Clinical Endocrinologist
врач-эндокринолог
Senior Lecturer, Department of Pathological Anatomy
старший преподаватель кафедры патологической анатомии
PhD (Biology), Senior Research Associate, Deputy Director for Research
кандидат биологических наук , старший научный сотрудник, заместитель директора по научной работе
Chief Physician, Obstetrician-Gynecologist
главный врач, врач – акушер-гинеколог
PhD (Biology), Embryologist
кандидат биологических наук, эмбриолог
Cumulus cells (CC) are the specialized layer of follicular cells that are in close contact with the oocyte. They are considered as indirect markers of the oocyte quality. Changes of these cells suggest a damage of the ovary. Determination of cytokines in cumulus cell culture may predict the chance for the conception and development of pregnancy. The objective of the present study was to obtain a primary culture of CC from healthy donors and patients with polycystic ovarian syndrome (PCOS), to identify the most significant differences in production of key cytokines in the CC monocultures of patients and healthy individuals in order to predict the results of
Кумулюсные клетки – специализированный слой фолликулярных клеток, находящихся в тесном контакте с ооцитом, считаются косвенными маркерами их качества. Изменения этих клеток свидетельствует о повреждении яйцеклетки. Определение показателей цитокинов в культуре кумулюсных клеток может предопределить возможности зачатия и развития беременности. Целью исследования было получение первичной культуры КК от здоровых доноров и пациенток с СПКЯ, выявление наиболее значимых отличий в синтезе ключевых цитокинов в монокультурах кумулюсных клеток пациенток и здоровых лиц для прогнозирования результатов экстракорпорального оплодотворения. Использовался метод клеточных культур – кумулюсные клетки здоровых доноров и пациенток с синдромом поликистозных яичников, полученные после проведения трансвагинальной пункции фолликулов в программе экстракорпорального оплодотворения, что не нарушало права эмбриона, так как на этапе проведения процедуры ЭКО и интрацитоплазматической инъекции сперматозоида, кумулюсные клетки не используются. Этический комитет протокол № 9 от 16.05.2022 г. В адгезивной культуре кумулюсных клеток методом ИФА на 1-е, 3-и, 7-е сутки эксперимента исследовались показатели IL-6, IL-10, IFNγ и прогестерона. Проводилось цитометрическое исследование кумулюсных клеток на 1-е, 3-и, 7-е сутки культивирования. Доказано – в адгезивной монокультуре кумулюсных клеток продолжается секреция прогестерона, IL-6, IL-10, IFNγ. В культуральной среде при СПКЯ на 7-е сутки происходило резкое возрастание уровня прогестерона (p < 0,01), в отличие от доноров, где исходно увеличенное количество прогестерона значимо снижалось на 7-е сутки исследования. На 7-е сутки эксперимента в культуре кумулюсных клеток при СПКЯ значения IL-6, IL-10 увеличивались лишь двукратно, у здоровых доноров эти цитокины возрастали в 30 раз (p < 0,01). За семь суток наблюдения происходило трехкратное снижение IFNγ в культуре клеток при СПКЯ (p1-7 < 0,01; p < 0,05) по сравнению с культурой здоровых клеток, где показатели цитокина наоборот – возрастали в 20 раз (p1-7 < 0,01), что определяло общий баланс цитокинов и, вероятно, определяло прогноз по вынашиванию беременности. Заключение: значимые разнонаправленные изменения уровня цитокинов в культуре кумулюсных клеток при СПКЯ и у здоровых лиц, могут стать определяющими факторами в формировании бластоцисты и сохранении эмбриона. Дальнейшее изучение продукции цитокинов и половых стероидов КК особенно актуально на 5-7-е сутки, когда происходит отбор ооцитов для вступления в цикл экстракорпорального оплодотворения. Изучение морфофункциональных свойств малоизученных клеток кумулюса методом клеточных культур позволит глубже исследовать механизмы нарушения фолликулогенеза при СПКЯ и, тем самым улучшить репродуктивный прогноз при данной патологии.