was used to culture γδ T lymphocytes. Spontaneous and induced cytokine secretion was determined by solid-phase ELISA using Human IL-17 ELISA Kit (RK00397, ABclonal BiotechnologyCo., China) and Interleukin-10-ELISA-BEST (Vector Best, Russia) according to the manufacturers' instructions. Results and Conclusion. In patients with reactive erythema, 3.1% to 62.8% of cells with γδ TCR expression of were obtained by 7 days of cultivation with zoledronate, IL-2 and IL-15. The lowest percentage of these cells was observed in blood cell culture from patients with continuously recurrent erythema multiforme and ring-shaped centrifugal erythema. In the group of patients studied, high levels of induced IL-17 production may suggest the presence of autoimmune component in pathogenesis of the disease and/or to reflect the severity of its course. The effectiveness of therapy in the examined patients correlated with ability of blood cells to in vitro synthesis and release of IL-10. It has been shown that high values of spontaneous and induced IL-10 production are associated with good response to therapy (significant clinical improvement, long-term clinical remission). Meanwhile, suboptimal therapeutic effect (rapid development of relapses after the end of the course of therapy) was detected in cases of low spontaneous and induced IL-10 production. The data obtained indicate the probable prognostic significance of these analytes as biomarkers. In future, the determination of these factors in MLPC culture in patients with studied pathologies may improve assessment of therapeutic efficiency and predict the course of the disease. However, further research is required in this area, including studies of other disorders.

Реактивные эритемы – группа дерматозов со сложным иммуногенезом, в котором, как и в развитии многих аутовоспалительных заболеваний, принимают участие субпопуляции γδ Т-клеток. Несмотря на важную роль IL-17 в функционировании иммунной системы, его избыточный синтез, в том числе γδ Т-клетками, способен индуцировать аутовоспаление. При этом IL-10, напротив, играет ключевую роль в контроле врожденных иммунных реакций, подавляя функцию моноцитов/макрофагов. Цель – определение содержания IL-10 и IL-17 в супернатантах клеточных культур при экспансии γδ Т-лимфоцитов, выделенных из крови больных реактивными эритемами. Мононуклеарные клетки периферической крови (МНПК) выделяли от 8 пациентов с реактивными эритемами и двух здоровых доноров в возрасте от 23 до 70 лет и культивировали для селективного размножения γδ T-лимфоцитов в среде RPMI-1640 с добавлением 10%-ной аутологичной сыворотки (первые 3 суток – с 3 мкМ золедроната, далее 4 суток с IL-2 (100 МЕ/мл) и IL-15 (10 нг/мл)). Клеточный состав культуры анализировали методом проточной цитометрии. Спонтанную и индуцированную секрецию цитокинов определяли методом твердофазного ИФА с использованием наборов Human IL-17 ELISA Kit (RK00397, ABclonal Biotechnology Co., Китай) и «Интерлейкин-10-ИФА-БЕСТ» (АО «Вектор-Бест», Россия) согласно инструкциям производителей. Обработку данных осуществляли с построением калибровочных кривых путем применения онлайн-калькулятора ELISA calculation sheet (Hycult Biotech, США). У пациентов с реактивными эритемами в процессе культивирования с золедронатом, IL-2 и IL-15 было получено к 7-му дню культивирования до 62,8% МНПК с экспрессией γδ TCR. В группе обследованных больных выявлены высокие уровни индуцированной продукции IL-17, что может указывать на наличие аутоиммунного компонента в патогенезе заболевания или отражать тяжесть течения. Показано, что высокие значения спонтанной и индуцированной продукции IL-10 ассоциируются с длительной ремиссией. Полученные данные указывают на вероятную прогностическую значимость этих аналитов как биомаркеров. Однако необходимы дальнейшие исследования в этом направлении, в том числе при других нозологических формах.

erythema multiformering-shaped erythemamigrating erythemagamma delta T lymphocytesinterleukinsbiomarkersмногоформная эритемакольцевидная эритемамигрирующая эритемагамма дельта Т-лимфоцитыинтерлейкиныбиомаркерыBernardini N., Skroza N., Tolino E., Mambrin A., Anzalone A., Balduzzi V., Colapie-tra D., Marchesiello A., Michelini S., Proietti I., Potenza C. IL17 and its role in inflammatory, autoimmune, and oncological skin diseases: state of art. Int. J. Dermatol., 2019, Vol. 59, no. 4, pp. 406-411.Bøyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. Isolation of monuclear cells by one centrifugation, and of granulocytes by combining centrifugation and sedimentation at 1 g. Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl., 1968, Vol. 97, рр. 77-89.Cai Y., Shen X., Ding C., Qi C., Li K., Li X., Jala V.R., Zhang H., Wang T., Zheng J., Yan J. Pivotal role of dermal IL-17-producing γδ T cells in skin inflammation. Immunity, 2011, Vol. 35, no. 4, pp. 596-610.Cheuk S., Wiken M., Blomqvist L., Nylén S., Talme T., Ståhle M., Eidsmo L. Epidermal Th22 and Tc17 cells form a localized disease memory in clinically healed psoriasis. J. Immunol., 2014, 192, no. 7, pp. 3111-3120.Khan M.W.A., Otaibi A.A., Sherwani S., Alshammari E.M., Al-Zahrani S.A., Khan W.A., Alsukaibi A.K.D., Alouffi S., Khan S.N. Optimization of methods for peripheral blood mononuclear cells isolation and expansion of human gamma delta T cells. Bioinformation, 2021, Vol. 17, no. 3, рр. 460-469.Laggner U., Di Meglio P., Perera G.K., Hundhausen C., Lacy K.E., Ali N., Smith C.H., Hayday A.C., Nickoloff B.J., Nestle F.O. Identification of a novel proinflammatory human skin-homing Vγ9Vδ2 T cell subset with a potential role in psoriasis. J. Immunol., 2011, Vol. 187, no. 5, pp. 2783-2793.Roth S.A., Simanski M., Rademacher F., Schroder L., Harder J. The pattern recognition receptor NOD2 mediates Staphylococcus aureus-induced IL-17C expression in keratinocytes. J. Invest. Dermatol., 2014, Vol. 134, no. 2, pp. 374-380.Rouvier E., Luciani M.F., Mattei M.G., Denizot F., Golstein P. CTLA-8, cloned from an activated T cell, bearing AU-rich messenger RNA in stability sequences, and homologous to a herpesvirus Saimiri Gene. J. Immunol., 1993, Vol. 150, no. 12, pp. 5445-5456.Tamassia N., Arruda-Silva F., Calzetti F., Lonardi S., Gasperini S., Gardiman E., Bianchetto-Aguilera F., Benerini Gatta L.B., Girolomoni G., Mantovani A., Vermi W., Cassatella M.A. A Reappraisal on the Potential Ability of Human Neutrophils to Express and Produce IL-17 Family Members In Vitro: Failure to Reproducibly Detect It. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 795. doi: 10.3389/fimmu.2018.00795.Teunissen M.B., Munneke J.M., Bernink J.H., Bernink J.H., Spuls P.I., Res P.C., Velde A.T., Cheuk S., Brouwer M.W., Menting S.P., Eidsmo L., Spits H., Hazenberg M.D., Mjösberg J. Composition of innate lymphoid cell subsets in the human skin: enrichment of NCR(+) ILC3 in lesional skin and blood of psoriasis patients. J. Invest. Dermatol., 2014, Vol. 134, no. 9, pp. 2351-2360.Van Acker H.H., Anguille S., Willemen Y., Van den Bergh J.M., Berneman Z.N., Lion E., Smits E.L., van Tendeloo V.F. Interleukin-15 enhances the proliferation, stimulatory phenotype, and antitumor effector functions of human gamma delta T cells. J. Hematol. Oncol., 2016, Vol. 9, no. 1, 101. doi: 10.1186/s13045-016-0329-3.Venken K., Jacques P., Mortier C., Labadia M.E., Decruy T., Coudenys J., Hoyt K., Wayne A.L., Hughes R., Turner M., Van Gassen S., Martens L., Smith D., Harcken C., Wahle J., Wang C.-T., Verheugen E., Schryvers N., Varkas G., Cypers H., Wittoek R., Piette Y., Gyselbrecht L., Van Calenbergh S., van den Bosch F., Saeys Y., Nabozny G., Elewaut D. ROR gamma t inhibition selectively targets IL-17 producing iNKT and γδ-T cells enriched in spondyloarthritis patients. Nat. Commun., 2019, Vol. 10, no. 1, 9. doi: 10.1038/s41467-018-07911-6.Xu M., Dong C. IL-25 in allergic inflammation. Immunol. Rev., 2017, Vol. 278, no. 1, pp. 185-191.Xu M., Lu H., Lee Y.H., Wu Y., Liu K., Shi Y., An H., Zhang J., Wang X., Lai Y., Dong C. An Interleukin-25-mediated autoregulatory circuit in keratinocytes plays a pivotal role in psoriatic skin inflammation. Immunity, 2018, Vol. 48, no. 4, pp. 787-798.e4.Yao Z., Painter S.L., Fanslow W.C., Ulrich D., Macduff B.M., Spriggs M.K., Armitage R.J. Human IL-17: a novel cytokine derivided from T cells. J. Immunol., 1995, Vol. 155, no. 12, pp. 5483-5486.