Russian Journal of ImmunologyRussian Journal of ImmunologyRussian Journal of Immunology1028-72212782-7291Russian Society of Immunology1752110.46235/1028-7221-17521-MEOForum Sochi 2026Школа Клинической Иммунологии «Сочи-2026»UnknownMODULATING EFFECTS OF SYNTHETIC THYMIC HEXAPEPTIDE IN AN IN VITRO EXPERIMENT ON SUBSETS CD66B+CD16+CD11B+CD11C- AND CD66B+CD16+CD11B+CD11C+ NEUTROPHIL GRANULOCYTES FROM HEALTHY CHILDREN AND CHILDREN WITH ACUTE DESTRUCTIVE PNEUMONIA COMPLICATED BY SEPSISМОДУЛИРУЮЩИЕ ВЛИЯНИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VITRO СИНТЕТИЧЕСКОГО ТИМИЧЕСКОГО ГЕКСАПЕПТИДА НА СУБПОПУЛЯЦИИ CD66B+CD16+CD11B+CD11C- И CD66B+CD16+CD11B+CD11C+ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ УСЛОВНО-ЗДОРОВЫХ ДЕТЕЙ И ДЕТЕЙ С ОСТРОЙ ДЕСТРУКТИВНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ, ОСЛОЖНЕННОЙ СЕПСИСОМhttps://orcid.org/0000-0001-8005-932565075544342092-6412ChudilovaGalina AnatolievnaЧудиловаГалина Анатольевна
Russian Federation

PhD, MD (Biology), Associate Professor, Head of the Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of the Central Research Laboratory, Professor of the Department of Clinical Immunology, Allergology and Laboratory Diagnostics

д.б.н., доцент, заведующая отделом клинико-экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии Центральной научно-исследовательской лаборатории, профессор кафедры клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики

chudilova2015@yandex.ruhttps://orcid.org/0009-0001-8972-056XSafontsevaAnastasia DmitrievnaСафонцеваАнастасия Дмитриевна
Russian Federation

Postgraduate Student, Department of Clinical Immunology, Allergology and Laboratory Diagnostics, Junior Researcher of the Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of the Central Scientific Research Laboratory

аспирант кафедры клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики, младший научный сотрудник отдела клинико-экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии Центральной научно-исследовательской лаборатории

ensmorbi@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1912-2038ChapurinaValeriya NikolayevnaЧапуринаВалерия Николаевна
Russian Federation

PhD (Medical Sciences), Associate Professor of the Department of Clinical Immunology, Allergology and Laboratory Diagnostics, Senior Researcher of the Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of the Central Scientific Research Laboratory

кандидат медицинских наук, доцент кафедры клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики, старший научный сотрудник отдела клинико-экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии Центральной научно-исследовательской лаборатории

Pavlenkoevi2016@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7041-7106LomtatidzeLyudmila ViktorovnaЛомтатидзеЛюдмила Викторовна
Russian Federation

PhD in Biology, senior researcher of the department of clinical and experimental immunology and molecular biology of the Central Scientific Research Laboratory, Associate Professor of the Department of Clinical Immunology, Allergology and Laboratory Diagnostics

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела клинико-экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии Центральной научно-исследовательской лаборатории, доцент кафедры клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики

llomtatidze@mail.ruFederal State Budgetary Institution of Higher Professional Education «Kuban State Medical University» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation, Krasnodar, RussiaФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства Здравоохранения Российской Федерации, г. Краснодар, Россия030820262904202621072026Copyright ©; , Chudilova G.A., Safontseva A.D., Chapurina V.N., Lomtatidze L.V.Copyright ©; , Чудилова Г.А., Сафонцева А.Д., Чапурина В.Н., Ломтатидзе Л.В.Chudilova G.A., Safontseva A.D., Chapurina V.N., Lomtatidze L.V.Чудилова Г.А., Сафонцева А.Д., Чапурина В.Н., Ломтатидзе Л.В.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://rusimmun.ru/jour/article/view/17521

Neutrophil granulocyte (NG) functional disorders can lead to the severe or course of purulent-inflammatory diseases (PID). The use of immunomodulatory substances can change the level of NG receptor expression and improve their functional activity. Research of studied NG subsets CD66b+CD16+CD11b+CD11c- and CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ impairments, NG effector functions and the effect of immunomodulatory substances on them in children with PID can serve as a basis for development of diagnostic tools and new immunotherapeutic approaches.

Objective: to clarify the modulatory effects of a synthetic thymic hexapeptide (HP) on the subsets of CD66b+CD16+CD11b+CD11c- and CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ neutrophilic granulocytes in vitro system in healthy children and children with acute destructive pneumonia complicated by sepsis (ADP-s).

Materials and methods: peripheral blood (PB) samples of children aged 2-5 years were studied: with ADP-s (n=12), the study group (SG), and healthy children (n=17), the comparison group (CG). The samples were incubated with HP (10-6 g/l, 60 min, T=37°C) - SG1, CG1. The following parameters were determined: the number of CD66b+CD16+CD11b+CD11c- and CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ NG subsets, the MFI of molecules, NADPH-oxidase activity in the NBT test, and the number of NETs in PB smears.

Results: Two NG subsets CD66b+CD16+CD11b+CD11c- and CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ were detected in SG and CG. The SG showed 4,5-fold increase in CD66b+CD16+CD11b+CD11c+NG subset, 5,5-fold decrease in CD66b+CD16+CD11b+CD11c-NG subset (p1,2<0.05), lower MFI of receptors in both subsets relative to CG, presence of NETs. Also, in SG, an increase in %PhPCsp and MCIsp and a decrease in these indicators after S.aureus treatment were established, which indicates the depletion of oxidase reserves (p1,2<0.05). Incubation with HP did not affect the NG content and phenotype of the studied subsets in CG1. In SG1, the effects of HP were manifested in 6-fold increase in the proportion of the CD66b+CD16+CD11b+CD11c-NG subset, a 5-fold decrease in the proportion of the CD66b+CD16+CD11b+CD11c+NG subset (p<0.05), restoration of oxidase activity and a decrease in the number of NETs.

Conclusion. The obtained data confirm the immunomodulatory effect of HP in vitro, testify to the positive effect on the studied NG subsets, accompanied by the restoration of the microbicidal activity of NG in children with ADP-s and can be translated into clinical practice.

Нарушения функции нейтрофильных гранулоцитов (НГ) могут способствовать развитию тяжелого течения гнойно-воспалительных заболеваний (ГВЗ). Воздействие иммуномодулирующих субстанций способно изменить уровень экспрессии рецепторов НГ и улучшить их функциональную активность. Исследование нарушений в субпопуляциях НГ CD66b+CD16+CD11b+CD11c- и CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ и оценка эффекторных функций НГ, а также влияния на них иммуномодулирующих субстанций, могут послужить основой для разработки диагностических инструментов и новых иммунотерапевтических подходов.

Цель исследования: уточнить эффекты модулирующих влияний синтетического тимического гексапептида на субпопуляции НГ CD66b+CD16+CD11b+CD11c- и CD66b+CD16+CD11b+CD11c+ в системе in vitro у условно-здоровых детей и детей с острой деструктивной пневмонией, осложненной сепсисом (ОДПс).

Материалы и методы: исследованы образцы периферической крови (ПК) детей 2-5 лет: с ОДПс (n=12) - группа исследования (ГИ), условно-здоровых детей (n=17) – группа сравнения (ГС). Образцы инкубировали с ГП (10-6 г/л, 60 мин, Т 37°С) - ГИ1, ГС1. Определяли: количество НГ субпопуляций CD66b+CD16+CD11b+CD11c- и CD66b+CD16+CD11b+CD11c+, плотность экспрессии молекул по MFI, NADPH-оксидазную активность в NBT-тесте, количество NETs в мазках ПК.

Результаты: В ПК ГС и ГИ выявлено две субпопуляции НГ CD66b+CD16+CD11b+CD11c- и CD66b+CD16+CD11b+CD11c+. В ГИ показано увеличение в 4,5 раза доли субпопуляции CD66b+CD16+CD11b+CD11c+НГ и снижение в 5,5 раза доли субпопуляции CD66b+CD16+CD11b+CD11c-НГ (р1,2<0,05). НГ обеих изучаемых субпопуляций в ГИ характеризовались более низкой MFI рецепторов относительно ГС. Также в ГИ установлено повышение %ФПКсп и СЦИсп и снижение данных показателей при нагрузке S.aureus, что свидетельствует об истощении оксидазных резервов (р1,2<0,05). В ПК ГИ установлено наличие NETs. Инкубация с ГП не влияла на количество НГ и фенотип исследуемых субпопуляций в ГС1. В ГИ1 эффекты ГП проявлялись в повышении в 6 раз доли субпопуляции CD66b+CD16+CD11b+CD11c-НГ, снижение в 5 раз доли CD66b+CD16+CD11b+CD11c+НГ (р<0,05), восстановлении активности оксидаз, снижение количества НГ, сформировавших NETs.

Заключение. Полученные данные in vitro, подтверждают иммуномодулирующий эффект ГП, свидетельствуют о положительном воздействии на изучаемые субпопуляций НГ, что сопровождалось восстановлением микробицидной активности НГ у детей с ОДПс и могут быть транслированы в клиническую практику.

neutrophilic granulocytessubsetshexapeptideacute destructive pneumoniachildrenin vitro system.нейтрофильные гранулоцитысубпопуляциигексапептидострая деструктивная пневмониядетисистема in vitro.The study was carried out within the framework of the state assignment - State R&D registration number 125072208862-7 dated 22.07.2025Исследование выполнено в рамках государственного задания номер государственного учета НИОКР 125072208862-7 от 22.07.2025г.Долгушин И.И., Генкель В.В., Батурина И.Л., Савочкина А.Ю., Минасова А.А., Никушкина К.В., Пыхова Л.Р., Кузнецова А.С., Шапошник И.И. Взаимосвязи иммуносупрессорных нейтрофилов и показателей врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с субклиническим атеросклерозом // Медицинская иммунология. – 2022. – Т. 24, № 2. – С. 283-294. Dolgushin I.I., Genkel V.V., Baturina I.L., Savochkina A.Yu., Minasova A.A., Nikushkina K.V., Pykhova L.R., Kuznetsova A.S., Shaposhnik I.I. Interactions between immunosuppressor neutrophiles, innate and adaptive immunity indexes in the patients with subclinical atherosclerosis. Medical Immunology, 2022, Vol. 24, no. 2, pp. 283-294 10.15789/1563-0625-IBI-2463Зурочка А.В., Зурочка В.А., Добрынина М.А., Фомина Л.О., Файзуллина А.И., Гриценко В.А. Нейтрофилы как цитокинопродуцирующие клетки // Российский иммунологический журнал. – 2019. – Т. 22, №4. – C. 1469-1471. Zurochka A.V., Zurochka V.A., Dobrynina M.A., Fomina L.O., Fayzullina A.I., Gritsenko V.A. Neutrophils as the cytokine producing cells. Russian journal of immunology, 2019б Vol. 22, no. 4, pp 1469-1471. 10.31857/S102872210007060-1Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Ковалева С.В., Евглевский А.А., Нгуен Т.З.Л. Новый взгляд на нейтрофильные гранулоциты: переосмысление старых догм. Часть 2 // Инфекция и иммунитет. – 2018. – Т. 8, № 1. – С. 7-18 Nesterova I.V., Kolesnikova N.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V., Kovaleva S.V., Evglevsky A.A., Nguyen T.D.L. The new look at neutrophilic granulocytes: rethinking old dogmas. Part 2 // Russian Journal of Infection and Immunity, 2018, Vol. 8, no. 1, pp. 7–18. 10.15789/2220-7619-2018-1-7-18Нестерова И.В., Чудилова Г.А., Чичерев Е.А. Ковалева С.В., Чапурина В.Н., Ломтатидзе Л.В., Барова Н.К., Тетерин Ю.В. Эффективность таргетной моно- и комбинированной иммунотерапии в комплексном послеоперационном лечении острого гематогенного остеомиелита у иммунокомпрометированных детей. Эффективная фармакотерапия. – 2023. – T. 19 (51). – C. 6–14. Nesterova I.V., Chudilova G.A., Chicherev E.A., Kovaleva S.V., Chapurina V.N., Lomtatidze L.V., Barova N.K., Teterin Yu.V. Efficiency of Targeted Mono- and Combined Immunotherapy in Complex Postoperative Treatment of Acute Hematogenous Osteomyelitis in Immunocompromised Children. Effective Pharmacotherapy, 2023, Vol. 19 (51), pp. 6–14. 10.33978/2307-3586-2023-19-51-6-14Потапнев М.П., Гущина Л.М., Мороз Л.А. Фенотипическая и функциональная гетерогенность субпопуляций нейтрофилов в норме и при патологии // Иммунология. – 2019. – T. 40 (5). – C. 84-96. Potapnev M.P., Hushchyna L.M., Moroz L. Human neutrophils subpopulations and functions heterogeneity in norm and pathology. Immunology, 2019, Vol. 40 (5), pp. 84-96. 10.24411/ 0206-4952-2019-15009Чудилова Г.А., Нестерова И.В., Ломтатидзе Л.В., Ковалева С.В., Русинова Т.В. Ремоделирование трансформированного фенотипа нейтрофильных гранулоцитов CD16+CD32+CD11b+ пациентов с нетипично протекающей хронической бактериальной инфекцией в системе in vitro // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. - 2018. - Т. 22. - №3. - C. 332-339. Chudilova G.A., Nesterova I.V., Lomtatidze L.V., Kovaleva S.V., Rusinova T.V. Remodeling of the transformed phenotype of neutrophilic granulocytes CD16+CD32+CD11b+ in patients with atypical chronic bacterial infection in the in vitro system. Bulletin of the Russian University of Peoples' Friendship. Series: Medicine, 2018, Vol. 22, no. 3, pp. 332-339. 10.22363/2313-0245-2018-22-3-332-339Antimicrobial Resistance Collaborators. Global burden of bacterial antimicrobial resistance in 2019: a systematic analysis. Lancet. 2022, Vol. 399 (10325), pp. 629-655. 10.1016/S0140-6736(21)02724-0Gysemans C., Beya M., Pedace E., Mathieu C. Exploring Neutrophil Heterogeneity and Plasticity in Health and Disease. Biomedicines, 2025, Vol. 13 (3), pp. 597. 10.3390/biomedicines13030597.Hou L, Voit RA, Shibamura-Fujiogi M, Koutsogiannaki S, Li Y, Chen Y, Luo H, Sankaran VG, Yuki K. CD11c regulates neutrophil maturation. Blood Adv, 2023, Vol. 7(7), pp. 1312-1325 10.1182/bloodadvances.2022007719Lewis S.M., Treacher D.F., Edgeworth J., Mahalingam G., Brown C.S., Mare T.A., Stacey M., Beale R., Brown K.A. Expression of CD11c and EMR2 on neutrophils: potential diagnostic biomarkers for sepsis and systemic inflammation. Clin Exp Immunol, 2015, Vol. 182 (2), pp. 184-194. 10.1111/cei.12679Scapini P., Marini O., Tecchio C., Cassatella, M.A. Human neutrophils in the saga of cellular heterogeneity: insights and open questions. Immunol Rev, 2016, Vol. 273, pp. 48-60. https://doi.org/10.1111/imr.12448Silvestre-Roig C., Fridlender Z.G., Glogauer M., Scapini P. Neutrophil Diversity in Health and Disease. Trends Immunol. 2019, Vol. 40 (7), pp. 565-583. 10.1016/j.it.2019.04.012.Song Y, Lei L, Cai X, Wei H, Yu CY. Immunomodulatory Peptides for Tumor Treatment. Adv Healthc Mater, 2025, Vol. 14(5),pp.e2400512. 10.1002/adhm.202400512