PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Molecular and Cell Immunology, Research Associate, Laboratory of Biocompatible Materials
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной и клеточной иммунологии, научный сотрудник лаборатории биосовместимых материалов
PhD, MD (Biology), Associate Professor, Chief Research Associate, Laboratory of Molecular and Cell Immunology, Leading Research Associate, Laboratory of Biocompatible Materials
доктор биологических наук, доцент, главный научный сотрудник лаборатории молекулярной и клеточной иммунологии, ведущий научный сотрудник лаборатории биосовместимых материалов
PhD (Biology), Senior Researcher, Laboratory of Molecular and Cell Immunology, Senior Researcher, Laboratory of Biocompatible Materials
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной и клеточной иммунологии, старший научный сотрудник лаборатории биосовместимых материалов
PhD (Biology), Senior Researcher, Laboratory of Molecular and Cell Immunology, Researcher, Laboratory of Biocompatible Materials
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной и клеточной иммунологии, научный сотрудник лаборатории биосовместимых материалов
The role of the PD-1/PD-L signaling pathway in the regulation of the immune response is currently the focus of research. Numerous studies have shown the key role of PD-1 molecules in the regulation of autoimmune, antitumor and antiviral reactions. The culture of rat and mice lymphocytes, as well as animal experimental models of immunopathologies are widely used in research. However, rat lymphocytes are almost not used to study the PD-1/PD-L pathway. There is no data on PD-1 expression or methods of its induction on rat lymphocytes. In human T-lymphocyte culture, PD-1 expression can be induced by NIB1412 anti-CD3 antibodies coated in the well of culture plates. In this study, we investigated the effect of G4.18 anti-CD3 antibody on PD-1 expression in peripheral blood lymphocyte of intact Wistar rats in vitro. According to some literature data, G4.18 anti-CD3 antibodies in immobilized form can activate isolated rat T cells, and according to others, inhibit allogeneic reactions in mixed lymphocyte culture and block cytotoxicity of cells obtained from rats with a developed graft rejection reaction. We found that incubation of rat blood lymphocytes with G4.18 anti-CD3 antibodies immobilized on plastic leads to a change in cell morphology and induction of PD-1 on CD3+ lymphocytes. After incubation with anti-CD3 antibodies, the proportion of PD-1+ lymphocytes among CD3+ lymphocytes was 12.05±6.04%, which is significantly higher than the proportion of such cells before incubation and during incubation in a cultural medium, which amounted to 2.60±2.62% and 4.59±5.81%, respectively. In the dot-plot graphs showing the distribution of cells according to the parameters of forward scatter and side scatter, PD-1+CD3+ lymphocytes induced by anti-CD3 antibodies are localized in the region of relatively lower forward scatter and greater side scatter. Perhaps these cells belong to apoptotic cells.
Исследование PD-1/PD-L сигнального пути в регуляции иммунного ответа является фокусом исследований в настоящее время. Показана ключевая роль PD-1 молекулы в регуляции аутоиммунных, противоопухолевых и противовирусных реакций. Культура лимфоцитов крыс и мышей, а также экспериментальные модели иммунопатологий на животных широко используются в исследованиях. Однако лимфоциты крыс почти не используют для изучения PD-1/PD-L пути. Нет данных о экспрессии PD-1 или ее индукции в лимфоцитах крыс. В культуре Т-лимфоцитов человека экспрессию PD-1 можно индуцировать с помощью сорбированных в лунках планшета антител к CD3 клона NIB1412. В настоящем исследовании мы выясняли влияние антител к CD3 крысы клона G4.18 на экспрессию PD-1 в культуре лимфоцитов периферической крови интактных крыс Wistar. По некоторым данным литературы антитела к CD3 клона G4.18 в иммобилизованном виде могут активировать изолированные Т-клетки крыс, а по другим, ингибируют аллогенные реакции в смешанной культуре лимфоцитов, блокируют цитотоксичность клеток, полученных от крыс с развившейся реакцией отторжения трансплантата. Мы обнаружили, что инкубация лимфоцитов крови крыс с иммобилизованными на пластике антителами к CD3 клона G4.18 приводит к изменению морфологии клеток и индукции PD-1 на CD3+ лимфоцитах. После инкубации с антителами к CD3 доля PD-1+ лимфоцитов среди CD3+ лимфоцитов составила 12,05±6,04 %, что достоверно больше, чем доли таких клеток до инкубации и при инкубации в питательной среде, составившие 2,60±2,62 % и 4,59±5,81 %, соответственно. На графиках дот-плот, показывающих распределение клеток по параметрам прямого и бокового светорассеяния, PD-1+CD3+ лимфоциты, индуцированные антителами к CD3, локализованы в области относительно меньшей величины прямого светорассеяния и большей величины бокового светорассеяния. Возможно, данные клетки относятся к клеткам, вступившим в апоптоз.