Features of immune status in patients with acute coronary syndrome with and without COVID-19, depending on the level of B1 lymphocytes

Full Text

Введение

Широко признано, что как врожденный, так и адаптивный иммунный ответ важны для инициации и прогрессирования атеросклероза, который в основном состоит из моноцитов, макрофагов, нейтрофилов, Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов [7]. В работе Volodarsky I. и соавт. [10] было показано, что воспаление играет важную роль в нестабильности бляшек и острых коронарных синдромах. Циркулирующие регуляторные B-клетки снижены у пациентов с острым инфарктом миокарда (ОИМ) по сравнению с пациентами со стабильной стенокардией напряжения. Исследование Casarotti A.C.A. и соавт. [2] было направлено на оценку роли подтипов В-лимфоцитов и родственных цитокинов в массе инфаркта и фракции выброса левого желудочка, полученных с помощью магнитно-резонансной томографии сердца, выполненной через 30 дней после ОИМ с подъемом сегмента ST (ОИМпST). У пациентов с ОИМпST, несмотря на раннюю реперфузию, объем поражения и фракция выброса левого желудочка были связаны с воспалительными реакциями, запускаемыми циркулирующими В-лимфоцитами. Уровень В2-лимфоцитов явился предиктором изменения фракции выброса левого желудочка на 30-й день.

Целью исследования явилось изучение показателей корпускулярных элементов крови и фагоцитарной активности нейтрофилов у лиц с острым коронарным синдромом в зависимости от того, перенесли они или нет COVID-19.

Материалы и методы

Обследовано 65 пациентов с острым коронарным синдромом (острый инфаркт миокарда и нестабильная стенокардия). Всем больным в течение 3 суток с момента поступления в стационар выполнена коронарография (КАГ) и стентирование коронарных артерий. Возраст пациентов от 35 до 65 лет. Все мужчины. Кроме общеклинических исследований, выполнены КАГ, а также иммунологические обследования. Перед обследованием все пациенты подписывали информированное согласие (протокол Этического комитета ЮУГМУ Минздрава России № 9 от 11.09.2006 и протокол этического комитета ГАУЗ ОТКЗ ГКБ № 1 г. Челябинска № 12 от 10.10.2022).

Проведено обследование: общий анализ крови – лейкоцитарный, эритроцитарный и тромбоцитарный ростки кроветворения, количественный и качественный состав ростков кроветворения проведен стандартизованным методом на гематологическом анализаторе Medonic M20 (Швеция). Из иммунологических показателей проводилась оценка фагоцитарной активности частиц латекса диаметром 1,7 мкм нейтрофилами (активность фагоцитоза, интенсивность фагоцитоза, фагоцитарное число); спонтанная и индуцированная НСТ-активность нейтрофилов определялись морфологическим методом (световая микроскопия с использованием микроскопов Olimpus (Япония). Фагоцитарную активность нейтрофилов определяли по их способности поглощать частицы латекса.

С помощью проточной цитометрии проводилось определение В1-лимфоцитов [1]. Все больные в зависимости от содержания В1-лимфоцитов и наличия или отсутствия CОVID-19 были разделены на 6 групп: болевшие CОVID-19 и имеющие пониженные В1-лимфоциты (1-я группа), нормальные (2-я группа), повышенные (3-я группа); не болевшие COVID-19 и имеющие пониженные В1-лимфоциты (4-я группа), нормальные (5-я группа), повышенные (6-я группа).

Результаты и обсуждение

В таблице 1 представлены данные корпускулярных элементов крови и фагоцитарной активности нейтрофилов у пациентов с острым коронарным синдромом, болевших и не болевших COVD-19.

 

ТАБЛИЦА 1. ПОКАЗАТЕЛИ КОРПУСКУЛЯРНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ И ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ, ПЕРЕНЕСШИХ ИЛИ НЕТ COVID-19

TABLE 1. INDICATORS OF BLOOD CORPUSCULAR ELEMENTS AND PHAGOCYTIC ACTIVITY OF NEUTROPHILS IN PATIENTS WITH ACUTE CORONARY SYNDROME WITH OR WITHOUT COVID-19

Показатель / Index	Болевшие COVID-19 / Sick with COVID-19			Не болевшие COVID-19 / Not sick with COVID-19
В1-клетки B1 cells	понижены downgraded (n = 19)	нормальные normal (n = 19)	повышены raised (n = 7)	понижены downgraded (n = 5)	нормальные normal (n = 11)	повышены raised (n = 4)
Лейкоциты крови, 109 кл/л Blood leukocytes, 109 cells/L	8,500±0,960 р1, 2 = 0,049	10,863±1,090 р2, 5 = 0,049	9,685±0,821	10,740±2,743	8,254±0,767	10,025±1,423
Эритроциты крови, 1012/л Blood erythrocytes, 109 cells/L	4,730±0,135 р1, 3 = 0,016	4,945±0,092 р2, 3 = 0,015 р2, 4 = 0,041	5,378±0,189 р3, 4 = 0,037	4,362±0,551	4,938±0,187	5,130±0,329
Средний корпускулярный объем гемоглобина, пг Mean corpuscular volume of hemoglobin, pg	29,000±0,791	29,531±0,605 р2, 3 = 0,037	27,400±0,542 р3, 4 = 0,001 р3, 5 = 0,018	30,640±0,331	29,982±0,701	28,700±2,311
Средняя концентрация корпускулярного гемоглобина Medium concentration corpuscular hemoglobin, g/L	334,684±2,648 р1, 5 = 0,017	337,263±2,871	332,571±3,046 р3, 5 = 0,013	333,600±7,724	343,545±2,495	338,250±6,860
Тромбоциты крови, 109 кл/л Blood platelets, 109 cells/L	263,947±21,547 р1, 2 = 0,044	321,211±24,683 р2, 3 = 0,036 р2, 4 = 0,041	242,285±15,182	230,200±21,631	260,909±29,751	248,250±23,531
Лимфоциты, % Lymphocytes, %	24,526±2,218 р1, 3 = 0,038	25,263±2,424	32,714±4,127 р3, 4 = 0,031	18,200±5,911 р4, 5 = 0,041	28,000±2,381	33,500±7,029
Моноциты, % Monocytes, %	10,578±0,702 р1, 4 = 0,015	9,947±0,504 р2, 4 = 0,012	9,285±0,521 р3, 4 = 0,049	7,000±1,414	9,181±0,658	9,250±2,015
Сегментоядерные нейтрофилы, % Segmented neutrophils, %	58,684±2,188 р1, 3 = 0,049	58,526±1,951 р2, 3 = 0,041	51,142±4,142 р3, 4 = 0,031	65,000±5,282	58,000±2,763	52,500±7,263
Палочкоядерные нейтрофилы, % Stab neutrophils, %	3,647±0,921	3,326±0,579	4,157±1,327	8,000±3,361 р4, 5 = 0,013	2,281±0,502	2,025±1,064
Лимфоциты, 109 кл/л Lymphocytes, 109 cells/L	1,897±0,179 р1, 2 = 0,026 р1, 3 = 0,003 р1, 6 = 0,004	2,586±0,293 р2, 4 = 0,040	3,005±0,265 р3, 4 = 0,003 р3, 5 = 0,020	1,480±0,360 р4, 5 = 0,039 р4, 6 = 0,003	2,239±0,214 р5, 6 = 0,021	3,067±0,111
Моноциты, 109 кл/л Monocytes, 109 cells/L	0,867±0,091	1,113±0,159 р2, 4 = 0,049 р2, 5 = 0,049	0,894±0,084 р3, 4 = 0,049	0,636±0,142	0,743±0,073	0,980±0,291
Гранулоциты, 109 кл/л Granulocytes, 109 cells/L	5,735±0,838	7,163±0,936	5,785±0,858	8,624±2,818 р4, 5 = 0,049	5,271±0,587	5,977±1,301
Ширина распределения клеток красной крови Distribution width of red blood cells, %	15,263±0,412 р1, 2 = 0,044 р1, 3 = 0,003	14,463±0,308 р2, 3 = 0,011 р2, 4 = 0,046	13,114±0,311 р3, 4 = 0,005 р3, 5 = 0,008 р3, 6 = 0,007	15,800±0,944	14,763±0,449	15,275±0,796
Тромбоцитокрит, % Thrombocytocrit, %	0,201±0,018 р1, 2 = 0,049	0,246±0,021 р2, 3 = 0,012	0,161±0,010 р3, 4 = 0,49	0,192±0,014	0,198±0,021	0,180±0,021
Средний объем тромбоцита, fL Mean platelet volume, fL	7,757±0,243 р1, 3 = 0,014 р1, 4 = 0,043	7,763±0,212 р2, 3 = 0,007 р2, 4 = 0,026	6,800±0,129 р3, 4 = 0,001 р3, 5 = 0,004	8,640±0,181 р4, 5 = 0,036 р4, 6 = 0,009	7,845±0,259	7,275±0,449
Ширина распределения тромбоцита, % Platelet distribution width, %	12,257±0,222	12,057±0,143 р2, 3 = 0,008	12,828±0,313 р3, 6 = 0,044	12,560±0,299	12,427±0,309	11,900±0,324
Активность фагоцитоза нейтрофилов,% Neutrophil phagocytosis activity,%	40,631±4,614 р1, 5 = 0,027	48,944±4,402 р2, 3 = 0,021	32,857±3,931 р3, 4 = 0,006 р3, 5 = 0,002	54,400±6,353	54,727±4,653	41,000±14,335
Интенсивность фагоцитоза нейтрофилов, усл. ед. Intensity of phagocytosis of neutrophils, conv. units	1,662±0,281 р1, 5 = 0,017	1,604±0,211 р2, 5 = 0,003	1,315±0,273 р3, 5 = 0,001	1,502±0,254 р4, 5 = 0,007	2,570±0,226	2,082±1,007
Фагоцитарное число нейтрофилов Phagocytic number of neutrophils	3,665±0,364 р1, 4 = 0,049 р1, 5 = 0,024	3,150±0,201 р2, 3 = 0,049 р2, 4 = 0,049 р2, 5 = 0,001 р2, 6 = 0,011	3,914±0,508 р3, 4 = 0,029	2,360±0,487 р4, 5 = 0,007 р4, 6 = 0,022	5,027±0,595	4,500±0,777
Нитросиний тетразолий (НСТ) спонтанная активность, % Nitroblue tetrazolium (NВT) spontaneous activity, %	25,947±3,442 р1, 3 = 0,005 р1, 5 = 0,049	35,000±3,110 р2, 3 = 0,047	49,428±10,947	28,000±5,186	35,727±5,454	26,250±6,156
НСТ спонтанный индекс, усл. ед. NВT spontaneous index, conv. units	0,414±0,065 р1, 3 = 0,009 р1, 5 = 0,039	0,499±0,045 р2, 3 = 0,017	0,807±0,191 р3, 4 = 0,049	0,392±0,088	0,626±0,104	0,460±0,136
НСТ индуцированная активность, % NВT induced activity, %	53,578±15,945 р1, 2 = 0,002 р1, 5 = 0,005	69,111±3,305	63,428±8,780	59,600±9,211	71,181±5,736	61,000±9,495
НСТ индуцированный индекс, усл. ед. NВT induced index, conv. units	0,708±0,066 р1, 2 = 0,002 р1, 3 = 0,045 р1, 5 = 0,004	1,008±0,069	1,040±0,261	0,908±0,199	1,063±0,119	0,795±0,138

 

Согласно представленным данным, количество лейкоцитов в общем анализе крови достоверно (р < 0,05) выше, средний корпускулярный объем гемоглобина ниже (р < 0,05) у пациентов, перенесших СOVID-19. Уровень тромбоцитов был выше у пациентов, перенесших COVID-19, максимально с нормальными В1-лимфоцитами. Максимальное число моноцитов регистрировалось у лиц с COVID-19 и нормальными В1-лимфоцитами, а минимальное – у больных 4-й группы. Наибольшее количество гранулоцитов отмечалось у лиц, не болевших новой коронавирусной инфекцией (НКВИ) со сниженными В1-лимфоцитами. Тромбоцитокрит был максимальным у пациентов 2-й группы. Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов была ниже у лиц, имевших НКВИ в анамнезе и повышенные В1-лимфоциты. Фагоцитарное число нейтрофилов было минимальным у больных без НКВИ в анамнезе и имевших низкие В1-лимфоциты. Максимальная спонтанная НСТ-активность регистрировалась у лиц с высокими В1-лимфоцитами и НКВИ в анамнезе, а минимальная – с низкими В1-лимфоцитами и перенесенным COVID-19. НСТ спонтанный индекс также был наиболее высоким у больных 3-й группы. Минимальные НСТ-индуцированная активность и индекс были в 1-й группе. Что касается клинической характеристики, то в 4-й группе 20% имели инфаркт миокарда, не было тромбозов стентов и летальных исходов. В 5-й группе 5 из 11 больных имели ОИМ, не было умерших и тромбозов стентов. 6-я группа: нет летальных исходов, все пациенты только с нестабильной стенокардией. То, что касается лиц, перенесших COVID-19 в клиническом плане. 1-я группа – у 50% выставлен диагноз «ОИМ», у 2 пациентов случился тромбоз стентов, 4 погибли. У больных с нормальными В1-клетками и НКВИ в анамнезе: 2 пациента скончались, у 2 – тромбоз стентов, у 65% регистрировался ОИМ. В 3-й группе не было умерших, не было тромбозов стентов, ОИМ был у 5 из 7 больных. Поэтому в клиническом плане более тяжелые пациенты с перенесенной НКВИ и нормальными или пониженными В1-лимфоцитами. В этих группах были выше уровни тромбоцитов и ниже НСТ-активность, как спонтанная, так и индуцированная.

Monaco C. и соавт. [6] было показано, что существует аутореактивная В-клеточная память после ОИМ. Гибель сердечных клеток приводит к высвобождению антигенов, которые индуцируют гуморальный иммунный ответ, что приводит к накоплению иммуноглобулинов в бляшках и, в конечном итоге, к усилению атерогенеза в отдаленных участках.

Zouggari Y. и соавт. [11] проиллюстрировали в своем исследовании, что после ОИМ у мышей зрелые В-лимфоциты индуцируют мобилизацию и использование моноцитов в миокарде, что приводит к усилению повреждения тканей и ухудшению функции миокарда. Kim N.D. и соавт. [4] показали, что после ОИМ циркулирующие В-клетки продуцируют хемокин Ccl7, который мобилизует воспалительные моноциты из костного мозга в кровь, после чего они затем возвращаются в поврежденное сердце. Истощение В-клеток после ОИМ ограничивает повреждение миокарда и улучшает функцию миокарда.

В работе Mo F. и соавт. [5] было продемострировано, что активированные В-клетки участвуют в устойчивом состоянии воспаления миокарда и активации иммунной системы после ОИМ и могут влиять на метаболизм миокардиального коллагена после ОИМ путем секреции цитокинов. Кроме того, В-клетки способствуют экспрессии миокардиального коллагена типа I и типа III и повреждают функцию выброса левого желудочка. Cohen K.W. и соавт. [3] в своем исследовании проиллюстрировали, что связывающие и нейтрализующие антитела против SARS-CoV-2 демонстрируют двухфазный распад с увеличенным периодом полураспада более 200 дней, что предполагает образование долгоживущих плазматических клеток.

В своей работе Sosa-Hernandez V.A. и соавт. [9] показали, что тяжесть течения COVID-19 сопровождается изменениями в субпопуляциях В-клеток, либо незрелых, либо терминально дифференцированных. Кроме того, существующая взаимосвязь частот подмножества В-клеток с клиническими и лабораторными параметрами предполагает, что эти лимфоциты могут служить потенциальными биомаркерами и даже активными участниками адаптивного противовирусного ответа, направленного против SARS-CoV-2.

Выводы

1. У пациентов с острым коронарным синдромом и перенесенным COVID-19, в сопоставлении с лицами без НКВИ в анамнезе, отмечается увеличение числа лейкоцитов, тромбоцитов, снижение активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов, спонтанной и стимулированной НСТ-активности, максимально выраженное у больных с низкими В1-лимфоцитами.
2. Наиболее тяжелые в клиническом плане пациенты были в группе лиц, перенесших COVID-19 и имеющих низкие В1-лимфоциты.

About the authors

Eleanora A. Safronova

South Ural State Medical University

Author for correspondence.
Email: safronovaeleonora68@gmail.com

PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Polyclinic Therapy and Clinical Pharmacology, South Ural State Medical University

Russian Federation, Chelyabinsk

L. V. Ryabova

South Ural State Medical University

Email: lianarabowa@rambler.ru

PhD, MD (Medicine), Associate Professor, Professor, Department of Life Safety, Disaster Medicine, Emergency Medicine, South Ural State Medical University

Russian Federation, Chelyabinsk

A. V. Zurochka

Research Institute of Immunology and Physiology, Ural Branch, Russian Academy of Sciences; South Ural State University (National Research University)

Email: av_zurochka@mail.ru

PhD, MD (Medicine), Professor, Honored Worker of Science of the Russian Federation, Leading Research Associate, Laboratory of Immunopathophysiology, Research Institute of Immunology and Physiology, Ural Branch, Russian Academy of Sciences, Yekaterinburg; Head, Laboratory of Immunobiotechnology of the Russian-Chinese Center, South Ural State University (National Research University)

Russian Federation, Yekaterinburg; Chelyabinsk

References

Supplementary files