Russian Journal of ImmunologyRussian Journal of ImmunologyРоссийский иммунологический журнал1028-72212782-7291Russian Society of Immunology7710.7868/S1028722118010033ORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИUnknownFEATURES OF THE REGULATORY INFLUENCES OF THE ARGINYL-ALPHA-ASPARTIL-LIZIL-VALYL-TYROSIL-ARGININ ON THE INTACT AND EXPERIMENTAL TRANSFORMED PHENOTYPE CD62L+CD63+CD66d+ OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTESОСОБЕННОСТИ РЕГУЛЯТОРНЫХ ВЛИЯНИЙ АРГИНИЛ-АЛЬФА-АСПАРТИЛ-ЛИЗИЛ-ВАЛИЛ-ТИРОЗИЛ-АРГИНИНА НА ИНТАКТНЫЙ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО ТРАНСФОРМИРОВАННЫЙ ФЕНОТИП CD62L+CD63+CD66d+ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВNesterovaI. V.НестероваИ. В.
Russian Federation

MD (Medicine), Professor, Professor of the Department of Allergology and Immunology; Chief Researcher of Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of Central Research Laboratory

117513, Moscow, Leninsky prospect, 123–1.

д.м.н., профессор, профессор кафедры аллергологии и иммунологии РУДН, г. Москва; главный научный сотрудник отдела клинической и экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ЦНИЛ ФГБОУ ВО КГМУ, г. Краснодар

117513, г. Москва, Ленинский проспект, 123–1.

inesterova1@yandex.ruNguyenThi Dieu LienНгуенТхи Зеу Лен
Russian Federation

Nguyen Thi Dieu Lien, postgraduate student of the Department of Allergology and Immunology

Moscow

Нгуен Тхи Зеу Лен, аспирант кафедры аллергологии и иммунологии ФПК МР Медицинского института

г. МоскваKhajdukovS. V.ХайдуковС. В.
Russian Federation

MD (Biological Sciences), Senior Researcher of Department of Chemical Biology of Glycans and Lipids 

Moscow

д.б.н., старший научный сотрудник отдела химической биологии гликанов и липидов

г. МоскваChudilovaG. A.ЧудиловаГ. А.
Russian Federation

PhD (Biological Sciences), Associate Professor, Head of the Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of the Central Research Laboratory 

Krasnodar

к.б.н., доцент, заведующая отелом клинической и экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ЦНИЛ ФГБОУ ВО КГМУ

г. Краснодар

LomtatidzeL. V.ЛомтатидзеЛ. В. 
Russian Federation

PhD (Biological Sciences), Department of Clinical and Experimental Immunology and Molecular Biology of the Central Research Laboratory 

Krasnodar

к.б.н., старший научный сотрудник отдела клинической и экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ЦНИЛ ФГБОУ ВО КГМУ

г. КраснодарFederal State Budget Educational Institution of Higher Professional Education “Peoples’ Friendship University of Russia” of Ministry of Education and Science of Russia“Российский университет дружбы народов” Министерства образования и науки РоссииFederal State Budget Educational Institution of Higher Education “Kuban State Medical University” of Ministry of Health Development of Russia“Кубанский государственный медицинский университет Минздрава России”Institution of Science “Institute of Bioorganic Chemistry аcademicians M.M. Shemyakin and Yu.A. Ovchinnikov” of the Academy of Sciences of RussianФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН1501201821128341504202015042020Copyright ©; 2018, Nesterova I.V., Nguyen T., Khajdukov S.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V.Copyright ©; 2018, Нестерова И.В., Нгуен Т., Хайдуков С.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В.2018Nesterova I.V., Nguyen T., Khajdukov S.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V.Нестерова И.В., Нгуен Т., Хайдуков С.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://rusimmun.ru/jour/article/view/77

The experimental model of the in vitro transformed phenotype of neutrophilic granulocytes (NG) equipped with receptors CD62L, CD63, CD66d, was created under the influence of N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (fMLP). The features of the transformed phenotype of NG were described. The influence of the hexapeptide arginyl-alpha-aspartyl-lysyl-poured-tyrosyl-arginine on untransformed and transformed phenotype of NG was investigated in vitro. It was shown that fMLP reduces the number of NG, expressing the receptor CD62L and reduces the density of expression of this receptor on the surface membrane of NG, moderately increases the density of CD63 and moderately increases the number of CD66dL+NG. Hexapeptide does not influence on the number of untransformed NG, bearing receptors CD62L, CD63, CD66d, and the level of the expression of those molecules. It has been shown the mitigation of the influences of fMLP after the simultaneous incubation NG with fMLP and hexapeptide: the number of CD62L+NG was increased and the density of membrane expression of the molecules of CD62L was increased too. At the same time, hexapeptide did not correct the negative effects of fMLP on the number of CD63+NG and CD66d+NG, and on level of density of the expression of CD63 and CD66d molecules on the surface membrane of NG. Overall, the results demonstrate the classic immunomodulatory effect of hexapeptide: on the one hand, we saw the absence of any changes of the studying receptors on membrane of the untransformed NG under hexapeptide influences, and on the other hand, it was demonstrated a strong trend of leveling the negative transformational effects of fMLP under hexapeptide influences.

В эксперименте in vitro создана модель трансформированного фенотипа нейтрофильных гранулоцитов (НГ) условно-здоровых лиц, оснащенных рецепторами CD62L, CD63, CD66d, под влиянием N-формил-метионил-лейцил-фенилаланина (fMLP). Описаны особенности трансформации фенотипа нейтрофильных гранулоцитов. В системе in vitro исследовано влияние гексапептида аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинина на нетрансформированный и трансформированный фенотип НГ. Показано, что fMLP снижает количество нейтрофильных гранулоцитов, экспрессирующих рецептор CD62L, и уменьшает плотность экспрессии молекул CD62L на мембране НГ, оцениваемую по MFI, умеренно повышает плотность экспрессии рецептора CD63, и умеренно повышает количество НГ, несущих CD66d рецептор. При этом гексапептид практически не влияет на количество нетрансформированных НГ, несущих рецепторы CD62L, CD63, CD66d и уровень их экспрессии. В то же время, при одновременной инкубации НГ с fMLP и гексапептидом показано нивелирование эффектов fMLP: повышается количество CD62L+НГ и увеличивается плотность экспрессии молекул CD62L, при этом гексапептид не корректировал негативное влияние fMLP на количество CD63+НГ и количество CD66d+НГ, а также на уровень плотности экспрессии молекул CD63 и CD66d на поверхностной мембране НГ. В целом, полученные результаты демонстрируют классический иммуномодулирующий эффект гексапептида: с одной стороны – отсутствие каких-либо изменений изучаемых рецепторов на нетрансформированных нейтрофильных гранулоцитах под его влиянием, с другой стороны – нивелирование трансформационных изменений фенотипических характеристик НГ, возникших под влиянием fMLP.

neutrophilic granulocytesphenotyperegulatory hexapeptideнейтрофильные гранулоцитыфенотипрегуляторный гексапептид1. Boer K., Vogelsang H., Deufel T., Pfister W., Kiehntopf M. CD62L on neutrophil granulocytes, a useful, complementary marker for the prediction of ventriculitis in blood-containing CSF. Clin. Biochem. 2010, 43 (16–17), 1351–1355. doi:10.1016/j.clinbiochem.2010.07.003.2. De Jong E., De Lange D.W., Beishuizen A., Van de Ven P.M., Girbes A.R., Huisman A. Neutrophil CD64 expression as a lon-gitudinal biomarker for severe disease and acute infection in critically ill patients. Int. J. Lab. Hematol. 2016, 38(5), 576–584. doi: 10.1111/ijlh.12545.3. Qian W., Huang G.Z. Neutrophil CD64 as a marker of bacterial infection in acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease. Immunol. Invest. 2016, 45(6), 490–503. doi: 10.1080/08820139.2016.1177540.4. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Ковалева С.В., Евглевский А.А., Нгуен Т.З.Л. Новый взгляд на нейтрофильные гранулоциты: переосмысление старых догм. Инфекция и Иммунитет. 2017, 7(3), 219–230.doi:10.15789/2220–7619–2017–3–219–230.5. Nesterova I.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V., Kleshchenko E., Kovaleva S. Smerchinskaya T., Sapun O. Three neutrophilic granulocyte´s subpopulations CD62L dim+ CD63 dim+ , CD62L bright+ CD63 dim+ and CD62L dim+ CD63 mid+ in newborns with congenital pneumonia. In: Allergy, John Wiley & Sons A/S, Barcelona, 2015, 70 (S101), 217.6. Нестерова И.В., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Ковалева С.В., Клещенко Е.И., Смерчинская Т.В., Сапун О.И. Особенности трансформации экспрессии CD62L, CD63 на мембране нейтрофильных гранулоцитов при врожденной пневмонии у доношенных новорожденных. Аллергология и иммунология 2014, 15(3), 219–220.7. Савченко А.А., Борисов А.Г., Кудрявцев И.В., Гвоздев И.И., Мошев А.В., Черданцев Д.В., Первова О.В. Взаимосвязь фенотипа и метаболизма нейтрофилов крови у больных распространенным гнойным перитонитом в динамике послеоперационного периода. Инфекция и иммунитет 2017, 7(3), 259–270. doi: 10.15789/2220–7619–2017–3–259–270.8. Naegelen I., Beaume N., Plançon S., Schenten V., Tschirhart E.J., Bréchard S. Regulation of neutrophil degranulation and cytokine secretion: a novel model approach based on linear fitting. J. Immunol. Res. 2015, 2015, 817038. doi:10.1155/2015/817038.9. Skubitz K.M., Campbell K.D., Skubitz A.P. Synthetic peptides of CD66a stimulate neutrophil adhesion to endothelial cells. J Immunol. 2000, 164(8), 4257– 4264. doi: 10.4049/jimmunol.164.8.4257.10. Skubitz K.M., Campbell K.D., Skubitz A.P. CD66a, CD66b, CD66c, and CD66d each independently stimulate neutrophils. J. Leukoc. Biol. 1996, 60(1), 106–117.11. Нестерова И.В., Евглевский А.А., Чудилова Г.А., Фомичева Е.В., Ковалева С.В., Ломтатидзе Л.В. Реструктуризация хроматина нейтрофильных гранулоцитов в норме и патологии // под редакцией И.В. Нестеровой и А.А. Евглевского. – М.: Capricorn Publishing, Inc., 2017.– 356 с. doi: 10.17513/NP278.12. Нестерова И.В., Чудилова Г.А., Ковалева С.В., Ломтатидзе Л.В., Колесникова Н.В., Евглевский А.А. Методы комплексной оценки функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов в норме и патологии (методические рекомендации). Краснодар, 2017, 52 с.