Antibodies to various modifications of low-density lipoproteins have been detected in human blood. Of particular interest is the least studied modification of low-density lipoproteins with hypochlorite, which is a product of myeloperoxidase activity, and its antigenic properties. The aim of this study was to confirm the specificity of antibodies to hypochlorite-low-density lipoproteins and to study their possible role in atherogenesis, including the relationship with coronary artery disease and the effect on cholesterol accumulation by macrophages. To assess the immunogenicity of hypochlorite-low-density lipoproteins, rabbits were immunized with autologous low-density lipoproteins modified with sodium hypochlorite in vitro. The level of antibodies was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay, using human low-density lipoproteins and rabbit low-density lipoproteins, modified with hypochlorite in vitro as antigens. The specificity of antibodies was tested by competitive enzyme-linked immunosorbent assay. The uptake of native or hypochlorite-modified low-density lipoproteins was assessed by the accumulation of cholesterol and its esters in macrophages differentiated from peripheral blood mononuclear cells. Immunization of rabbits with autologous hypochlorite-low-density lipoproteins leads to the appearance of specific antibodies. The results confirm that the modification of low-density lipoproteins with hypochlorite leads to the formation of specific antigenic determinants on these particles, different from those formed with other studied modifications of low-density lipoproteins. In the blood serum of most patients, IgG antibodies to hypochlorite- low-density lipoproteins were detected. At the same time, the content of antibodies to hypochlorite-low-density lipoproteins in patients with coronary artery disease was significantly lower than in patients with preclinical atherosclerosis and healthy individuals. Incubation of macrophages differentiated from peripheral blood mononuclear cells with hypochlorite- low-density lipoproteins in the presence of specific antibodies led to a decrease in the accumulation of cholesterol esters by these cells. The obtained data indicate the potential ability of antibodies to hypochlorite-low-density lipoproteins to reduce the atherogenic effects of modified low-density lipoproteins, which may open up prospects for the development of new approaches to the treatment of atherosclerosis.
В крови человека обнаружены антитела к различным модификациям липопротеинов низкой плотности. Особый интерес представляет наименее изученная модификация липопротеинов низкой плотности гипохлоритом, являющимся продуктом деятельности миелопероксидазы, и её антигенные свойства. Целью настоящего исследования было подтвердить специфичность антител к липопротеинам низкой плотности, модифицированным гипохлоритом и изучить их возможную роль в атерогенезе, включая связь с ишемической болезнью сердца и влияние на накопление холестерина макрофагами. Для оценки иммуногенности гипохлорит-липопротеинов низкой плотности, кроликов иммунизировали аутологичными липопротеинами низкой плотности, модифицированными гипохлоритом натрия in vitro. Методом твердофазного иммуноферментного анализа оценивали уровень антител, в качестве антигенов использовались человеческие липопротеины низкой плотности и кроличьи липопротеины низкой плотности, модифицированные гипохлоритом in vitro. Специфичность антител проверяли методом конкурентного иммуноферментного анализа. Захват липопротеинов низкой плотности, нативных или гипохлорит-модифицированных, оценивали по накоплению холестерина и его эфиров в макрофагах, дифференцированных из мононуклеаров периферической крови. Иммунизация кроликов аутологичными гипохлорит- липопротеинами низкой плотности приводит к появлению специфичных антител. Полученные результаты подтверждают, что модификация липопротеинов низкой плотности гипохлоритом, приводит к формированию на этих частицах специфических антигенных детерминант, отличных от образующихся при других изучаемых модификациях липопротеинов. У большинства пациентов в сыворотке крови были обнаружены антитела классов IgG к гипохлорит-липопротеинам низкой плотности. При этом содержание антител к лиопротеинам низкой плотности, модифицированным гипохлоритом у пациентов с ишемической болезнью сердца было существенно ниже, чем у пациентов с доклиническим атеросклерозом и здоровых лиц. Инкубация макрофагов, дифференцированных из мононуклеаров периферической крови, с гипохлорит-липопротеинами низкой плотности в присутствии специфичных антител приводила к снижению накопления эфиров холестерина этими клетками. Полученные данные свидетельствуют о потенциальной способности антител к гипохлорит модифицированным липопротеинам низкой плотности снижать атерогенные эффекты модифицированных липопротеинов, что может открывать перспективы для разработки новых подходов к лечению атеросклероза.