LYMPHOCYTE SUBSETS IN EPICARDIAL, THYMIC AND SUBCUTANEOUS ADIPOSE TISSUE DURING ADVANCED CORONARY ATHEROSCLEROSIS IN PATIENTS WITH CORONARY ARTERY DISEASE

Full Text

Введение

В настоящее время важная роль жировой ткани в регуляции метаболизма, процессов репродукции, иммунорегуляции и увеличения риска сердечно-сосудистых заболеваний является общепризнанной. Кроме того, установлено, что свойства различных жировых депо разнятся, как по характеристикам адипоцитов, основных клеточных элементов жировой ткани, так и по составу клеток стромально-сосудистой фракции жировой ткани, которые очень тесно взаимодействуют с адипоцитами [4].

Отличительной чертой висцеральной жировой ткани является значительная доля в ней FoxP3+ Т-регуляторных (Treg)-лимфоцитов, которые в норме могут составлять до 50% от всех CD4+ Т-лимфоцитов [15]. FoxP3 является основным транскрипционным фактором Treg, что подразумевает необходимость его транслокации в ядро для участия Treg-лимфоцитов в подавлении иммунного ответа и воспаления [10]. В последнее время обсуждается наличие субпопуляций Treg-лимфоцитов с высокой и низкой экспрессией молекулы CD25 (CD4+CD25^hiFoxP3+ и CD4+CD25^lowFoxP3+Treg), которые, по-видимому, представляют собой клетки на различных стадиях зрелости. Причем, увеличение доли клеток с низкой экспрессией CD25 оказалось характерным для пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями [2].

Следует признать, что для пациентов с сердечно-сосудистой патологией, в том числе, атеросклеротической природы, важнейшую роль играет морфология и функциональная активность эпикардиальной жировой ткани (ЭЖТ) [3]. ЭЖТ непосредственно прилежит к ткани миокарда и имеет с ней общее кровоснабжение. Несмотря на то, что адипоциты ЭЖТ имеют морфологию, свойственной белой жировой ткани, они обладают рядом черт бурой жировой ткани, что определяет их уникальность [7]. У пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) ЭЖТ характеризуется более выраженным воспалением по сравнению с подкожной жировой тканью (ПЖТ) и висцеральными жировыми депо [7]. Однако на сегодняшний день получено крайне мало данных о вовлеченности лимфоцитарного звена иммунной системы в модуляцию воспаления в ЭЖТ у пациентов с ИБС, а также о взаимосвязи выраженности коронарного атеросклероза с долей иммуносупрессорных FoxP3+ T-регуляторных лимфоцитов в составе стромально-сосудистой фракции ЭЖТ.

Жировая ткань тимуса (ТЖТ) представляет собой наименее изученное в функциональном аспекте депо жировой ткани, начиная с того, что отсутствует однозначное мнение о происхождение тимусных адипоцитов [9]. При этом показано, что тимус в зрелом возрасте сохраняет очаги функциональной активности. FoxP3+ Treg-лимфоциты, в свою очередь, оказались способными к рециркуляции в тимус. Рециркулировавшие Treg могут подавлять развитие Treg-лимфоцитов de novo и, таким образом, способствовать срыву аутоиммунной толерантности, что особенно актуально у пациентов с ИБС и атеросклерозом [1, 6], однако взаимосвязь клеточного состава ТЖТ с выраженностью коронарного атеросклероза по-прежнему остается неизученной.

Целью данной работы стало исследование состава субпопуляций лимфоцитов и свойств FoxP3+ Treg-лимфоцитов в эпикардиальной, тимусной и подкожной жировой ткани в зависимости от выраженности коронарного атеросклероза у пациентов с хронической ИБС.  

Материалы и методы

Проведено наблюдательное одноцентровое одномоментное исследование на базе НИИ кардиологии Томского НИМЦ (директор – академик Попов С.В.). В исследование вошло 24 пациента с ИБС, имеющие показания для проведения хирургической операции на открытом сердце. Все исследования и манипуляции были проведены в рамках Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266. Исследование было одобрено локальным этическим комитетом НИИ кардиологии Томского НИМЦ (протокол № 241 от 09.03.2023 г.). Все пациенты, вошедшие в исследование, подписали добровольное информированное согласие. Критерии включения в исследование: возраст пациентов от 40 до 70 лет; наличие верифицированного диагноза хронической ИБС со стабильной стенокардией II – III ФК; наличие показаний для проведения селективной ангиографии и проведения кардиохирургического вмешательства на открытом сердце. Критерии исключения из исследования: острые атеросклеротические осложнения или проведение хирургического вмешательства в течение последних 6 месяцев; любое острое воспалительное заболевание или хроническое заболевание в стадии обострения; хроническая болезнь почек выше с3б; любое онкологическое или гематологическое заболевание; отказ от участия в исследовании.

Все пациенты получали стандартную медикаментозную терапию. Как минимум за неделю до хирургического вмешательства всем пациентам была выполнена селективная ангиография на ангиографическом комплексе Artis one и Digitron-3NAC компьютерной системе (Siemens Shenzhen Magnetic Resonance Ltd., Shenzhen, China). На основании данных ангиографии оценивали выраженность коронарного атеросклероза путем расчета индекса  Gensini Score [13].

Материалом для исследования служили образцы ЭЖТ, ПЖТ и ТЖТ, взятые в ходе операционного вмешательства, массой 0,2 – 1 г. Транспортировку образцов в лабораторию осуществляли в течение 15 минут после помещения жировой ткани в среду М199. Выделение стромально-сосудистой фракции жировой ткани проводили следующим образом: образцы жировой ткани механически измельчали, добавляли раствор коллагеназы I типа в буфере Кребса-Рингера  (1 мг/мл, ПанЭко, Россия) и помещали в термостат при 37 °С и постоянном мягком перемешивании; затем добавляли раствор Кребса-Рингера в соотношении 1:1 для нейтрализации коллагеназы; полученную суспензию клеток пропускали через нейлонный фильтр (Falcon Cell strainer, диаметр пор 100 мкм), центрифугировали 5 мин при 400g, пропускали через нейлонный фильтр (Falcon Cell strainer, диаметр пор 700 мкм), центрифугировали 5 мин при 400g и ресуспендировали осадок в полной среде RPMI 1640 (10% фетальной бычьей сыворотки; 1% L-глутамина; 1% пенициллина/стрептомицина).

Суспензию клеток стромально-сосудистой фракции ЭЖТ, ПЖТ и ТЖТ аликвотировали по 100 мкл и проводили окрашивание основных субпопуляций лимфоцитов и NK-клеток (использовали коктейль моноклональных антител: анти-CD3-FITC; анти-CD16/CD56-PE; анти-CD45-PerCP-Cy5.5; анти-CD4-PE-Cy7; анти-CD19-APC; анти-CD8-APC-Cy7; BD, США), а также FoxP3+ Treg-лимфоцитов. Для окрашивания поверхностных маркеров FoxP3+ Treg-лимфоцитов использовали моноклональные антитела, меченные флуорохромами: анти-CD45-APC-Cy7; анти-CD4-FITC, анти-CD25-PE (BD Pharmingen, США). Затем клетки фиксировали, пермеабилизировали, и окрашивали антителами анти-FoxP3-AF647 (BD Pharmingen, США). В качестве ДНК-тропного красителя использовали 7-аминоактиномицин D (7-AAD).

Клетки собирали на проточной цитометре Amnis FlowSight (Cytek Biosciences, Fremont, США), оснащенном лазерами 488 нм и 642 нм, используя программное обеспечение INSIRE (Amnis Corporation, США). Светлопольные изображения собирали на канале 1. Регистрацию бокового светорассеяния производили с помощью лазера 785 нм. Анализ данных проводили в программе IDEAS 6.2.64.0 (Amnis Corporation, США). Выделяли субпопуляции CD4+CD25^hiFoxP3+ и CD4+CD25^lowFoxP3+Treg. Оценивали долю Treg в каждой субпопуляции с FoxP3, транслоцированным в ядро, с помощью мастера для анализа изображений клеток Nuclear Localization Wizard.

Статистическую обработку данных проводили с помощью программного обеспечения STATISTICA 10.0 (StatSoft, США). Для оценки характера распределения данных использовали критерий Шапиро-Уилка. Количественные данные представляли в виде медианы и межквартильного интервала (Me (Q1; Q3)). Категориальные данные представляли в виде абсолютных значений (n).  Для исследования значимости различий количественных данных применяли U-критерий Манна-Уитни. Ранговый коэффициент корреляции Спирмена (rs) использовали для оценки взаимосвязи между переменными. Значения p<0,05 считали статистически значимыми.

 

Результаты и обсуждение

Верхний квартиль индекса Gensini Score в общей выборке пациентов с ИБС составил 65,0 баллов. Мы разделили всех пациентов в зависимости от выраженности коронарного атеросклероза в соответствии с индексом Gensini Score: группа 1 – пациенты с Gensini Score<65 баллов; группа 2 – пациенты с Gensini Score ³65 баллов (наиболее выраженный и распространенный коронарный  атеросклероз). Группы пациентов были сопоставимы по полу, возрасту,  продолжительности ИБС, окружности талии, статусу курения, качеству контроля артериального давлению. Все пациенты принимали препараты статинов. Пациенты с Gensini Score³65 баллов характеризовались более высоким ИМТ по сравнению с пациентами с Gensini Score<65 баллов (Таблица 1).

Таблица 1

Базовые характеристики пациентов

Table 1

Basic characteristics of patients

Параметр Parameter	Gensini Score<65 баллов (n=15) Gensini Score<65 points (n=15)	Gensini Score³65 баллов (n=9) Gensini Score³65 points (n=9)	p
Пол (муж/жен), n Sex (male/female), n	12/3	9/0	0,266
Возраст, лет Age, years	65,0 (58,0; 67,0)	65,0 (55,0; 68,0)	0,953
Gensini Score, баллы Gensini Score, points	33,5 (9,0; 56,0)	77,5 (75,0; 100,0)	<0,001
Продолжительность ИБС, лет CAD duration, years	4,5 (1,0; 12,0)	8,5 (2,3; 12,5)	0,482
ИМТ, кг/м2 BMI, kg/m2	27,3 (24,7; 29,0)	30,5 (28,7; 32,4)	0,035
Окружность талии, см Waist circumference, cm	100,0 (96,5; 106,5)	106,0 (100,0; 111,0)	0,310
Курение, n Smoking, n	7	3	0,679
Систолическое АД, мм рт. ст. Systolic BP, mmHg	137,0 (125,0; 144,0)	125,0 (111,0; 133,0)	0,088
Диастолическое АД, мм рт. ст. Diastolic BP, mmHg	68,0 (65,0; 77,0)	70,0 (68,0; 73,0)	0,689
Прием статинов, n Statins intake, n	15	9	0,999

АД – артериальное давление; ИМТ – индекс массы тела; ИБС – ишемическая болезнь сердца

BP – blood pressure; BMI – body mass index; CAD – coronary artery disease

В общей группе мы выявили прямую корреляционную взаимосвязь между уровнем Gensini Score и долей CD4+CD25^lo Treg клеток с внутриядерной транслокацией FoxP3 в ЭЖТ (r_s=0,468; p=0,021). Относительное содержание CD4+CD25^hi Treg клеток с внутриядерной транслокацией FoxP3 в ТЖТ было обратно взаимосвязано со значением отношения окружности талии к окружности бедер (r_s=-0,474; p=0,041).

В группе с Gensini Score ³65 баллов пациенты характеризовались большим относительным содержанием CD4+CD25^lo Treg клеток в ЭЖТ с внутриядерной транслокацией FoxP3, а также имели тенденцию к снижению относительного содержания CD4+CD25^hi Treg клеток с внутриядерной транслокацией FoxP3 в ТЖТ (Таблица 2).

Таблица 2

Доля FoxP3+ Т-регуляторных лимфоцитов и уровень транслокации FoxP3 в ядро клеток в различных жировых депо пациентов с ИБС

Table 2

FoxP3+ T regulatory lymphocytes frequency and FoxP3 nuclear translocation in various fat depots of CAD patients

Параметр Parameter	Gensini Score<65 баллов (n=15) Gensini Score<65 points (n=15)	Gensini Score³65 баллов (n=9) Gensini Score³65 points (n=9)	p
ТЖТ CD25hiFoxP3+ Treg, % TAT CD25hiFoxP3+ Treg, %	7,5 (4,5; 13,9)	9,1 (6,5; 16,3)	0,482
ТЖТ CD25loFoxP3+ Treg, % TAT CD25loFoxP3+ Treg, %	3,2 (2,2; 6,7)	5,5 (3,9; 6,8)	0,411
ТЖТ ядр FoxP3 CD25hi Treg, % TAT nucl FoxP3 CD25hi Treg, %	34,3 (22,8; 51,4)	19,4 (14,9; 26,0)	0,084
ТЖТ ядр FoxP3 CD25lo Treg, % TAT nucl FoxP3 CD25lo Treg, %	23,1 (11,6; 38,8)	13,8 (5,8; 18,7)	0,138
ЭЖТ CD25hiFoxP3+ Treg, % EAT CD25hiFoxP3+ Treg, %	9,5 (4,2; 17,2)	8,9 (5,6; 22,3)	0,770
ЭЖТ CD25loFoxP3+ Treg, % EAT CD25loFoxP3+ Treg, %	3,0 (0,9; 11,0)	3,1 (2,2; 6,2)	0,999
ЭЖТ ядр FoxP3 CD25hi Treg, % EAT nucl FoxP3 CD25hi Treg, %	19,6 (0; 32,0)	16,7 (11,8; 22,1)	0,770
ЭЖТ ядр FoxP3 CD25lo Treg, % EAT nucl FoxP3 CD25lo Treg, %	11,0 (0; 26,1)	27,6 (20,0; 33,3)	0,014
ПЖТ CD25hiFoxP3+ Treg, % SAT CD25hiFoxP3+ Treg, %	13,1 (9,8; 20,0)	8,8 (4,5; 17,5)	0,411
ПЖТ CD25loFoxP3+ Treg, % SAT CD25loFoxP3+ Treg, %	4,6 (1,4; 10,5)	3,5 (1,8; 8,2)	0,999
ПЖТ ядр FoxP3 CD25hi Treg, % SAT nucl FoxP3 CD25hi Treg, %	15,8 (7,8; 33,0)	16,3 (0; 20,9)	0,640
ПЖТ ядр FoxP3 CD25lo Treg, % SAT nucl FoxP3 CD25lo Treg, %	16,4 (0; 24,5)	0 (0; 14,3)	0,411

ТЖТ – тимусная жировая ткань; ПЖТ – подкожная жировая ткань; ЭЖТ – эпикардиальная жировая ткань; ядр FoxP3 – доля клеток с FoxP3, локализованным в ядре; для субпопуляций Treg указана доля клеток от всех CD4+ Т-лимфоцитов; доля клеток с транслокацией FoxP3 в ядро указана от всех CD25^hi Treg или CD25^lo Treg.

TAT – thymic adipose tissue; SAT – subcutaneous adipose tissue; EAT – epicardial adipose tissue; nucl FoxP3 – frequency of cells with FoxP3, localized in nucleus; Treg frequency represents percentage of all CD4+ T lymphocytes; frequency of cells with FoxP3 nuclear translocation represents percentage of all CD25^hi Treg или CD25^lo Treg.

 

Кроме того, у пациентов с Gensini Score ³65 баллов мы выявили статистически значимо большее содержание CD8+ Т-лимфоцитов и NK-клеток и меньшее содержание двойных позитивных CD4+CD8+ Т-лимфоцитов в ТЖТ по сравнению с пациентами с Gensini Score<65 баллов  (Таблица 3).

Таблица 3

Субпопуляции лимфоцитов в различных жировых депо пациентов с ИБС

Table 3

Lymphocyte subsets in various fat depots of CAD patients

Параметр Parameter	Gensini Score<65 баллов (n=15) Gensini Score<65 points (n=15)	Gensini Score³65 баллов (n=9) Gensini Score³65 points (n=9)	p
ТЖТ CD4+ Т-лимфоциты, % TAT CD4+ Т lymphocytes, %	33,6 (30,5; 43,5)	29,6 (25,4; 31,6)	0,112
ТЖТ CD8+ Т-лимфоциты, % TAT CD8+ Т lymphocytes, %	19,5 (15,8; 27,2)	30,3 (29,9; 30,9)	0,029
ТЖТ CD4+CD8+ Т-лимфоциты, % TAT CD4+CD8+ Т lymphocytes, %	1,3 (0,7; 2,4)	0,3 (0,2; 0,6)	0,038
ТЖТ NK-клетки, % TAT NK cells, %	3,1 (1,8; 6,0)	14,2 (10,9; 16,7)	0,022
ТЖТ NKT-клетки, % TAT NKT cells, %	9,9 (4,7; 14,6)	10,9 (5,8; 18,9)	0,596
ТЖТ В-лимфоциты, % TAT B lymphocytes	5,7 (3,8; 8,5)	3,3 (2,6; 4,2)	0,316
ЭЖТ CD4+ Т-лимфоциты, % EAT CD4+ T lymphocytes	35,2 (31,0; 37,9)	31,2 (23,5; 39,8)	0,680
ЭЖТ CD8+ Т-лимфоциты, % EAT CD8+ T lymphocytes, %	26,8 (19,6; 28,4)	30,6 (22,7; 35,9)	0,517
ЭЖТ NK-клетки, % EAT NK cells, %	10,7 (6,6; 15,4)	10,1 (5,9; 12,9)	0,680
ЭЖТ NKT-клетки, % EAT NKT cells, %	13,0 (5,0; 13,4)	14,7 (6,4; 20,2)	0,596
ЭЖТ В-лимфоциты, % EAT B lymphocytes	4,8 (2,7; 11,1)	7,9 (4,2; 10,8)	0,680
ПЖТ CD4+ Т-лимфоциты, % SAT CD4+ T lymphocytes, %	32,8 (23,7; 32,9)	34,1 (32,7; 36,4)	0,216
ПЖТ CD8+ Т-лимфоциты, % SAT CD8+ T lymphocytes	16,3 (13,4; 20,5)	27,1 (18,6; 28,7)	0,216
ПЖТ NK-клетки, % SAT NK cells, %	21,5 (16,3; 26,1)	14,6 (10,8; 21,9)	0,215
ПЖТ NKT-клетки, % SAT NKT cells, %	14,4 (7,3; 17,3)	10,1 (6,7; 18,4)	0,723
ПЖТ В-лимфоциты, % SAT B lymphocytes, %	2,2 (1,3; 3,7)	1,9 (1,2; 2,3)	0,953

ТЖТ – тимусная жировая ткань; ПЖТ – подкожная жировая ткань; ЭЖТ – эпикардиальная жировая ткань; доля клеток указана от всех CD45+ лимфоцитов.

TAT – thymic adipose tissue; SAT – subcutaneous adipose tissue; EAT – epicardial adipose tissue; the frequency of cells is indicated as percentage of all CD45+ lymphocytes.

 

По данным корреляцонного анализа уровень ядерной транслокации FoxP3 в CD4+CD25^hi Treg клетках ТЖТ был обратно взаимосвязан с долей CD8+ Т-лимфоцитов (r_s=-0,653; p=0,012) и NK-клеток (r_s=-0,723; p=0,003) в ТЖТ, и прямо – с долей двойных позитивных CD4+CD8+ Т-лимфоцитов в ТЖТ (rs=0,567; p=0,034).

Ранее были получены сведения, что сохранность функциональной активности тимуса непосредственно взаимосвязана с тяжестью коронарного атеросклероза. Отчасти это можно объяснить нарушением негативной селекции в тимусе и выходу аутореактивных клонов Т-лимфоцитов, способных распознавать молекулу ApoB [6]. При этом была также показана тесная взаимосвязь между состоянием тимуса и метаболической дисфункцией: полная жировая дегенерация тимуса ассоциировалась с мужским полом, более высоким ИМТ, дислипидемией и артериальной гипертензией [12].

На наш взгляд, присутствие меньшего количества двойных позитивных CD4+CD8+ Т-лимфоцитов в ТЖТ при более выраженном коронарном атеросклерозе, может отражать более выраженное угасание тимопоэза у пациентов с ИБС, и может находиться в непосредственной взаимосвязи с функциональной активностью Treg-лимфоцитов. Помимо тимуса, присутствие двойных позитивных CD4+CD8+ лимфоцитов было показано в жировой ткани средостения и дуге аорты [14]. Остается открытым вопрос, способны ли CD4+CD8+ лимфоциты мигрировать из жировой ткани в стенки сосуда, и какую функцию они там могут выполнять.

Для CD8+ Т-лимфоцитов жировой ткани, в свою очередь, была показана способность к переключению фенотипа макрофагов на провоспалительный М1-фенотип и поддержанию воспаления в жировой ткани [8]. Схожую функцию, по-видимому, могут выполнять и NK-клетки жировой ткани [5]. Мы показали взаимосвязь этих клеточных популяций, расположенных в ТЖТ, с развитием выраженного атеросклеротического поражения коронарных артерий у пациентов с ИБС, и их ассоциацию с уровнем ядерной транслокации FoxP3 в Treg-лимфоцитах.

В соответствие с нашими данными, Treg-лимфоциты в ЭЖТ, непосредственно прилегающей к ткани миокарда, при наиболее выраженном коронарном атеросклерозе находятся в активированном состоянии, так как уровень транслокации FoxP3 в их ядро был выше. Учитывая способность Treg-лимфоцитов к рециркуляции в тимус из периферических органов и систем [1], нельзя исключить, что субпопуляции ТЖТ и ЭЖТ Treg-лимфоцитов взаимосвязаны между собой, а Treg из ЭЖТ при возвращении в тимус, могут подавлять генерацию Treg de novo и приводить к угнетению аутотолерантности. ЭЖТ даже в физиологических условиях характеризуется более выраженной экспрессией генов, контролирующих развитие воспаления, и снижением регуляции со стороны генов, контролирующих пролиферацию и катаболизм, по сравнению с ПЖТ. Нельзя исключить, что в условиях ишемии, адипоциты, взаимодействуя напрямую с кардиомиоцитами и стромальными клетками миокарда, могут получать дополнительные паракринные сигналы, способствующие прогрессированию воспаления [11]. Природа данных сигналов и место Treg-лимфоцитов в регуляции данных процессов требует дальнейшего изучения.

Заключение. Таким образом, мы показали, что у пациентов с хронической ИБС уровень транслокации FoxP3 в ядро в эпикардиальной жировой ткани в CD4+CD25^lo Treg-клетках прямо связан с выраженностью атеросклероза, в то время как в тимусной жировой ткани имеется тенденция к наличию обратной взаимосвязи между выраженностью атеросклероза и уровнем транслокации FoxP3 в ядро в CD4+CD25^hi Treg-клетках. В жировой ткани тимуса уровень ядерной транслокации FoxP3 в CD4+CD25^hi Treg-клетках имеет ассоциацию с антропометрическими показателями ожирения и изменением субпопуляционного состава лимфоцитов. Требуется проведение дальнейших исследований для изучения молекулярных механизмов реализации данных взаимосвязей и определения места данного патофизиологического феномена в стратификации риска и разработке подходов к терапии пациентов с коронарным атеросклерозом и хронической ИБС.

Благодарности. Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 23-25-00010).

About the authors

Irina Kologrivova

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

Email: ikologrivova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4537-0008
SPIN-code: 6987-2021

Cand. Sci. (Med.), Senior Research Fellow, Department of Clinical Laboratory Diagnostics

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya, 111 A

Alexey A. Dmitriukov

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

Email: aldmn9k@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6924-966X

Junior Research Fellow, Department of Clinical  Laboratory Diagnostics

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya, 111 A

Natalia V. Naryzhnaya

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

Email: natalynar@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-2264-1928

M.D., Ph.D., Dr. Sci. (Med.), Leading Research Fellow, Laboratory of Experimental Cardiology

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya, 111 A

Olga A. Koshelskaya

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Author for correspondence.
Email: koshel@live.ru
ORCID iD: 0000-0002-6679-1269

M.D., Ph.D., Prof., the Leading Research Fellow of the Department of Atherosclerosis and Coronary Artery Disease

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

Olga A. Kharitonova

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Email: hoa@cardio-tomsk.ru
ORCID iD: 0000-0001-6278-1744

Junior Research Fellow, Department of Atherosclerosis and Coronary Artery Disease

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

Alexandra I. Vyrostkova

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Email: alexandra.vy20@gmail.com
ORCID iD: 0009-0000-7865-6948

Research Laboratory Assistant, Department of Clinical  Laboratory Diagnostics

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

Vladimir V. Evtushenko

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Email: evtushenko.vladimir@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5537-0864

M.D., Ph.D., Dr. Sci. (Med.), Doctor of the Department of Cardiovascular Surgery

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

Anastasia S. Krapivina

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Email: ya.anastasiya.krapivina99@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-6850-182X

Research Laboratory Assistant, Department of Atherosclerosis and Coronary Artery Disease

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

Polina E. Riabchenko

The Siberian State Medical University

Email: ryabchenkomail.ru@gmail.com
ORCID iD: 0009-0000-7255-1053

Student

Russian Federation, 634050, Tomsk, Moskovskii trakt, 2

Tatiana E. Suslova

Cardiology Research Institute, Tomsk National Research Medical Centre, Russian Academy of Sciences

Email: tes@cardio-tomsk.ru
ORCID iD: 0000-0001-9645-6720

Cand. Sci. (Med.), Head of the Department, Department of Clinical Laboratory Diagnostics

Russian Federation, 634012, Tomsk, Kievskaya 111 A

References

Supplementary files