ПОЛУЧЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ РЕКОМБИНАНТНОГО ФЛАГЕЛЛИНА C PSEUDOMONAS AERUGINOSA
- Авторы: Жеребцов А.П.1, Яковлева И.В.1, Гаврилова Н.Ф.1, Михайлова Н.А.2
-
Учреждения:
- Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
- Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова».
- Раздел: Объединенный иммунологический форум 2024
- URL: https://rusimmun.ru/jour/article/view/16865
- DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-16865-POM
- ID: 16865
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Важным фактором вирулентности в патогенезе инфекций, вызванных Pseudomonas aeruginosa, является флагеллин: он служит главным структурным компонентом жгутика бактерии и акцептором для TLR5 рецептора врожденной иммунной системы. Толл-подобный рецептор 5 способен связывать флагеллин бактерий и активировать противовоспалительный фактор транскрипции NF-kB через адаптерный белок MyD88, который вызывает продукцию противовоспалительных цитокинов. Включение флагеллина в состав рекомбинантных белков увеличивала способность стимулировать продукцию противовоспалительных цитокинов и активировать антигенпрезентирующие клетки. Ряд экспериментов показали, что использование флагеллина в качестве молекулярного адъюванта в составе вакцин повышает экспрессию молекул CD80, CD83, CD86 и МНСII на поверхности дендритных клеток, а также приводит к увеличению секреции ИФН-γ и α-дефензинов дендритными и NK-клетками; T-клеточную пролиферацию и активацию антигенспецифических цитотоксических Т-лимфоцитов, а также повышенную индукцию антиген-специфических IgG и IgA антител.
Из-за природной и приобретенной резистентности P. aeruginosa к антибиотикам доступный выбор антисинегнойных препаратов сокращается, в связи с чем проблема разработки эффективных терапевтических препаратов для защиты от данной инфекции приобретает высокую медико-социальную значимость. С данной целью представляется перспективным изучение иммуннобиологических свойств флагеллина P. aeruginosa как возможного компонента вакцины.
Исходя из этого, в лаборатории протективных антигенов ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова был получен рекомбинантный флагеллин С (FliC) P. aeruginosa, доказана его иммуногенность и протективные свойства. Однако открытым остаётся вопрос стандартизации методов скрининга и контроля получаемого рекомбинантного белка FliC. Для решения данного вопроса были получены гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела (МКА) заданной специфичности, изучены основные иммунохимические свойства МКА и оценена возможность их использования в качестве реагентов при конструировании тест системы для выявления и стандартизации рекомбинантного белка FliC при его получении.
Цель работы: Получение моноклональных антител к рекомбинантному белку флагеллину С P. aeruginosa, изучение их основных иммунохимических свойств и оценка возможности использования для скрининга и контроля рекомбинантного белка FliC.
Ключевые слова
Об авторах
Антон Павлович Жеребцов
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Автор, ответственный за переписку.
Email: antonzherebtsov@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0008-1676-9515
Научный сотрудник лаборатории протективных антигенов.
Россия, Малый Казенный пер., д. 5А, Москва, 105064, Российская ФедерацияИрина Владимировна Яковлева
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Email: dissovet-mech@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5123-2651
к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории терапевтических вакцин
Россия, Малый Казенный пер., д. 5А, Москва, 105064, Российская ФедерацияНаталья Федоровна Гаврилова
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Email: beresina54@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6704-0339
к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории терапевтических вакцин
Россия, Малый Казенный пер., д. 5А, Москва, 105064, Российская ФедерацияНаталья Александровна Михайлова
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова».
Email: n_michailova@inbox.ru
ORCID iD: 0000-0002-6652-2093
д-р мед. наук, проф. зав. лаб. протективных антигенов ФГБНУ НИИВС имени И.И. Мечникова
Россия, Малый Казенный пер., д. 5А, Москва, 105064, Российская ФедерацияСписок литературы
- Авдеева JI.B, Алейникова Т.Л, Андрианова Л.Е, и др. Физико-химические свойства белков и методы их выделения // Биохимия учебник. – 2019. - №5. – С. 66-72.
- Бурчанов Ю.И. Моноклональные антитела: от создания до клинического применения // Клиническая онкогематология, фундаментальные исследования и клиническая практика. – 2016. – Т. 9, , № 3. - С. 237-244.
- Духовлинов ИВ, Богомолова ЕГ, Федорова ЕА и др. Исследование протективной активности кандидатной вакцины против ротавирусной инфекции на основе рекомбинантного белка FliCVP6VP8. Медицинская иммунология. 2016; 18 (5):417–24.
- Жеребцов А.П., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Получение рекомбинантного флагеллина C Pseudomonas aeruginosa и изучение его иммунобиологических свойств. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2024;24(1):91-102. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2024-24-1-91-102
- Калошин АА, Жеребцов АП, Михайлова НА. Рекомбинантная плазмидная ДНК PPA-FLICC, кодирующая синтез рекомбинантного флагеллина-С Pseudomonas aeruginosa, штамм Escherichia coli PA-FLICC – продуцент гибридного рекомбинантного белка и способ получения указанного белка. Патент Российской Федерации № 2793753; 2023.
- Сафронов Г.А., Мурзина Е.В., Болехан В.Н. и др. Перспективные направления использования препаратов на основе рекомбинантного флагеллина // Медицинский академический журнал. – 2017. - №2. – Т.17. – С. 7-20.