Отправить статью по E-mail КОНЪЮГАТЫ БЕЛКА А С АНТИГЕНОМ СПОСОБНЫ УСИЛИВАТЬ ВЫРАБОТКУ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ ПРИ ИНТРАНАЗАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ
- Авторы: Волосникова Е.А.1, Волкова Н.В.1, Гайворонский С.И.1, Симакова О.В.1, Есина Т.И.1, Рар А.А.1, Щербаков Д.Н.1
-
Учреждения:
- Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
- Раздел: Иммунологические чтения в Челябинске
- Дата подачи: 28.03.2025
- Дата принятия к публикации: 25.05.2025
- URL: https://rusimmun.ru/jour/article/view/17148
- DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-17148-PAA
- ID: 17148
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Резюме
Цель. Изучение иммуногенных свойств конъюгатов белка А с рецептор-связывающего домена (RBD) спайкового белка SARS-CoV-2 (вариант B.1.617.2, Delta) и их способности индуцировать специфический гуморальный иммунный ответ при интраназальном введении.
Материалы и методы. Конъюгаты рекомбинантного RBD (SARS-CoV-2, вариант Delta) с белком А Staphylococcus aureus получали с использованием EDC или Sulfo-SMCC (1:1 моль) с последующей очисткой гель-фильтрацией. Иммунизацию проводили на 80 мышах Balb/c (6 недель), разделенных на группы по 10 особей. Животным опытных групп двукратно с интервалом 14 дней вводили интраназально 20 мкл конъюгата (50 мкг RBD), контрольным группам - RBD внутримышечно или физраствор. Кровь забирали на 10-й день после бустинга. Титр специфических IgG определяли ИФА с использованием RBD в качестве антигена. Статистическую значимость оценивали с помощью U-критерия Манна-Уитни (GraphPad Prism 8.0, p<0.05).
Результаты. Интраназальное введение конъюгатов RBD с белком А (Con-S и Con-E) индуцировало высокие титры специфических IgG (до 10⁵), сопоставимые с внутримышечным введением RBD. Оба конъюгата показали статистически значимое усиление иммунного ответа по сравнению с интраназальным введением свободного RBD (p≤0.05). При этом наблюдалась гетерогенность ответа среди животных: часть мышей демонстрировала слабый иммунный ответ, что может быть связано с особенностями интраназального введения.
Выводы. Конъюгаты RBD с белком А Staphylococcus aureus при интраназальном введении вызывают выраженный IgG-ответ, сравнимый с внутримышечной иммунизацией, демонстрируя адъювантные свойства белка А. Оба метода конъюгирования (Sulfo-SMCC и EDC) одинаково эффективны. Несмотря на вариабельность ответа, связанную с особенностями мукозального введения, результаты подтверждают перспективность использования белка А в разработке интраназальных вакцин против SARS-CoV-2.
Об авторах
Екатерина Александровна Волосникова
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: kulenok84@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5028-5647
SPIN-код: 9548-7439
Scopus Author ID: 36626467100
Ведущий научный сотрудник, заведующая отделом разработки технологий и пилотного производства биопрепаратов
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоНаталья Вячеславовна Волкова
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: tasha_wolkowa11.93@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5010-9424
Кандидат биологических наук
Научный сотрудник лаборатории молекулярной и синтетической биологии
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоСергей Игоревич Гайворонский
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: gsi0902@mail.ru
ORCID iD: 0009-0004-0276-7229
Стажер-исследователь лаборатории молекулярной и синтетической биологии
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоОльга Владимировна Симакова
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: simakova_ov@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0002-1222-7574
SPIN-код: 6507-5706
Scopus Author ID: 58095900900
Младший научный сотрудник отдела биологических исследований
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоТатьяна Игоревна Есина
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: esina_ti@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0001-9006-8313
SPIN-код: 8342-0830
Scopus Author ID: 57190121468
Научный сотрудник отдела разработки технологий и пилотного производства биопрепаратов
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоАнастасия Анатольевна Рар
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: rar_aa@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0009-0000-2652-8434
Инженер микробиолог отдела разработки технологий и пилотного производства биопрепаратов
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. КольцовоДмитрий Николаевич Щербаков
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Автор, ответственный за переписку.
Email: dnshcherbakov@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8023-4453
SPIN-код: 9616-0933
Scopus Author ID: 37027118800
Кандидат биологических наук
Ведущий научный сотрудник, заведующий лабораторией молекулярной и синтетической биологии
Россия, 630559, Россия, НСО, р.п. Кольцово
Список литературы
- Андреев Ю.Ю., Топтыгина А.П. Адъюванты и иммуномодуляторы в составе вакцин //Иммунология. – 2021. – Т. 42, №. 6. – С. 720-729. Andreev Y.Y., Toptygina A.P. Adjuvants and immunomodulators in vaccines. Immunologiya = Immunologiya, 2021, Vol. 42, no. 6, pp. 720-729. (In Russ.) https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-720-729
- Дьякон А.В., Хрыкина И.С., Хегай А.А., Дьяченко И.А., Мурашев А.Н., Ивашев М.Н. Метод забора крови у животных //Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2013. – Т. 11, №1. – С. 84-85. D'yakon A.V., Khrykina I.S., Khegay A.A., D'yachenko I.A., Murashev A.N., Ivashev M.N. Method of blood sampling in animals. Mezhdunarodnyi zhurnal prikladnykh i fundamental'nykh issledovanii = International Journal of Applied and Fundamental Research, 2013, Vol. 11, no.2, pp. 84-85. (In Russ.) https://applied-research.ru/ru/article/view?id=4434
- Borges O., Borchard G. Mucosal vaccination: opportunities and challenges. In: Novel immune potentiators and delivery technologies for next generation vaccines. Springer US, 2013, pp. 65-80. - https://doi.org/10.1007/978-1-4614-5380-2_3
- Eriksson K., Holmgren J. Recent advances in mucosal vaccines and adjuvants. Curr. Opin. Immunol., 2002, Vol. 14, no. 5, pp. 666-672. - https://doi.org/10.1016/s0952-7915(02)00384-9
- Holmgren J., Czerkinsky C. Mucosal immunity and vaccines. Nat. Med., 2005, Vol. 11, no. 4 Suppl, pp. S45-S53. - https://doi.org/10.1038/nm1213
- Kim M.Y., Vergara E., Tran A., Paul M.J., Kwon T.H., Ma J.K.C., Jang Y.S., Reljic R. Marked enhancement of the immunogenicity of plant-expressed IgG-Fc fusion proteins by inclusion of cholera toxin non-toxic B subunit within the single polypeptide. Plant Biotechnol. J., 2024, Vol. 22, no. 5, pp. 1402-1416. - https://doi.org/10.1111/pbi.14275
- Li M., Wang Y., Sun Y., Cui H., Zhu S.J., Qiu H.J. Mucosal vaccines: Strategies and challenges. Immunol. Lett., 2020, Vol. 217, pp. 116-125. - https://doi.org/10.1016/j.imlet.2019.10.013
- Lycke N. Recent progress in mucosal vaccine development: Potential and limitations. Nat. Rev. Immunol., 2012, Vol. 12, pp. 592–605. - https://doi.org/10.1038/nri3251
- Puga-Gómez R., Ricardo-Delgado Y., Rojas-Iriarte C., Céspedes-Henriquez L., Piedra-Bello M., Vega-Mendoza D., Pérez N.P., Paredes-Moreno B., Rodríguez-González M., Valenzuela-Silva C., Sánchez-Ramírez B., Rodríguez-Noda L, Pérez-Nicado R., González-Mugica R., Hernández-García T., Fundora-Barrios T., Echevarría M.D., Enriquez-Puertas J.M., Infante-Hernández Y., Palenzuela-Díaz A., Gato-Orozco E., Chappi-Estévez Y., Francisco-Pérez J.C., Suarez-Martinez M., Castillo-Quintana I.C., Fernandez-Castillo S., Climent-Ruiz Y., Santana-Mederos D., García-Vega Y., Toledo-Romani M.E., Doroud D., Biglari A., Valdés-Balbín Y., García-Rivera D., Vérez-Bencomo V.; SOBERANA Research Group. Open-label phase I/II clinical trial of SARS-CoV-2 receptor binding domain-tetanus toxoid conjugate vaccine (FINLAY-FR-2) in combination with receptor binding domain-protein vaccine (FINLAY-FR-1A) in children. Int. J. Infect. Dis., 2023, Vol. 126, pp. 164-173. - https://doi.org/10.1016/j.ijid.2022.11.016
- Silverman G.J., Goodyear C.S., Siegel, D.L. On the mechanism of staphylococcal protein A immunomodulation. Transfusion, 2005, Vol. 45, no. 2, pp. 274-280. - https://doi.org/10.1111/j.1537-2995.2004.04333.x
- Xing M., Hu G., Wang X., Wang Y., He F., Dai W., Wang X., Niu Y., Liu J., Liu H., Zhang X., Xu J., Cai Q., Zhou D. An intranasal combination vaccine induces systemic and mucosal immunity against COVID-19 and influenza. N.P.J. Vaccines, 2024, Vol. 9, no. 1, article number: 64. - https://doi.org/10.1038/s41541-024-00857-5
- Yuki Y., Kiyono H. Mucosal vaccines: novel advances in technology and delivery. Expert Rev. Vaccines, 2009, Vol. 8, no. 8, pp. 1083-1097. - https://doi.org/10.1586/erv.09.61
- Zhao T., Liu S., Wang P., Zhang Y., Kang X., Pan X., Li L., Li D., Gao P., An Y., Song H., Liu K., Qi J., Zhao X., Dai L., Liu P., Wang P., Wu G., Zhu T., Xu K., Li Y., Gao G.F. Protective RBD-dimer vaccines against SARS-CoV-2 and its variants produced in glycoengineered Pichia pastoris. PLoS Pathog., 2024, Vol. 20, no. 8, article number: e1012487. - https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1012487
Дополнительные файлы
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).