СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ВЛИЯНИЯ ЭКСТРАКТА ИЗ ГОЛОТУРИЙ И ИНДУКТОРОВ ПОЛЯРИЗАЦИИ МАКРОФАГОВ НА МОДЕЛИ ФАГОЦИТОВ EUPENTACTA FRAUDATRIX ПРИ РАНЕНИ

Резюме

Голотурии известны своей высокой способностью к регенерации. Экстракт (ЭГ) из тканей голотурий способен ускорять заживление ран. У позвоночных животных в регуляции заживления участвуют два типа макрофагов с различной ролью на разных стадиях заживления. У голотурий также выделяются две обогащенные фракции фагоцитов, являющихся аналогами макрофагов, Ф1 и Ф2. Механизмы влияния ЭГ на отдельные типы фагоцитов в процессе ранозаживления в модельных экспериментах оставались неисследованными. Представляло интерес исследование влияния ЭГ в сравнении с препаратами, известными как индукторы поляризации макрофагов. Целью данной работы явилось изучение влияния ЭГ на численность и фенотип фагоцитов Ф1 и Ф2 при ранении голотурии Eupentacta fraudatrix в сравнении с таковым гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующенр фактора (GM-CSF) и фактора некроза опухолей (TNF)-α.    Экспериментальным животным (n=4-6) скальпелем наносили поверхностную рану. Части животных дополнительно инъецировали препараты: GM-CSF, TNF-α или ЭГ. Через 0 мин и 1 сут. фагоциты Ф1 и Ф2 выделяли центрифугированием целомической жидкости в градиенте плотности фиколл-верографина. Определяли концентрацию целомоцитов и содержание фагоцитов Ф1 и Ф2 методами световой микроскопии. Оценку связывания клеток ФИТЦ-мечеными лектинами из Dolichos biflorus (DBA), Canavalia ensiformis (conA) и Glycin max (SBA) проводили с использованием флуоресцентного микроскопа. Измерение длины раны проводили через 0 мин и 72 ч.    Поверхностное повреждение тела голотурии вызывало через 24 ч возрастание концентрации целомоцитов и содержания фагоцитов Ф1, но снижение содержания Ф2 фагоцитов. Изменения в численности клеток целомической жидкости у раненых животных и снижение их дифференциации, о котором судили по связыванию лектина DBA,  при воздействии препаратов свидетельствуют о том, что цитокины, по-видимому, вызывали сдвиг соотношения фагоцитов двух типов в тканях в сторону преобладания Ф1 фагоцитов, а ЭГ - Ф2 фагоцитов. Оценка связывания клетками conA выявила, что цитокины подавляли функциональную активность Ф1 фагоцитов при ранении. ЭГ не только подавлял функциональную активность Ф1 фагоцитов, но и стимулировал  активность Ф2 фагоцитов, при этом ускорял заживление раны по сравнению с цитокинами.     Ускорение заживления раны при воздействии ЭГ связано с преимущественной активацией Ф2 фагоцитов и их рекрутированием в ткани. Это свидетельствует о важной роли Ф2 фагоцитов в восстановлении тканей.