Immunity in chronic rhinosinusitis and comorbid conditions

Full Text

Введение

Хронический риносинусит (ХРС) является самой распространенной болезнью в оториноларингологии. Симптомы заболевания выявляются у 15,5% и более пациентов, обратившихся за медицинской помощью [2]. Ежегодно количество больных с ХРС увеличивается. Кроме того, тенденция последних нескольких лет показывает рост заболеваемости синуситами, а количество госпитализированных из-за патологии околоносовых пазух составляет примерно 2/3 от общего числа пациентов специализированных стационаров [3, 4]. Патологические изменения в слизистой оболочке полости носа дополняются изменениями пазух, что совокупно ответственно за появление ХРС [5, 6, 9]. Согласно современным классификациям, выделяют хронический полипозный риносинусит и риносинусит без полипов, к которым относятся гиперпластический, вазомоторный, инфекционный, атрофический и инфекционный риносинусит.

Хронический риносинусит считается многофакторным заболеванием, так как имеется более десятка этиологических факторов в возникновении данного заболевания. В основе патогенеза ХРС лежит инфицирование слизистой оболочки полости носа и пазух инфекционными агентами с развитием воспаления и локальной и системной активацией клеток иммунной системы [10]. Существует точка зрения, что хронизация воспалительной реакции при ХРС зависит не только от специфического влияния бактерий и респираторных вирусов, но и от индивидуальных различий ответа макроорганизма на агенты.

Неправильное функционирование системы врожденного иммунитета слизистой оболочки носа и околоносовых пазух, нарушение мукоцилиарного клиренса приводит к тому, что не осуществляется иммунная элиминация инфекционных агентов, формируется повышенная восприимчивость к вирусным и бактериальным инфекциям верхних дыхательных путей, что ответственно за персистенцию воспалительного процесса [1]. Одними из важнейших компонентов иммунного ответа являются мультифункциональные лимфоциты – натуральные киллеры (NK). При их активации посредством экзоцитоза цитотоксических гранул осуществляется лизис пораженных клеток. Одновременно они синтезируют провоспалительные цитокины: интерферон-ã (IFNã) и фактор некроза опухоли. В исследовании, проведенном в Южной Корее, у больных с хроническим риносинуситом выявлены дефекты функционирования NK с сильными обратными корреляциями между эозинофилией периферической крови и дисфункцией NK при нарушении экзоцитоза гранул и экспрессии IFNã [8]. Кроме того, при хроническом риносинусите нарушен NK-индуцируемый апоптоз эозинофилов, что увеличивает продолжительность их жизни и способствует персистенции эозинофильного воспаления слизистой оболочки околоносовых пазух [7].

ХРС может быть изолированным заболеванием или частью коморбидного состояния. Искривление носовой перегородки способствует развитию заболевания, из-за анатомического дефекта нарушается мукоцилиарный клиренс, развивается задержка слизи с патогенными микроорганизмами, которые вызывают воспаление слизистой оболочки. Одним из коморбидных состояний является сочетание хронического ринита и хронического риносинусита, когда одновременно выявляются клинические симптомы поражения носовой полости и околоносовых пазух. Кроме того, ХРС может быть частью аспириновой триады, где непереносимость НПВС сочетается с ХРС и бронхиальной астмой. При всех коморбидных состояниях ХРС важна роль клеточного и гуморального иммунитета в клиническом течении и прогрессировании.

В связи с этим целью нашего исследования явилось изучение клеточного и гуморального звеньев иммунитета при ХРС и коморбидных состояний.

Материалы и методы

Исследование проведено в Научно-исследовательском институте медицинских проблем Севера – обособленном подразделении ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр “Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук”». Объектом исследования являлись больные с хроническими риносинуситами, госпитализированные в ЛОР-отделение клиники института и отобранные методом сплошной выборки.

Основными критериями включения пациентов в исследование было наличие жалоб на частые в течение года, длительные выделения из полости носа, сопровождающиеся болями, дискомфортом, чувством давления или распирания в области околоносовых пазух, диагноз верифицировался согласно клиническим рекомендациям МЗ (2022). Из исследования были исключены пациенты, имеющие инфекционные и острые заболевания других органов и систем, обострение и декомпенсацию хронических сопутствующих соматических заболеваний и отказавшиеся принять участие в изучении.

Комплекс клинических методов исследования включал сбор жалоб, анамнеза, данных объективного осмотра ЛОР-органов, результатов рентгенологического исследования и компьютерной томографии околоносовых пазух. При оториноларингологическом исследовании учитывались все имеющиеся на момент осмотра у обследованных лиц острые и хронические заболевания уха, горла и носа. Шифровка диагнозов осуществлялась по статистической классификации болезней, травм и причин смерти (МКБ-10).

Всего был отобран 91 пациент с хроническим риносинуситом (48,7±3,9 года), из них пациенты с изолированным хроническим риносинуситом (ХРС) составили 30 человек (43,7±3,3 года), с хроническим риносинуситом и искривлением носовой перегородки (ХРС и ИНП) – 25 человек (45,7±4,3 года), с хроническим риносинуситом и хроническим ринитом (ХРС и ХР) составили 19 человек (44,7±3,3 года), с хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой (ХРС и БА) составили 17 человек (47,7±4,2 года). Контрольную группу составили 35 практически здоровых донора крови (46,7±3,5 года) сопоставимых по полу и возрасту с исследуемыми группами, проходивших плановое обследование в клиники института.

Для изучения системного клеточного иммунитета в венозной крови применялся метод проточной цитометрии на проточном цитофлуориметре Cytomics FC500 (Beckman Coulter, США). Для окрашивания лимфоцитов использовались моноклональные антитела (МАТ): CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺, CD16⁺, CD19⁺, фирмы Beckman Coulter (США).

По результатам исследования на персональном компьютере в пакете электронных таблиц MS Excel 2010 была сформирована база данных. Статистическая обработка данных проводилась с помощью пакетов прикладных программ Statistica for Windows 8.0 (StatSoft Inc., США, 2008) и Microsoft Excel, 2007 (Microsoft, США). Обработка полученных данных включала подсчет непараметрических данных: медиану (Me) и персинтили (Q_0,25-Q_o,75). Статистическую значимость различий определяли с использованием рангового критерия Манна–Уитни. Критический уровень значимости при проверки статистических гипотез принимался равным р < 0,05.

Результаты и обсуждение

Клеточное звено иммунитета является одним из важнейших компонентов защиты организма. Нами было получено снижение относительного количества CD4⁺ клеток в группах пациентов с ХРС, хроническим риносинуситом и хроническим ринитом, хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой (p_1-2 = 0,04, p_1-4 = 0,043, p_1-5 = 0,04) (табл. 1). Абсолютное количество CD4⁺ клеток повышалось относительно всех исследуемых групп у пациентов с хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой (p_1-5 = 0,034; p_2-5 = 0,04; p_3-5 = 0,045; p_4-5 = 0,02). При исследовании CD8⁺ клеток было обнаружено снижение данных клеток у пациентов с хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой по сравнению с группой больных хроническим риносинуситом и контрольной группой (p_1-5 = 0,04; p_2-5 = 0,04). Абсолютное содержание CD19⁺ клеток было повышено во всех исследуемых группах относительно контрольной группы (p_1-2 = 0,03, p_1-2 = 0,03, p_1-4 = 0,03, p_1-2 = 0,03).

 

Таблица 1.Показатели Т-лимфоцитов у больных при хроническом риносинусите и в коморбидных состояниях (Ме, Q_0,25-Q_0,75, р_m-u)

Table 1. Indicators of T lymphocytes in patients with chronic rhinosinusitis and in comorbid conditions (Me, Q_0.25-Q_0.75, р_m-u)

Показатели Indicators	Контрольная группа Control group n = 35 (1)		ХРС CR n = 30 (2)		ХРС + ИНП CR + DNS n = 25 (3)		ХРС + ХР CR + CR n = 19 (4)		ХРС + БА CR + BA n = 17 (5)
	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75
Лейкоциты, 109/л Leukocytes, 109/L	5,73	4,85-7,75	6,78	5,8-8,3	5,3	4,4-6,2	7,4	3,5-10,6	7,2	3,3-11,1
Лимфоциты, % Lymphocytes, %	31,0	29,8-45,0	43,0	34,0-46,1	30	22-43	29,2	19,3-49,4	28,1	20,3-47,6
Лимфоциты, 109/л Lymphocytes, 109/L	1,78	1,61-2,83	2,9	1,90-3,82	1,9	1,3 -2,6	1,8	1,4-3,5	1,9	1,3-3,9
CD3+,%	67,0	60,0-72,0	63,1	56,2-70,3	64,2	58,4-70,2	62,5	54,3-69,7	61,2	54,1-68,4
CD3+, 109/л CD3+, 109/L	1,19	1,01-1,88	1,68	1,07-2,79	0,9	0,6-1,4	1,6	0,6-1,8	1,3	0,8-1,6
CD4+, %	44,0	34,0-49,0	35,2	29,3-40,3	37,1	30,2-42,3	35,1	30,9-41,5	35,9	29,5-42,1
			p1-2 = 0,04				p1-4 = 0,043		p1-5 = 0,04
CD4+, 109/л CD4+, 109/L	0,78	0,55-1,27	0,9	0,57-2,79	0,63	0,4-0,9	1,01	0,3-1,4	1,9	1,2-2,4
									p1-5 = 0,034; p2-5 = 0,04; p3-5 = 0,045; p4-5 = 0,02
CD8+, %	27,0	20,0-34,0	28,1	23,5-32,5	26,5	23,2-32,1	27,7	22,3-30,6	27,8	22,7-31,2
CD8+, 109/л CD8+, 109/L	0,48	0,38-0,89	0,82	0,48-1,40	0,47	0,3-0,8	0,5	0,2-0,8	0,38	0,33-0,72
									p2-5 = 0,04
CD16+, %	21,2	15,4-28,5	20,1	15,4-24,6	20,1	15,3-24,1	19,1	14,5-24,2	19,5	13,9-25,5
CD16+, 109/л CD16+, 109/L	0,36	0,31-0,60	0,5	0,30-0,97	0,4	0,2-0,6	0,4	0,2-0,8	0,5	0,3-0,9
CD19+, %	13,5	9-16	18,4	12,5-21,5	17,4	12,2-20,8	18,1	14,1-22,6	18,6	16,7-22,3
CD19+, 109/л CD19+, 109/L	0,27	0,18-0,38	0,4	0,23-0,56	0,36	0,2-0,49	0,4	0,29-0,6	0,5	0,40-0,63
			p1-2 = 0,03		p1-2 = 0,03		p1-4 = 0,03		p1-2 = 0,03

Примечание. p_1-2 – статистически значимые различия между группой больных ХРС и контрольной группой; p_1-3 – статистически значимые различия между группой больных ХРС + ИНП и контрольной группой; p_1-4 – статистически значимые различия между группой больных ХРС + ХР и контрольной группой; p_1-5 – статистически значимые различия между группой больных ХРС + БА и контрольной группой; p_2-3 – статистически значимые различия между группой больных ХРС и группой больных ХРС + ИНП; p_2-4 – статистически значимые различия между группой больных ХРС и группой больных ХРС + ХР; p_2-5 – статистически значимые различия между группой больных ХРС и группой больных ХРС + БАp_3-5 – статистически значимые различия между группой больных ХРС + ИНП и группой больных ХРС + БА; p_4-5 – статистически значимые различия между группой больных ХРС + ХР и группой больных ХРС + БА.

Note. p_1-2, statistically significant differences between the group of patients with CR and the control group; p_1-3, statistically significant differences between the group of patients with CR + DNS and the control group; p_1-4, statistically significant differences between the group of patients with CR + CR and the control group; p_1-5, statistically significant differences between the group of patients with CR + BA and the control group; p_2-3, statistically significant differences between the group of patients with CR and the group of patients with CR + DNS; p_2-4, statistically significant differences between the group of patients with CR and the group of patients with CR + CR; p_2-5, statistically significant differences between the group of patients with CR and the group of patients with CRS + BA; p_3-5, statistically significant differences between the group of patients with CR + DNS and the group of patients with CR + BA; p_4-5, statistically significant differences between the group of patients with CR+CR and the group of patients with CR + BA.

 

Для характеристики гуморального звена иммунитета в исследуемых группах нами была произведена оценка следующих параметров: IgA, IgM, IgG, IgE. У пациентов с хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой происходило повышение концентрации IgA по сравнению с контрольной группой (p_1-5 = 0,03) (табл. 2). При исследовании концентрации IgE было обнаружено повышение данного иммуноглобулина у пациентов, страдающих хроническим риносинуситом и хроническим риносинуситом и бронхиальной астмой по сравнению с контрольной группой (p_1-2 < 0,001, p_1-5 < 0,001). Дополнительно, всем лицам, входившим в исследование, производили оценку относительного синтеза IgA (IgA/ CD19⁺), IgM (Ig М/CD19⁺) и IgG (IgG/CD19⁺). Во всех группах пациентов отмечалось снижение относительного синтеза IgA по сравнению с контрольной группой (p_1-2 < 0,001, p_1-3 < 0,001, p_1-4 < 0,001, p_1-5 < 0,001). При исследовании относительного синтеза IgM было выявлено снижение данного показателя у пациентов с хроническим риносинуситом относительно всех исследуемых и контрольной групп (p_1-2 < 0,001, p_2-3 < 0,001, p_2-4 < 0,001, p_2-5 < 0,001). Во всех группах пациентов происходило снижение относительного синтеза IgG относительно контрольной группы (p_1-2 < 0,001, p_1-3 < 0,001, p_1-4 = 0,03, p_1-5 = 0,03).

 

Таблица 2. Показатели гуморального звена иммунитета у больных при хроническом риносинусите и в коморбидных состояниях (Ме, Q_0,25-Q_0,75, р_m-u)

Table 2. Indicators of humoral immunity in patients with chronic rhinosinusitis and comorbid conditions (Me, Q_0.25-Q_0.75, р_m-u)

Показатели Indicators	Контрольная группа Control group n = 35 (1)		ХРС CR n = 30 (2)		ХРС + ИНП CR + DNS n = 25 (3)		ХРС + ХР CR + CR n = 19 (4)		ХРС + БА CR + BA n = 17 (5)
	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75	Ме	Q0,25-Q0,75
IgA, г/л IgA, g/L	1,91	1,33-3,20	2,3	1,2-3,2n	1,9	0,9-3,1	2,2	1,5-3,7	2,5	1,1-3,4
									p1-5 = 0,03
IgM, г/л IgM, g/L	1,20	0,50-1,80	1,4	1,1-1,9	1,5	1-2	1,4	1,1-1,9	1,6	1,2-2,1
IgG, г/л IgG, g/L	10,30	8,18-14,12	10,4	5,8-14,3	11,2	6,2-14,4	12,5	7,6-14,4	12,1	6,7-15,2
IgE, МЕ/мл IgE, IU/mL	67,4	35,2-97,6	94,1	30,3-198,6	68,1	34,1-240,3	75,3	42-98,6	101,3	33,5-240,3
			p1-2 < 0,001						p1-5 < 0,001
IgA/CD19+	7,38	7,07-8,2	4,9	3,9-7,03	4,9	3,9-7,03	5,4	3,0-6,2	4,5	3,6-7,0
			p1-2 < 0,001		p1-3 < 0,001		p1-4 < 0,001		p1-5 < 0,001
IgM/CD19+	4,4	2,7-4,61	1,9	0,8-3,6	3,9	3,8-6,6	4,01	3,3-4,2	4,8	4,3-5,5
			p1-2 < 0,001		p2-3 < 0,001		p2-4 < 0,001		p2-5 < 0,001
IgG/CD19+	42,9	36,2-45,4	10,3	7,21-26,6	14,33	14,21-26,6	28,7	25,3-35,3	29,3	27-39
			p1-2 < 0,001		p1-3 < 0,001		p1-4 = 0,03		p1-5 = 0,03

Примечание. См. примечание к таблице 1.

Note. As for Table 1.

 

Были выявлены изменения в клеточном и гуморальном звеньях иммунитета при ХРС и его коморбидных состояниях: при ХРС и искривлении носовой перегородки – 4; при ХРС и хронического ринита – 5; при ХРС – 6; при ХРС и бронхиальной астмой – 9. При ХРС и искривлении носовой перегородки выявлялись изменения в виде увеличения абсолютного содержания В-лимфоцитов и снижения 3 индексов относительного синтеза. При ХРС и хронического ринита обнаружено увеличение абсолютного содержания В-лимфоцитов и снижения относительного количества Т-хелперов и 3 индексов относительного синтеза. При ХРС выявлялось увеличение содержания В-лимфоцитов и IgE (но значение было ниже 100 МЕ/мл), снижение относительного количества Т-хелперов и 3 индексов относительного синтеза. При ХРС и бронхиальной астмой имелось увеличение абсолютного содержания Т-хелперов, В-лимфоцитов, гипергаммаглобулинемия по классам А и Е (более 100 МЕ/ мл) и снижение относительного количества Т-хелперов, абсолютного числа цитотоксических Т-лимфоцитов и 3 индексов относительного синтеза.

Заключение

Не было выявлено зависимости ХРС и его коморбидных состояний от количества нарушений клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Меньше всего нарушений выявлено при сочетании ХРС и искривления носовой перегородки, больше при сочетании ХРС и БА, что безусловно обусловлено тяжестью самой бронхиальной астмы. У всех пациентов ХРС независимо от коморбидности увеличено количество В-лимфоцитов и снижены индексы относительного синтеза, что доказывает первопричиной развития заболевания контакт с бактериальным агентом. Выявлено нарушение в содержании Т-хелперов, выраженная дизрегуляция обнаружена при сочетании ХРС и БА (разнонаправленные изменения в абсолютных и относительных показателях). Не было выявлено изменений в NK-клетках.

About the authors

O. V. Smirnova

Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences

Author for correspondence.
Email: ovsmirnova71@mail.ru

PhD, MD (Medicine) Professor, Head, Laboratory of Clinical Pathophysiology

Russian Federation, Krasnoyarsk

A. A. Sinyakov

Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk Research Center, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences

Email: ovsmirnova71@mail.ru

PhD (Biology), Senior Research Associate, Laboratory of Clinical Pathophysiology

Russian Federation, Krasnoyarsk

References

Supplementary files