Применение лектинов для характеристики гликанов в составе рекомбинантных белковых препаратов
- Авторы: Монахова В.С.1, Сушкин М.Е.1, Пигарева Н.В.1, Симбирцев А.С.1
-
Учреждения:
- Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
- Выпуск: Том 21, № 4 (2018)
- Страницы: 707-709
- Раздел: КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
- Дата подачи: 22.10.2020
- Дата публикации: 15.10.2018
- URL: https://rusimmun.ru/jour/article/view/827
- DOI: https://doi.org/10.31857/S102872210002646-5
- ID: 827
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Гликозилирование является наиболее распространенной посттрасляционной модификацией белков. Гликаны в составе рекомбинантных антител и цитокинов определяют их свойства, такие как биологическая активность, стабильность молекулы, время циркуляции в организме. Поэтому анализ гликанов является одной из важнейших характеристик препарата. Лектины – это белки, специфично связывающиеся с сахарами и гликанами – отдельными цепочками сахаров, в составе гликопротеинов. Целью данного исследования являлась разработка метода иммуноферментного твердофазного лектинового анализа для характеристики гликанов. В ходе экспериментов были определены условия анализа гликопротеинов в очищенном виде и в супернатантах, подобран блокирующий агент и времена инкубации с лектинами и антителами для уменьшения фонового сигнала. В результате лектиновый анализ может быть использован в качестве одного из методов оценки состава гликанов в белковых препаратах.
Ключевые слова
Об авторах
В. С. Монахова
Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
Автор, ответственный за переписку.
Email: noemail@neicon.ru
Россия
М. Е. Сушкин
Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Н. В. Пигарева
Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
Email: noemail@neicon.ru
Россия
А. С. Симбирцев
Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Список литературы
- Landemarre L., Duverger E. Lectin glycoprofi ling of recombinant therapeutic interleukin-7. In the book: Glycosylation engineering of biopharmaceuticals: Methods and protocols. Humana Press, 2013; 221–26.
- Hyoung J. K., Seung J. L., Kim H.-J. Antibody-based enzyme-linked lectin assay (ABELLA) for the sialylated recombinant human erythropoietin present in cell culture supernatant. Journal of Pharmaceutical and biomedical analysis. 2008, 48, 716–721.
- Павловская Н.Е, Гагарина И. Н. Функциональная роль лектинов растений как предпосылка для их применения в биотехнологии. Химия растительного сырья. 2017, 1, 21–35. [Pavlovskaya N. E., Gagarina I. N. Functional role of plant lectins as a premise for its application in biotechnology. Chemistry of vegetable raw materials. 2017, 1, 21–35]
- Wu J., Zhu J., Yin H., Buckanovich R. J., Lubman D. M. Analysis of glycan variation on glycoproteins from serum by the reverse lectin-based ELISA assay. Journal of proteome research. 2014, 13, 2197–2204.
- Thompson R., Creavin A., O’Connell M., O’Connor B., Clarke P. Optimization of the enzyme-linked lectin assay for enhanced glycoprotein and glycoconjugate analysis. Analytical Biochemistry. 2011, 413, 114–122.
- Gornik O., Lauc G. Enzyme linked lectin assay (ELLA) for direct analysis of transferrin sialylation in serum samples. Clinical Biochemistry. 2007, 40, 718–723.
- Zhang L., Luo S., Zhang B. The use of lectin microarray for assesising glycosylation of therapeutic proteins. Mabs. 2016, 8 (3), 524–535.
- Weber A., Minibeck E., Scheifl inger F., Turecek P. L. Development of a lectin binding assay to differentiate between recombinant and endogenous proteins in pharmacokinetics studies of protein-biopharmaceuticals. Journal of pharmaceuticals and biomedical analysis. 2015, 108, 21–28.