Том 24, № 4 (2021)

Данные последних лет свидетельствуют о быстром нарастании в мире стареющих популяций и увеличении среди них фенотипов когнитивной недостаточности – депрессий старости и деменций. Поиск подходов к сепарации таких фенотипов чрезвычайно актуален. Современные исследования презентуют убедительные доказательства ключевой роли иммунной системы (ее периферического компартмента) и системы гормонов стресса (гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси и симпато-адреномедуллярной системы) в физиологическом здоровье мозга. Поэтому одним из эффективных путей дифференциации депрессии и ранних стадий деменции в пожилом и старческом возрасте может стать оценка комплексных взаимодействий иммунной и нейроэндокринной систем.
Цель – индикация молекулярных месседжей периферии – цитокинов и гормонов стресса, в контексте фенотипов когнитивной недостаточности: здоровая старость/депрессия старения/деменция. Обследовано 80 людей старческого возраста, включенных в группы: «Здоровая старость», «Деменция», «Депрессия». Уровень цитокинов: IL-6, IL-1β, TNFα, IFNγ, IL-10, и гормонов стресса: кортизола, адренокортикотропного гормона, дофамина, норадреналина, адреналина, определяли в плазме крови методом твердофазного иммуноферментного анализа. Различия между группами определяли в тесте Краскела–Уоллиса с апостериорными попарными сравнениями по Коноверу–Инману. Для дифференциальной диагностики групп пожилых людей с разной степенью когнитивных нарушений использовали линейный канонический дискриминантный анализ, проведенный на рангах. В результате работы установлено, что фенотипы когнитивной недостаточности – депрессия старости и деменция – отличаются от фенотипа здоровая старость высокими периферическими уровнями цитокина TNFα и низкими – IL-1β. Различия между депрессией лиц старческого возраста и деменцией включали: низкий уровень цитокина IL-10 при депрессии (ниже, чем в группе «Здоровая старость») и высокий – IL-6 при деменции (по сравнению с группой «Здоровая старость»). Оценка гормонов гипоталамо-гипофизарной и симпато-адреномедуллярной осей продемонстрировала гипоотвечаемость гипоталамо-гипофизарной оси, независимо от фенотипов когнитивной недостаточности, при активации симпато-адреномедуллярной: высокий уровень дофамина при депрессии старости и деменции, и высокий уровень адреналина при деменции по сравнению с фенотипом депрессии старости и здоровым старением. Такие значимые отличия в уровнях молекулярных месседжей – цитокинов и гормонов стресса – среди групп персон старческого возраста позволили с помощью линейного канонического дискриминантного анализа с диагностической эффективностью 87,5% провести дифференциацию когнитивных фенотипов старения: здоровая старость, депрессия старости, деменция.

В статье приведены результаты оценки продукции культурами мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток ростовых факторов, про- и антивоспалительных цитокинов, в условиях сокультивирования с иммуноизолированными β-клетками поджелудочной железы. Трансплантация β-клеток является минимально инвазивным терапевтическим подходом (по сравнению с трансплантацией всей поджелудочной железы) и обеспечивает лучший метаболический контроль в отношении введения инсулина. Однако при пересадке β-клеток всегда существует риск иммунного отторжения трансплантата. Общепризнано, что инкапсуляция является эффективным средством иммунологической защиты от иммунной системы реципиента при трансплантации. Решающее значение для лечения сахарного диабета первого типа имеет регуляция аутоиммунного ответа на трансплантируемые клетки. В последние годы, наряду с заменой островковых клеток, для коррекции сахарного диабета большое внимание уделяется использованию мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток, обладающих иммуномодулирующими и/или иммуносупрессивными свойствами. In vitro и in vivo они оказывают влияние не только на Т-лимфоциты, но также на В-лимфоциты, дендритные и NK-клетки. Мезенхимальные стволовые клетки способны ингибировать пролиферацию иммунных клеток и снижать их секрецию воспалительных цитокинов, они могут действовать как вспомогательные клетки для улучшения выживаемости островков на ранней посттрансплантационной фазе. Совместная трансплантация мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток с β-клетками поджелудочной железы является многообещающей перспективой лечения сахарного диабета первого типа, а более глубокое изучение механизмов, обуславливающих их цитопротективное действие на трансплантат, может помочь в реализации данного терапевтического подхода и улучшить его эффективность. В исследовании для создания иммуноизолирующих скаффолдов использовали 1%-ный раствор альгината натрия низкой вязкости с добавлением физиологического раствора (натрия хлорид 0,9%), для полимеризации добавляли 2,2%-ный раствор BaCl2. В системах сокультивирования β-клеток с стволовыми клетками костномозгового происхождения и полученных из подкожной жировой клетчатки регистрировалось снижение продукции провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-12, IL-5) и ростового фактора GM-CSF. Антивоспалительная активность была более ярко выражена у стволовых клеток адипозного происхождения и показаны их иммуномодулирующие эффекты путем изменения цитокин-продуцирующей активности. Показано, что мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки, полученные из жировой ткани и костного мозга, оказывают цитопротективное действие на β-клетки поджелудочной железы путем изменения цитокин-продуцирующий активности в сторону противовоспалительного профиля.

Важным вопросом для современной медицины остается исследование ВИЧ-инфекции, которая, благодаря повсеместному применению антиретровирусной терапии, приобретает контролируемый характер, но в то же время не поддается полному излечиванию и имеет ряд «белых пятен» в понимании иммунопатогенеза нарушений, сопутствующих данному заболеванию. Целесообразно глубокое изучение системы интерферонов, в частности из семейства лямбда, в связи с их противовирусной активностью у пациентов с ВИЧ-инфекцией. Цель исследования – провести оценку содержания представителей семейства интерферонов-лямбда – IFNλ1 (IL-29) и IFNλ3 (IL-28В) у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Был проведен анализ сыворотки крови 120 пациентов с ВИЧ-инфекцией (средний возраст 49,7±6,2 года), находящихся на амбулаторном лечении в Центре профилактики и борьбы со СПИД ГБУЗ ККБ № 2 г. Владивостока. Основной клинический диагноз всех пациентов: ВИЧ-инфекция 4 А. Стадия вторичных заболеваний. Фаза ремиссии на фоне приема АРВТ. У 52 пациентов было установлено сопутствующее заболевание: хронический вирусный гепатит С. Определение содержания IFNλ1 (IL-29) и IFNλ3 (IL-28В) в сыворотке венозной крови осуществлялось методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), с использованием анализатора Multiscan. Для проведения ИФА использовались реактивы, произведенные R&D systems, каталожные номера DY5259; DY7246.
В группах пациентов с ВИЧ-инфекцией, как с вирусным гепатитом С, так и без него, значения IFNλ1 (IL-29) и IFNλ3 (IL-28В) были достоверно снижены в сравнении с группой контроля. При сравнении значений между группами, было выявлено более выраженное уменьшение уровня IFNλ1 (IL-29) в группе пациентов с вирусным гепатитом С. Анализируя уровень IFNλ3 (IL-28В) была выявлена противоположная картина, – значения в группе пациентов с ВИЧ-инфекцией и вирусным гепатитом С были выше, чем в группе без гепатита, однако не достигали значений контрольной группы.
Основываясь на данных о противовирусном влиянии IFNλ3 (IL-28В) на макрофагальную передачу ВИЧ, можно предположить, что индукция и поддержание высокого уровня интерферонов третьего типа могут благоприятно сказаться на течении ВИЧ-инфекции. Зарегистрированные изменения в уровне IFNλ1 (IL-29) и IFNλ3 (IL-28В) у пациентов с ВИЧ и ВГС демонстрируют нам вирусное влияние на врожденный иммунитет, характеризующееся разнонаправленным изменением при наличии или отсутствии вируса гепатита С. Изучение данных об изменениях врожденного иммунитета и роли интерферонов третьего типа может расширить понимание взаимодействия между организмом человека и ВИЧ и поспособствовать улучшению профилактических мероприятий и реабилитации у пациентов с ВИЧ-инфекцией.

Сепсис практически всегда связан с теми или иными нарушениями гемостаза. Факторами, выполняющими основную причинно-значимую роль в патогенезе данных процессов являются провоспалительные цитокины, эндотелий сосудов, тромбоциты, лейкоциты и экспрессированный на данных клетках тканевой фактор (tissue factor – TF), находящийся всегда в активном состоянии. Учитывая потенциальную связь системы коагуляции с патофизиологией сепсиса, TF можно рассматривать в качестве биомаркера для ранней диагностики, стратификации риска и оценки прогноза исхода заболевания при сепсисе. Цель – исследовать количественное содержание (CD14+CD142+) и уровень экспрессии TF на моноцитах у пациентов с сепсисом, проанализировать зависимость данных показателей от степени выраженности полиорганной дисфункции по шкале SOFA, исходов заболевания.
Было обследовано 67 пациентов с сепсисом. Степень тяжести полиорганной дисфункции/недостаточности оценивали по шкале – SOFA (Sepsis-related Organ Failure Assessments Score Sequential Organ Failure Assessment). Все пациенты были распределены на 2 группы с учетом тяжести состояния и выраженности органной недостаточности. 1-я группа (n = 30) – пациенты с диагнозом «сепсис» со степенью тяжести органной дисфункции < 6 баллов по шкале SOFA, 2-я группа (n = 37) – пациенты с диагнозом «сепсис» со степенью тяжести органной дисфункции > 6 баллов по шкале SOFA. Забор крови у пациентов проводился в первые 48 ч после поступления и установки диагноза. Исследовали количественное содержание (CD14+CD142+) и уровень экспрессии тканевого фактора на моноцитах методом проточной цитометрии.
Выявили, что содержание (CD14+CD142+) было существенно выше у пациентов сепсисом, чем у здоровых лиц (6,03±1,05%, против 0,24±0,02%, р = 0,001), с более тяжелой степенью органной дисфункции (SOFA) по сравнению с менее тяжелой (SOFA) (6,50±0,98% против 4,42±0,36%, р = 0,05). Высокий уровень экспрессии тканевого фактора на моноцитах прямо коррелировал r > 0,71 (p = 0,05) с тяжестью органной дисфункции (SOFA) и был сопряжен (р = 0,004) с летальным исходом заболевания. Данные результаты позволяют предположить, что экспрессия тканевого фактора на моноцитах может служить биомаркером, отражающим степень системного воспаления при сепсисе, быть критерием в прогнозе тяжести течения и исхода заболевания у пациентов с сепсисом.

Иммунная система, отвечающая за генетическое постоянство внутренней среды организма в силу своей исключительной чувствительности может выступать в роли показателя воздействия на организм различных экологических (как биотических, так и абиотических) факторов, т.е. служить индикаторной системой в зонах экологического благополучия и неблагополучия. В серии работ по изучению влияния на иммунную реактивность климатических и экологических факторов показано, что иммунная система также высокочувствительна к воздействию природных факторов, как к воздействию производственных факторов химической и физической природы. По-видимому, это связано с формированием иммунологической реактивности на популяционном уровне, адекватном конкретным средовым условиям, однако закономерности распределения вариантов иммунограмм по географическим зонам пока остаются неясными. В статье анализируется распространенность и структура аллегопатологии у детей в возрасте 1-3 года – «раннее детство» и 4-7 лет – «первое детство», родившихся и проживающих в разных климатоэкологических районах Калининградской области (приморская и континентальная зоны, а также условно «чистые» и «грязные» города, распределенные по уровню антропогенной нагрузки и напряженности экологической ситуации). Контрольными точками стали города: Светлогорск, Светлый, Калининград, Советск, Гусев и Неман. Контингент обследованных составил 3321 ребенок. В ходе работы анализировались: «История развития ребенка» (Учетная форма № 112/у), «Медицинская карта пациента, получающего медицинскую помощь в амбулаторных условиях» (Учетная форма № 025/у) и «Карта диагностики иммунологической недостаточности у детей», разработанная в ФБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБФ России (включала в себя в себя паспортные данные ребенка, сезонность повышенной заболеваемости, прививочный анамнез, перенесенные острые инфекции). Все заболевания и реакции, входящие в аллергический синдром, были разбиты на три группы: аллергические заболевания кожи, аллергические заболевания дыхательной системы, аллергические реакции на антигены различной природы. Выявленные различия демонстрируют высокую чувствительность иммунной системы к влиянию климатоэкологических факторов, действующих не на экстремальном, а на подпороговом уровне. Мы полагаем, что иммунная система ребенка реагирует даже на незначительные факторы среды обитания, которые, действуя комплексно, приводят к изменениям в ее работе. Что, в свою очередь, отражается на уровне иммунобиологической реактивности и, соответственно, на уровне и структуре аллергопатологии.

Формирование иммунитета у населения к различным вариантам возбудителя COVID-19 является одной из наиболее важных проблем для мирового сообщества. Цель исследования – сопоставить динамику изменения содержания M-CSF и VEGF-A, IL-34 в сыворотке крови больных ЭАГ II стадии, в зависимости от вида сформированного иммунитета (постинфекционный, поствакцинальный, «гибридный») для анализа изменения M-CSF-опосредованных механизмов развития гипертензии. В ходе работы сформированы 2 группы пациентов: 1-я группа – больные с ЭАГ II стадии и инфицирование SARS CoV-2 без пневмонии в анамнезе, вакцинация через 6 месяцев после лабораторного выздоровления, 2-я группа – пациенты с ЭАГ II стадии без COVID-19 в анамнезе, вакцинация в период наблюдения. Определение M-CSF, IL-34, VEGF-A, уровня IgG к SARS-CoV-2 проводили методом ИФА. Формирование постинфекционного иммунитета у пациентов с ЭАГ II стадии, несмотря на легкое течение COVID-19, сопровождается длительным (до 6 месяцев) патофизиологически значимым повышением в сыворотке крови уровня M-CSF (р < 0,001) со снижением IL-34 (р < 0,001). Анализ динамики изменения содержания M-CSF, IL-34, VEGF-A в поствакцинальном периоде в сыворотки крови больных ЭАГ II стадии с COVID-19 в анамнезе («гибридный» иммунитет) определил отсутствие (р < 0,05) изменения содержания M-CSF, VEGF-A после введения первого компонента «Гам-КовидВак» на фоне повышения уровня IgG к SARS-CoV-2, что позволяет говорить об иммуногенности первого компонента без запуска M-CSF-зависимого пути потенциального прогрессирования ЭАГ. Через 21 день после введения второго компонента вакцины выявлен рост M-CSF при сравнении как с предвакцинальными показателями, так и данными 21-го дня после введения первого компонента вакцины (р < 0,001). При сопоставлении динамики содержания M-CSF, IL-34 и VEGF-A у больных ЭАГ II стадии без COVID-19 в анамнезе в поствакцинальном периоде, с данными при формировании «гибридного» иммунитета, регистрируется повышение M-CSF через 21 день после введения первого и второго компонента на фоне снижения IL-34, но с восстановлением довакцинальных концентраций у 100% пациентов к 180-му дню с сопоставимой иммуногенностью через 180 дней. У пациентов с ЭАГ II имеет значение патогенетическая «суммация» доинфекционного дисбаланса цитокинового регулирования и постковидных изменений, что у ряда пациентов может быть причиной пролонгации стабилизации баланса системы M-CSF-IL-34-VEGF-A в поствакцинальном периоде при формировании «гибридного» иммунитета.

Иммунизация цельноклеточной адсорбированной коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакциной (АКДС) в редких случаях способна вызывать различные нежелательные эффекты (фебрильные судороги, нейромиалгический синдром и др.). Во многих работах указывается, что развитие данных патологических процессов часто связывают с активностью цитокинов. Существуют специфические про- и противовоспалительные цитокины, высокий уровень которых связывают с развитием неврологических осложнений после АКДС. Например, IL-6 и IL-1 часто связывают с развитием фебрильных судорог и энцефалопатий. С другой стороны, существуют клинические данные, указывающие на снижение частоты осложнений после сочетанного введения вакцинных препаратов. Таким образом, представляет особый интерес исследование цитокинового профиля при комбинированном введении АКДС с другой вакциной, что в ряде случаев приводит к снижению количества осложнений и лучшей переносимости вакцины. Вакцина от полиомиелитной инфекции в настоящее время является одной из самых безопасных. Более того, в связи с тем, что данные препараты используются уже достаточно давно и интерес к ним не такой высокий, как раньше, количество новых экспериментальных работ конкретно по цитокиновым профилям многих вакцин ограничено. В основном все существующие работы направлены на изучение различных патологических процессов, связанных с введением вакцинного препарата. Это приводит к тому, что механизм формирования иммунного ответа остается не до конца изученным. Целью данной работы стало изучение воздействия сочетанного введения вакцин на цитокиновый профиль in vitro. Были получены результаты для следующих цитокинов: IL-2, RANTES, Eotaxin, MIP-1β, IL-12p40, IL-4, IL-6, IL-1α и G-CSF в сыворотке экспериментальных животных после комбинированного введения АКДС и полиомиелитной вакцины и отдельно полиомиелитной вакцины. Цитокиновый профиль определяли с помощью флуоресцентного ридера MAGPIX компании Bio-Rad. В работе выявлены и описаны закономерности изменения цитокинового профиля как при самостоятельном введении полиомиелитной вакцины, так и в комплексе с АКДС-вакциной. Полученные в ходе работы результаты могут быть в дальнейшем использованы для более подробного изучения механизма формирования иммунного ответа на комбинированное введение вакцин и дальнейшего усовершенствования существующих препаратов.

Ревматоидный артрит (РА) является мультифакторным сложно-наследуемым заболеванием, в основе генетического компонента которого лежат межгенные взаимодействия, приводящие к формированию генных сетей, и актуальным направлением изучения полигенной природы РА является оценка взаимодействий «ген – ген».
Среди возможных генетических факторов, способствующих развитию заболевания, основополагающая роль принадлежит генам главного комплекса гистосовместимости, а именно HLA II класса.К другой группе рассматриваемых в литературе генетических факторов восприимчивости или устойчивости к РА относят полиморфные варианты генов цитокинов. Одним из возможных генов кандидатов, обеспечивающих восприимчивость к данной патологии и вклад в иммунопатогенез, по литературным данным, является ген TNFA. Особое расположение данного гена позволяет предположить формирование расширенных гаплотипов TNFA – HLA.
Исходя из вышеизложенного данной работе был проведен анализ особенностей распределения двухлокусных гаплотипов SNPs TNFA – HLA DRB1 в ассоциации с ревматоидным артритом в популяции русских Челябинской области.
В исследовании использовались следующие методы: выделение образцов ДНК из цельной крови, проведение генотипирования исследуемых полиморфизмов генов с помощью ПЦР, ПДРФ с электрофоретической детекцией. Расчет частот двухлокусных гаплотипов, образованных SNPs в точках -1031T/C, -863C/A промоторной области гена TNFA, расширенных гаплотипов TNFA – HLA DRB1 проводился с использованием EM-алгоритма и оценки неравновесного сцепления (D’; χ2; р) с помощью программы Arlequin ver. 3.5. Сравнение двух выборок с целью поиска ассоциации с предрасположенностью к РА проводилось с использованием стандартных иммуногенетических критериев.
Значимость различий при p ≤ 0,05. Анализ данных показал, что двухлокусные гаплотипы -1031T/C и -863C/A TNFA не ассоциированы с предрасположенностью к ревматоидному артриту в популяции русских.
Установлены гаплотипы, ассоциированные с предрасположенностью к ревматоидному артриту: TNFA -863*a – HLA DRB1*03, TNFA -1031*t – HLA DRB1*04, TNFA -1031*t – HLA DRB1*04. В исследовании выявлены следующие гаплотипы-протекторы: TNFA -1031*t – HLA DRB1*15; TNFA -1031*t – HLA DRB1*11.
Таким образом, наше исследование показывает, что кроме отдельных генных семейств HLA II класса в предрасположенность/устойчивость к ревматоидному артриту вносят вклад гаплотипические сочетания редких однонуклеотидных полиморфизмов в точках -1031, -863 С/А гена TNFA и HLA DRB1.