Динамические особенности гуморального звена иммунитета у пациентов с острым коронарным синдромом в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺, болевших и не болевших COVID-19

Полный текст

Введение

COVID-19 повышает риск сердечно-сосудистых событий, в том числе острого коронарного синдрома (ОКС) – острого инфаркта миокарда (ОИМ) и нестабильной стенокардии. ОКС часто наблюдаются у пациентов с COVID-19 и могут влиять на клиническое течение и смертность пациентов. Хотя основной патогенез остается неясным, было высказано предположение о нескольких потенциальных механизмах, включая дисбаланс снабжения/потребления кислорода, прямое вирусное повреждение клеток, системную воспалительную реакцию с цитокин-опосредованным повреждением, микрососудистый тромбоз и эндотелиальную дисфункцию. COVID-19 способствует нестабильности атеросклеротических бляшек и образованию тромбов и может спровоцировать ОИМ 1-го типа [6]. Во время национальной вспышки 2020 года в Италии сопутствующий диагноз COVID-19 при ИМбпST был связан со значительно более высоким уровнем смертности [5].

Ретроспективное когортное исследование 335 взрослых с ОКС было проведено в Великобритании. За время пандемии увеличилась доля инфарктов миокарда с подъемом сегмента ST. Время ишемии росло с увеличением времени от появления симптомов до первого медицинского контакта со 191 минуты в контрольном периоде до 292 минут в первой волне (p = 0,06) и 271 минуты во второй волне (p = 0,06). Коронарография с последующей реваскуляризацией достоверно увеличилась с 55% в контрольном периоде реваскуляризации до 69% в первой волне (р < 0,001) и 74% во второй волне (р < 0,001) [8].

После заражения вирусным антигеном адаптивные иммунные реакции активируются главным образом за счет встреч вирусных частиц с антигенпрезентирующими клетками или В-клеточными рецепторами, которые индуцируют дальнейшие биологические взаимодействия для защиты хозяина от вируса. После того, как инфекция предотвращена, развивается иммунологическая память. Было показано, что клеточный иммунитет к SARS-CoV сохраняется даже через несколько лет после заражения, несмотря на необнаружимый гуморальный компонент [7]. Добрынина М.А. и др. изучали проблемы иммунопатологии у постковидных пациентов [1].

Согласно данным проанализированной литературы, недостаточно изучен гуморальный иммунитет у пациентов с острым коронарным синдромом, в том числе болевших COVID-19, что определяет актуальность проведенного исследования.

Целью работы явилось изучение динамических особенностей гуморального звена иммунитета у пациентов с острым коронарным синдромом в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺, болевших и не болевших COVID-19.

Материалы и методы

Проанализированы данные показателей гуморального иммунитета у мужчин с ОКС, болевших и не болевших COVID-19, в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺. Возраст больных был от 40 до 65 лет. Всем пациентам в зависимости от клинической ситуации в экстренном или отсроченном порядке проводилась коронароангиография с дальнейшим стентированием коронарных артерий на аппарате Innova JE и имплантация стентов с лекарственным покрытием Xience Alpine. Перед имплантацией стентов проводилась баллонная ангиопластика катетером Sapphire. Все больные подписывали информированное согласие (протокол Этического комитета ЮУГМУ Минздрава России № 9 от 11.09.2006 и протокол этического комитета ГАУЗ ОТКЗ ГКБ № 1 г. Челябинска № 12 от 10.10.2022). Иммунологические параметры были определены с помощью метода проточной цитометрии [2]. Учитывали значения лимфоцитов с фенотипом CD45⁺CD3^-CD19⁺ и наличие или отсутствие COVID-19 ранее, пациентов поделили на группы. В группе перенесших в анамнезе COVID-19: группа со сниженным количеством В-клеток с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺ (22 человека), средний возраст 55,91±1,41 года, группа с нормальным числом В-клеток с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺ (22 человека), средний возраст 55,86+1,44; группа с повышенным изучаемым показателем (3 больных), средний возраст 55,33±2,13. Не болевшие COVID-19, но вакцинированные: группа (11 человек) – с пониженными, группа (7 пациентов), средний возраст 52,28±2,17 года – в пределах нормы и группа (4 человека), средний возраст 54,25±2,3 года – с повышенными В-лимфоцитами CD3^-CD19⁺CD5⁺.

Методом проточной цитометрии гейтировали по панлейкоцитарному маркеру CD45⁺ 2 группы: подгруппа В-лимфоцитов CD3^-CD19⁺CD5⁺ и подгруппа В-лимфоцитов CD3^-CD19⁺CD5^-, B-лимфоциты (CD45⁺CD3^-CD19⁺), с помощью моноклональных антител компаний Beckman Coulter и BioLegend (США). Оценку иммунного статуса осуществляли методом проточной цитометрии на цитофлюориметре Navios (Beckman Coulter, США) по стандартизованной технологии оценки лимфоцитарного звена иммунитета [2, 3]. Уровни общих IgA, IgG, IgM, C1- ингибитора, С3а и С5а компонентов комплемента (АО «Вектор-Бест», ООО «Цитокин», Россия) методом иммуноферментного анализа на иммуноферментном анализаторе Multiscan FC Thermo Scientific (Китай). Исследование проводилось общепринятыми стандартизованными методами иммуноферментного анализа согласно протоколам производителей тест-систем.

Результаты и обсуждение

Из числа лиц с пониженными CD3^-CD19⁺CD5⁺В-клетками с COVID-19 в анамнезе ОИМ с подъемом сегмента ST (ОИМспST) отмечался у 9 (40,91%) пациентов, ОИМ без подъема ST (ОИМбпST) – у 2 (9,09%), нестабильная стенокардия (НС) – у 11 (50%). Среднее число установленных стентов в настоящую госпитализацию 1,77±0,17. Кардиогенный шок отмечался у 2 (9,09%) больных, тромбозы стентов отмечались только в этой группе пациентов – у 2 (9,09%), и был один умерший. У больных с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺В-клетками с COVID-19 в анамнезе ОИМспST отмечался у 6 (27,27%) пациентов, ОИМбпST – у 8 (36,36%), НС – у 8 (36,36%), количество стентов – 1,68±0,16, кардиогенный шок у 1 (4,55%). У пациентов с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺В-клетками с COVID-19 в анамнезе ОИМспST наблюдался у 2 (66,67%) пациентов, НС – у 1 (33,33%), всем установлено по 1 стенту. У лиц с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺В-клетками без COVID-19 в анамнезе ОИМспST был у 1 (25%) пациентов, НС – у 3 (75%), среднее количество стентов 1,75±0,22. У больных с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ В-клетками без COVID-19 в анамнезе ОИМбпST наблюдался у 2 (28,57%), НС у 5 (71,43%), число стентов 1,57±0,18. У всех пациентов с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ В-клетками без COVID-19 ранее была НС, всем имплантировано по 1 стенту в настоящую госпитализацию.

Наименьшее число В-лимфоцитов (CD45⁺CD3^-CD19⁺) в относительном плане (8,90±1,16%) было меньше у лиц, болевших COVD-19 и имеющих пониженные В-клетки с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺, что достоверно (р < 0,0001) отличалось от групп с нормальными (14,51±0,88%) и повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками (15,13±2,09%), перенесшими COVID-19, и от лиц с нормальными (16,66±2,07%) и повышенными CD3^-CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками (22,4±3,95), не болевшими COVID-19. Достоверно (р < 0,05) в динамике в относительном плане повысились В-лимфоциты (CD45+CD3– CD19+) у больных с исходно низкими В-клетками с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺, не болевшими COVID-19 (с 10,18±3,81% до 19,1±7,56%), и снизились относительно (р < 0,01) у пациентов с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, перенесшими COVID-19. В абсолютных цифрах произошло в динамике возрастание этого показателя у больных с пониженными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, перенесшими COVID-19: с 128,05±13,99 до 194,82±18,77, 10⁶ кл/л (р < 0,001) и не болевшими COVID-19: с 124±54,48 до 283,5±54,47, 10⁶ кл/л (р < 0,05).

Иммуноглобулин А достоверно повысился (р < 0,05) у пациентов, не болевших COVID-19 и имевших высокие CD3^-CD19⁺CD5⁺клетки: с 1,24±0,52 г/л до 1,55±0,57 г/л. Наибольшие показатели общего иммуноглобулина М отмечались у больных, не болевших COVID-19, с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками (1,87±0,77 г/л) и значимо (р < 0,01) отличались от лиц без COVID-19 в анамнезе с исходно низкими (0,53±0,15 г/л) и нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами (0,61±0,12 г/л). Иммуноглобулин G был минимальным у пациентов с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, переболевших COVID-19 (5,51±3,08 г/л), значимо отличался от лиц, болевших COVID-19, с низкими (р < 0,01): 13,23±0,92 г/л и нормальными (р < 0,05) CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами ((14,31±1,43 г/л), и не болевших COVID-19, с нормальным уровнем CD3^-CD19⁺CD5⁺ клеток: 11,52±1,28 г/л (р < 0,05).

С1-ингибитор был наименьшим (176,93± 21,59 нг/мл) у лиц, не болевших COVID-19 с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками и достоверно (р < 0,05) отличался от таковых с нормальным вышеупомянутым фенотипом клеток (227,38±18,71 нг/мл), а также статистически значимо вырос в динамике – 237,47±32,37 нг/ мл (р < 0,05). Также этот параметр был достоверно ниже у пациентов с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, переболевшими COVID-19 (199,49±19,38 нг/мл), в сопоставлении с больными с вышеупомянутыми высокими клетками, не болевшими COVID-19: 307,65±135,37 г/ мл (р < 0,05).

Максимальное количество С3а-фрагмента комплемента (167,66±14,52 нг/мл) наблюдалось у лиц с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами по сравнению с пациентами с повышенными данными клетками, не болевшими COVID-19: 142,28±9,40 нг/мл (р < 0,05).

Минимальное содержание С5а фрагмента комплемента исходно отмечалось у пациентов с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами, не болевшими COVID-19 (29,33±7,02 нг/мл), и достоверно (р < 0,05) отличалось от пациентов с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, болевшими (51,93±3,87 нг/мл) и не болевшими COVID-19 (43,82±3,65 нг/мл).

Значимое повышение CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитов в динамике, как в абсолютном, так и относительном плане, произошло при исходно низких этих показателях у лиц, болевших COVID-19: с 12,77±1,17, 10⁶ кл/л до 42,91±9,07, 10⁶ кл/л (р < 0,01). Также значимо увеличился этот параметр в динамике у больных с исходно нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, перенесших ранее COVID-19: с 47,05±4,75, 10⁶ кл/л до 66,27±12,11, 10⁶ кл/л (р < 0,05).

CD3^-CD19⁺CD5^- значимо (р < 0,05) выросли в динамике у пациентов, болевших и не болевших COVID-19, с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками: с 115,32±13,41 до 152,32±18,14, 10⁶ кл/л и с 109,5±52,14 до 237,25±38,35, 10⁶ кл/л соответственно. У пациентов с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, болевшие COVID-19, лимфоциты CD3^-CD19⁺CD5^- как в абсолютном, так и относительном плане значимо (р < 0,0001 – 0,05) отличались от других групп, кроме группы с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, не имевших в анамнезе COVID-19. Статистически достоверные различия CD3^-CD19⁺CD5^- наблюдались у лиц, не болевших COVID-19, с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками (109,5±52,14, 10⁶ кл/л) в сопоставлении с таковыми с нормальными вышеупомянутыми лимфоцитами, имевших (238,36±28,44, 10⁶ кл/л) – р < 0,05 и не имевших – р < 0,01 (301,0±38,35, 10⁶ кл/л) в анамнезе COVID-19, а также с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами, не болевшими COVID-19. Кроме того, регистрировались достоверные различия CD3^-CD19⁺CD5^- у больных с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками, перенесшими COVID-19, в сопоставлении с лицами с повышенными вышеупомянутыми клетками (436,25±157,47, 10⁶ кл/л), не болевшими COVID-19 (р < 0,05).

Наиболее клинически тяжелой группой в нашем исследовании были пациенты, переболевшие COVID-19 и имеющие низкие B-лимфоциты с фенотипом CD3^-CD19⁺CD5⁺, которые необходимы для выработки иммуноглобулинов, играющих роль в иммунологической защите, в том числе и при ОКС. Несмотря на раннюю реперфузию, у больных с ОИМспST может быть обширный некроз миокарда и значимое снижение функции желудочков. Работа Casarotti A.C.A. и соавт. [4] была посвящена значению подтипов B-лимфоцитов в обширности ОИМ и сократительной функции левого желудочка. Проводилась магнитно-резонансная томография (МРТ) сердца через 30 дней ОИМспST. В исследовании участвовали 120 лиц с ОИМпST. CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетки определялись в 1-й и 30-й дни от момента возникновения ОИМспST. Количество CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитов (клеток/мл) в 1-й день было связано с обширностью некроза миокарда, определенной с помощью МРТ сердца на 30-й день. CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетки были связаны с CD4⁺ Т-лимфоцитами на 1-й и 30-й дни, тогда как классические лимфоциты CD3^-CD19⁺CD5^- на 30-й день были предикторами фракции выброса левого желудочка. У больных с ОИМспST, несмотря на раннюю реперфузию, количество некроза миокарда и сердечный выброс были связаны с воспалительными реакциями, запускаемыми циркулирующими В-лимфоцитами. Таким образом, наши исследования и данные литературы вывили большую значимость определения различных субпопуляций В-лимфоцитов у пациентов с острым коронарным синдромом, перенесшим COVID-19, являющимся по сути проявлением постковидного синдрома с нарушением иммунной системы.

Выводы

1. После стентирования коронарных артерий В-лимфоциты (CD3^-CD19⁺CD5⁺) значимо повысились в группе лиц, болевших COVID-19, с исходно низкими этими клетками (р < 0,01) и нормальными клетками (р < 0,05).
2. У лиц, перенесших COVID-19 и не болевших этим заболеванием, с исходно пониженными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками значимо (р < 0,001 и р < 0,05 соответственно) выросли в динамике (р < 0,05) B-лимфоциты (CD45⁺CD3^-CD19⁺), В-лимфоциты (CD3^-CD19⁺CD5^-). В группе лиц, не болевших COVID-19, с низкими CD3^-CD19⁺CD5⁺ лимфоцитами дополнительно в динамике увеличился С1-ингибитор (р < 0,05).
3. В группе больных, переболевших COVID-19, с нормальными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками в динамике снизилось (р < 0,01) относительное число B-лимфоцитов (CD45⁺CD3^-CD19⁺) и CD3^-CD19⁺CD5^- клеток.
4. У лиц, болевших ранее COVID-19, с повышенными CD3^-CD19⁺CD5⁺ клетками в динамике значимо (р < 0,05) понизилось число B-лимфоцитов (CD45⁺CD3^-CD19⁺), у не болевших COVID-19 с высокими вышеупомянутыми клетками достоверно (р < 0,05) увеличился иммуноглобулин А.
5. Наиболее тяжелой в клиническом плане была группа лиц с пониженными CD3^-CD19⁺CD5⁺В-клетками и COVID-19 в анамнезе.

Об авторах

Э. А. Сафронова

ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ; Медико-биологический университет инноваций и непрерывного образования ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации – Федеральный медицинский биофизический центр имени А.И. Бурназяна» Федерального медико-биологического агентства

Автор, ответственный за переписку.
Email: safronovaeleonora68@gmail.com

к.м.н., доцент кафедры поликлинической терапии и клинической фармакологии; ассистент кафедры терапии

Россия, Челябинск; Москва

Список литературы

Дополнительные файлы