Том 22, № 1 (2019)

В отдалённые сроки после хронического радиационного воздействия с преимущественным облучением красного костного мозга (средняя доза облучения – 0,89±0,09 Гр, диапазон индивидуальных значений: 0,09–1,96 Гр) у лиц с повышенным уровнем TCR-мутантных Т-лимфоцитов отмечено дозозависимое повышение содержания в периферической крови СD3⁺СD16⁺CD56⁺- лимфоцитов, увеличение лизосомальной активности нейтрофилов, уровней сывороточного IL-1α, интенсивности некроза лимфоцитов и снижение содержания IL-2 и CSF-GM в сыворотке крови. Проведённый анализ показал, что отмеченные изменения следует рассматривать как ответ на повышение частоты мутаций (в т. ч. TCR-мутаций) в облучённых клетках. 

Трансплантация гемопоэтических клеток (ТГСК) от родственного или неродственного донора применяется при терапии опухолей кроветворной системы. Однако, при трансплантации развивается иммунный ответ клеток донора на антигены реципиента. Ответ на здоровые ткани называется реакцией «трансплантат против хозяина» (РТПХ), а ответ на гемопоэтическую ткань в контексте гемобластоза, называется реакцией «трансплантат против опухоли» (РТПО). Развитие РТПО является благоприятным последствием трансплантации, поскольку данная реакция элиминирует остаточные опухолевые клетки и предотвращает рецидив. Было показано, что иммунный ответ возникает на полиморфные пептиды, презентируемые в составе молекул главного комплекса гистосовместимости (HLA). Такие пептиды являются результатом протеасомной деградации белков, кодируемых генами, содержащими несинонимичные однонуклеотидные полиморфизмы, и называются минорными антигенами гистосовместимости (МАГ). Изучение структуры репертуаров Т клеточных рецепторов (ТКР), распознающих МАГ, может помочь в идентификации механизмов формирования аллореактивного ответа и является важным для предсказания антигена аллореактивных клонов с неустановленной специфичностью. В данной статье были определены и проанализированы in silico генетические последовательности, кодирующие Т-клеточные рецепторы, специфичные к минорному антигену HA-2. Нами было обнаружено преимущественное использование V21 и J42 сегментов α-цепи при формировании CDR3 участка и присутствие V7-8 сегмента в большинстве CDR3 участков β-цепи, что указывает на существование консервативного мотива, ответственного за распознавание антигена HA-2.

Нейтрофильные гранулоциты (НГ) с различной рецепторной оснащенностью, представляют собой гетерогенные субпопуляции отличающиеся по своим биологическим свойствам и роли в патогенезе иммунозависимых заболеваний. В результате исследований нами получены новые данные о фенотипических особенностях субпопуляций НГ, несущих молекулы CD64, CD32, CD16 и CD11b, характерных для новорожденных и детей по сравнению с группой условно-здоровых взрослых субъектов. Установлено, что в периферической крови здоровых доношенных новорожденных, услов ноздо ровых детей разных возрастных групп и взрослых циркулируют две основные субпопуляции НГ – мажорная с фенотипом СD64–CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ и минорная СD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ с разной плотностью экспрессии рецепторов. Показано, что для каждой из исследуемых групп характерен свой фенотипический профиль, возможно оптимальный, для выполнения НГ эффекторных функций. Так у новорожденных определены субпопуляции с фенотипами СD64–CD16^dimCD32^dimCD11^bbrightНГ и СD64^dimCD16^midCD32^brightCD11^bbrightНГ; у детей 2–4 лет СD64–CD16^brightCD32^dimCD11^bbrightНГ и СD64^midCD16^brightCD32^dimCD11^bbrightНГ; у детей 5–9 лет СD64–CD16^midCD32^dimCD11^bdimНГ и СD64^dim CD16^brightCD32^midCD11^bdimНГ и у группы здоровых взрослых СD64–CD16^midCD32^dimCD11^bdimНГ и СD64^brightCD16^dimCD32^midCD11^bdimНГ. Установлено, что НГ новорожденных и детей разных возрастных групп имеют схожую плотность экспрессии рецепторов СD64, CD16, CD32, CD11b на мажорной и минорная субпопуляциях, в то время как субпопуляции НГ здоровых взрослых оснащены по-разному. Изучение рецепторов при физиологических состояниях с учетом возрастных особенностей, необходимо для правильной интерпретации трансформации фенотипа, изменения поверхностной экспрессии при различных патологических состояниях. 

Цель исследования: поиск статистически значимых популяций Т-клеток при постановке диагноза рассеянный склероз (РС). С применением многоцветной проточной цитометрии был проведен анализ абсолютного содержания различных субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперов, Тх и цитотоксических Т-клеток, Тцит) в периферической крови 61-го условно здорового добровольца и 47-ми больных РС. На основании экспрессии маркеров дифференцировки (CD45RA, CD62L, CD27 и CD28) и эффекторных молекул (CD56 и CD57) Тх и Тцит были разделены на основные популяции, находящиеся на разных стадиях созревания. Выявлены следующие статистически значимые популяции Т-клеток: CD56⁻CD57⁺ T-лимфоциты, EM Тх, EM3 Тцит, EM Тцит, CD56⁺CD57⁻ Т-лимфоциты, EM2 Тцит. Значимость также была подтверждена при расчете статистики Хи-квадрат. На основе полученной информации было выбрано три группы популяций Т-клеток. На каждой группе популяций была построена модель для диагностики рассеянного склероза на базе алгоритма k ближайших соседей. Точность предсказания построенных моделей варьируется в пределах 0.69–0.90. 

Для изучения механизма действия пептидного миметика мурамилпептида GMDP RN оценивалось его влияние на уровень экспрессии мРНК провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α и молекул, принимающих участие в активации NF-kB сигнального пути, в клетках линии лейкемических моноцитов человека ТНР-1. Для сравнения были использованы собственно GMDP и два его аналога с хорошо охарактеризованной биологической активностью – GMDP-кислота и GMDP-Lys. Все соединения демонстрировали значительные отличия в ходе развития иммунного ответа: наиболее сильным стимулятором иммунного ответа оказался GMDP-Lys; GMDPкислота в большей степени усиливала экспрессию субъединицы р100/р52 (NF-kB2) и в меньшей степени экспрессию IL-1β по сравнению с GMDP; особенностями пептида RN являлись низкий уровень продукции IL-1β и стимуляция адапторного белка RIP2 для рецептора NOD2 врождённого иммунитета. Все исследованные соединения являются ценными инструментами для поиска новых способов коррекции иммунного ответа.