Ph.D., Research Associate, Department of Biotechnology and Bioenergy,
Moscow
к. х. н., научный сотрудник Отдела биотехнологий и биоэнергетики,
123098 Москва, пл. Академика Курчатова, 1
Doctor of Chemical Sciences, Research Engineer;
Leading Research Associate, Faculty of Biology,
Moscow
д. х. н., инженер-исследователь;
ведущий научный сотрудник, биологический факультет,
Москва
Ph.D., Senior Research Associate,
Moscow
к. б. н., старший научный сотрудник, биологический факультет,
Москва
Using confocal fluorescence microscopy it was shown that stearylamine (SA) at concentration of 0.2 mg/ml causes the neutrophil extracellular traps formation. In comparison with classic NET activator, the phorbol ether of myristate acetate (PMA), SA activates this process much faster, in 30‒60 min, while under PMA stimulation it occurs in 2‒3 hours. Using luminol-dependent chemiluminescence, we showed that SA does not activate NADPH oxidase. SA dose-dependently suppresses the oxidative burst stimulated with PMA, zymosan, or latex. The direct evidence that NADPH oxidase is not activated under the SA action was obtained by using neutrophils isolated from the blood of patients with chronic granulomatous disease (CGD). It is obvious from our results, that SA-induced NET formation does not require the participation of reactive oxygen species and proceeds according to a nonclassical mechanism.
Методом конфокальной флуоресцентной микроскопии было показано, что стеариламин (СА) в концентрации 0,2 мг/мл вызывает образование нейтрофильных внеклеточных ловушек. По сравнению с форболовым эфиром миристат ацетата (ФМА) – классическим активатором нетоза – при воздействии СА этот процесс протекает быстрее (30‒60 мин), тогда как при действии ФМА за 2‒3 часа. С помощью люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ) было показано, что СА не активирует НАДФН-оксидазу. СА дозозависимо подавлял кислородный взрыв (КВ) клеток, стимулированных ФМА, зимозаном и латексом. Прямое доказательство того, что активные формы кислорода (АФК) не требуются в нетозе, было получено на примере нейтрофилов, выделенных из крови пациентов с хронической гранулематозной болезнью (ХГБ). Из результатов следует, что образование нейтрофильных внеклеточных ловушек под действием СА протекает по неклассическому механизму.