Иммунофенотипические особенности альвеолярных макрофагов и макрофагов селезенки животных с моделью сахарного диабета 1 типа и их коррекция аминодигидрофталазиндионом натрия in vitro

Макрофаги обнаруживаются во всех тканях и органах и обладают функциональной пластичностью, которая необходима для поддержания гомеостаза, регенерации тканей и иммунитета. Фенотип макрофагов определяется сигналами микроокружения. Традиционно выделяют классически (М1) или альтернативно (М2) активированные макрофаги. В патогенезе сахарного диабета (СД1) М1-макрофаги способствуют повреждению островков Лангерганса, потере β-клеток, вызывая аутофагию, которая может привести к развитию персистирующей инфекции. Развитие инфекции увеличивает риск смерти от гриппа или пневмонии у больных СД1. Поэтому представляется интересным изучение функционального ответа резидентных макрофагов органов и тканей, не являющихся мишенями при развитии сахарного диабета, а также их ответ на стимуляцию АДФН, который в ряде работ показывал модулирующее действие на иммунокомпетентные клетки.
В работе были исследованы морфологические и функциональные характеристики культуры макрофагов различной тканевой принадлежности, выделенные у интактных животных (ИЖ) и животных с моделью сахарного диабета 1 типа (СД1) в условиях стимуляции их веществом-модулятором макрофагов аминодигидрофталазиндионом натрия (АДФН) in vitro в условиях 24- и 72-часового культивирования. Исследование проводили на культурах макрофагов крысы, полученных из легких и селезенки. Определяли следующие морфометрические показатели: площадь клетки, цитоплазмы и ядер, а также ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО). Фенотип макрофагов определяли по оптической плотности экспрессии маркера CD163 (макрофагов типа М2) и CD80 (макрофаги М1). Функциональную активность макрофагов оценивали по уровню цитокинов IL-1α, IL-10 и TNFα в супернатантах культур. Воздействие АДФН на макрофаги животных с СД1 через 24 ч культивирования также приводило к изменению морфометрических параметров (уменьшению размеров ядра и клетки макрофагов селезенки, увеличению размеров ядра альвеолярных макрофагов, росту ЯЦО у макрофагов селезенки) и синтетической активности клеток (повышению уровня IL-1α и TNFα практически во всех популяциях клеток). Через 72 ч культивирования уровни секреции IL-1α и TNFα снижались у альвеолярных макрофагов, у макрофагов селезенки уровень секреции TNFα снижался, а IL-1α увеличивался. Экспрессия поверхностноклеточных маркеров М1- и М2-фенотипов также была подвержена действию АДФН. В особенности было отмечено увеличение экспрессии CD163 у стимулированных альвеолярных макрофагов, выделенных из животных с СД1.