ВЛИЯНИЕ КИCСПЕПТИНА НА СУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ СОСТАВ РЕГУЛЯТОРНЫХ КЛЕТОК (TH17, TREG, INKT) ТИМУСА IN VITRO
- Авторы: Орлова Е.Г.1, Логинова О.А.1, Горбунова О.Л.1, Ширшев С.В.1
-
Учреждения:
- Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь, Россия
- Раздел: Объединенный иммунологический форум 2024
- URL: https://rusimmun.ru/jour/article/view/16681
- DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-16681-TKE
- ID: 16681
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Резюме
Пептидный гормон кисспептин, продуцируемый нейронами передней зоны гипоталамуса, является ключевым регулятором становления гонадостата и репродуктивной функции, и обладает иммунорегуляторной активностью. При беременности кисспептин активно продуцируется плацентой, присутствует в периферической крови и оказывает влияние на клетки иммунной системы, которые экспрессируют специфические рецепторы к гормону, в том числе на клетки тимуса. Однако эффекты гормона на тимопоэз в аспекте беременности не изучены. Поэтому цель работы – изучить влияние киcспептина в концентрации, характерной для беременности, на субпопуляционный состав регуляторных клеток тимуса in vitro. Тимоциты культивировали 72ч с кисспептином в концентрации (9,6 пМ), характеризующей его максимальный уровень в периферической крови при беременности, в присутствии CD3/CD28-активирующих частиц и далее оценивали субпопуляционный состав регуляторных клеток, экспрессию в них Ki-67, Bcl-2 методом проточной цитометрии. Оценивали процентное содержание Т-регуляторных лимфоцитов (Treg), как процент CD4+CD25+FOXP3+клеток; T-хелперов, продуцирующих интерлейкин17 (Th17), как процент CD4+IL-17A+RORgt+клеток; инвариантных Т-лимфоцитов с функциями натуральных киллеров (iNKT), как процент CD3hiVa24Ja18+клеток в культуре тимоцитов. В ряд проб для индукции апоптоза вносили дексаметазон (10-6М). Отдельно оценивали влияние примированных кисспептином плазмацитоидных дендритных клеток (пДК) тимуса на субпопуляционный состав регуляторных клеток (Th17, Treg, iNKT) в культуре тимоцитов. Для этого выделенные методом иммуномагнитной сепарации пДК тимуса культивировали сутки с кисспептином, а далее добавляли в культуру интактные аутологичные тимоциты в соотношении 1:10 и культивировали еще 72ч. Установлено, что инкубация тимоцитов с кисспептином не влияла на процентное содержание Treg, iNKT и Th17 в культуре in vitro, а также экспрессию Ki-67 и Bcl-2 в этих клетках. В условиях индукции апоптоза дексаметазоном выявлено увеличение процента Bcl-2+Th17 клеток под влиянием кисспептина. При инкубации тимоцитов с примированными кисспептином пДК выявлено увеличение процентного содержания Th17 в культуре тимоцитов, тогда как количество Treg и iNKT не изменялось. Можно заключить, что кисспептин регулирует процентное содержание Th17 в культуре тимоцитов in vitro, опосредуя свои эффекты влиянием на пДК тимуса. А действуя непосредственно на тимоциты, увеличивает устойчивость тимических Th17 к дексаметазон-индуцированному апоптозу. В целом, полученные результаты расширяют наши представления о гормональной регуляции механизмов, контролирующих соотношение регуляторных клеток при беременности.
Ключевые слова
Об авторах
Екатерина Григорьевна Орлова
Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь, Россия
Email: orlova_katy@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1195-8962
SPIN-код: 7707-1076
Scopus Author ID: 7103163971
ResearcherId: D-8782-2017
Доктор биологических наук, в.н.с. лаборатории иммунорегуляции
Россия, 614081 Пермь, ул. Голева 13Ольга Александровна Логинова
Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь, Россия
Email: jallopukki@ya.ru
ORCID iD: 0000-0001-6050-8656
SPIN-код: 9610-3514
Scopus Author ID: 56728157800
ResearcherId: T-6042-2017
Кандидат биологических наук, м.н.с. лаборатории иммунорегуляции
Россия, г. Пермь, ул. Голева, 13Ольга Леонидовна Горбунова
Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь, Россия
Email: olia15_77@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7580-6848
SPIN-код: 9151-3674
Scopus Author ID: 24468145700
ResearcherId: J-8285-2018
Кандидат биологических наук, н.с. лаборатории иммунорегуляции
Россия, 614081 Пермь, ул. Голева 13Сергей Викторович Ширшев
Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь, Россия
Автор, ответственный за переписку.
Email: shirshev@iegm.ru
ORCID iD: 0000-0001-5766-7496
SPIN-код: 4729-8267
Scopus Author ID: 7005581867
ResearcherId: N-7473-2017
Доктор медицинских наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ, заведующий лабораторией иммунорегуляции
Россия, г. Пермь, ул. Голева, 13Список литературы
- 1 Горбунова О.Л., Ширшев С.В. Роль кисспептина в формировании иммунологической толерантности при беременности. Доклады АН., 2014, Т. 457, № 4. С.494-497
- 2 Ширшев С.В., Орлова Е.Г., Логинова О.А. и др. Гормональная регуляция дифференцировки дендритных клеток тимуса. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2018, Т. 165, № 2, С. 193-197. doi: 10.1007/s10517-018-4136-4.
- 3 Dhillo W.S., Murphy K.G., Bloom S.R. The neuroendocrine physiology of kisspeptin in the human. Rev Endocr Metab Disord., 2007, Vol. 8, no. 1, pp. 41-46. doi: 10.1007/s11154-007-9029-1
- 4 Evans V.A., Lal L., Akkina R. et al. Thymic plasmacytoid dendritic cells are susceptible to productive HIV-1 infection and efficiently transfer R5 HIV-1 to thymocytes in vitro. Retrovirology, 2011, Vol. 8, pp. 43. doi: 10.1186/1742-4690-8-43
- 5 Hellberg S., Mehta R.B., Forsberg A. et al. Maintained thymic output of conventional and regulatory T cells during human pregnancy. J. Allergy Clin Immunol., 2019, Vol. 143, no. 2, pp. 771-775.e7. doi: 10.1016/j.jaci.2018.09.023
- 6 Horikoshi Y., Matsumoto H., Takatsu Y. et al. Dramatic elevation of plasma metastin concentrations in human pregnancy: metastin as a novel placenta-derived hormone in humans. J. Clin Endocrinol Metab., 2003, Vol. 88, no. 2, pp. 914-919. doi: 10.1210/jc.2002-021235
- 7 Khalaf W.S., Mahmoud M.R.A, Elkhatib W.F., Hashem H.R., Soliman W.E. Phenotypic characterization of NKT-like cells and evaluation of specifically related cytokines for the prediction of unexplained recurrent miscarriage. Heliyon., 2021, Vol. 7, no. 11, pp.e08409. doi: 10.1016/j.heliyon.2021.e08409
- 8 Ohtaki T., Shintani Y., Honda S. et al. Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature, 2001, Vol. 411, no. 6837, pp. 613-617. doi: 10.1038/35079135
- 9 Orlova E., Loginova O., Shirshev S. Leptin regulates thymic plasmacytoid dendritic cell ability to influence the thymocyte distribution in vitro. Int Immunopharmacol., 2023, Vol. 117, pp. 109912. doi: 10.1016/j.intimp.2023.109912
- 10 Saito S., Nakashima A., Shima T., Ito M. Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy. Am J Reprod Immunol., 2010, Vol. 63, no. 6, pp. 601-610. doi: 10.1111/j.1600-0897.2010.00852.x
- 11 Stoeckle C., Rota I.A., Tolosa E., Haller C., Melms A., Adamopoulou E. Isolation of myeloid dendritic cells and epithelial cells from human thymus. J. Vis Exp., 2013, Vol. 79, pp.e50951. doi: 10.3791/50951
- 12 Wagner M.I., Mai C., Schmitt E. et al. The role of recent thymic emigrant-regulatory T-cell (RTE-Treg) differentiation during pregnancy. Immunol Cell Biol., 2015, Vol. 93, no. 10, pp. 858-867. doi: 10.1038/icb.2015.51
- 13 Xing R., Liu F., Yang Y. et al. GPR54 deficiency reduces the Treg population and aggravates experimental autoimmune encephalomyelitis in mice. Sci China Life Sci., 2018, Vol. 61, no. 6, pp. 675-687. doi: 10.1007/s11427-017-9269-8