Том 25, № 4 (2022)

В настоящее время ведется большое число разработок, основанных на наноразмерных системах, для доставки лекарственных средств. Одной из таких систем могут служить наноразмерные кавитанды кукурбитурилы, которые благодаря наличию полости способны включать в себя молекулы лекарственного средства. Поскольку иммунная система довольно чувствительна к влиянию наноматериалов и иных повреждающих факторов, необходимо исследование иммунобезопасности новых систем доставки.

Целью данного исследования было исследование влияния наноразмерных кавитандов кукурбитурилов на цитокинпродуцирующую способность мононуклеарных клеток периферической крови условно здоровых доноров.

Мононуклеарные клетки (1 млн/мл) культивировали в присутствии кукурбитурилов в следующих концентрациях: 0,3 мМ кукурбит[6]урила, 0,3 мМ кукурбит[7]урила и 0,01 мМ кукурбит[8]урила в течение 72 ч с дополнительной стимуляцией с помощью аCD3-антител (1 мкг/мл) и без стимуляции. Уровень цитокинов в супернатантах определялся с помощью иммуноферментого анализа.

Было показано, что кукурбит[6]урил в 1,5 раза повышал уровень спонтанной продукции IL-4 (p < 0,01) по сравнению с контролем. В случае оценки стимулированной продукции нами было обнаружено, что кукурбит[6]урил снижает уровень продукции IL-6, а также демонстрирует тенденцию (p = 0,09) к повышению уровня IL-4.

При культивировании клеток с кукурбит[7]урилом была обнаружена тенденция по увеличению продукции провоспалительного TNF. Также было обнаружено, что кукурбит[7]урил способен подавлять продукцию IL-10 в стимулированной aCD3-антителами культуре МНК в 1,5 раза.

В то же время кукурбит[8]урил снижал уровень IFNγ и IL-10 по сравнению с продукцией данных цитокинов в контрольной культуре. В случае оценки влияния кукурбит[8]урила на продукцию IFNγ стимулированными анти-CD3 антителами МНК, достоверных различий не было обнаружено, но также имеется тенденция по снижению концентрации данного цитокина по сравнению с контролем.

Следовательно, кукурбитурилы способны влиять как на спонтанную, так и на стимулированную продукцию цитокинов мононуклеарными клетками крови, и направленность действия на цитокинпродуцирующую способность клеток зависит от рассматриваемого гомолога.

Ассоциация носительства инфекции Helicobacter pylori с патологией желудочно-кишечного тракта является одной из наиболее распространенных проблем современной медицины. В литературе имеются противоречивые данные о роли инфекции Helicobacter pylori в формировании аллергических заболеваний и ее влиянии на течение гастроинтестинальных проявлений аллергии. Убедительных доказательств о роли Helicobacter pylori в этиопатогенезе аллергических заболеваний в настоящее время не существует. Таким образом, изучение гастроинтестинальных проявлений аллергии с учетом наличия инфекции Helicobacter pylori является актуальным. Цель исследования – изучить особенности спектра сенсибилизации и клинического течения гастроинтестинальных проявлений аллергии на фоне инфекции Helicobacter pylori у детей.

Проведен ретроспективный анализ историй болезни детей с гастроинтестинальными проявлениями аллергии (n = 29) в возрасте от 1 до 18 лет (средний возраст 11±0,7 лет), проживающих на территории Восточной Сибири. Наличие инфекции Helicobacter pylori определяли методом иммуноферментного анализа (измерение концентрации суммарных антител к антигену CagA Helicobacter pylori). В зависимости от наличия носительства инфекции Helicobacter pylori выделены 2 группы: НР- инфицированные (n = 8) и НР-неинфицированные (n = 21). Спектр сенсибилизации определяли путем изучения данных кожного prick-тестирования с неинфекционными аллергенами. Состояние желудочно-кишечного тракта оценивали по результатам анамнеза, жалоб, объективного обследования и данных эзофагогастродуоденоскопии.

Определено, что гастроинтестинальные проявления аллергии в большинстве случаев сочетались с дерматореспираторным синдромом – в 41,3% случаев. Частота встречаемости инфекции Helicobacter pylori у больных с гастроинтестинальными проявлениями аллергии – 27,5% случаев. В структуре гастроинтестинальных проявлений аллергии наиболее часто определены воспалительные заболевания пищевода, желудка, кишечника в виде гастроэзофагиального рефлюкса, гастрита, дуоденита. В группе НР-инфицированных детей статистически значимо чаще определена недостаточность кардии. В группе НР-неинфицированных детей чаще определены эзофагит, бульбит, эрозивные поражения желудка и двенадцатиперстной кишки, однако данные статистической значимости не достигли. Спектр сенсибилизации больных с гастроинтестинальными проявлениями аллергии имеет особенности в зависимости от наличия HP-инфекции. Так, в группе НР-инфицированных детей статистически значимо чаще определена сенсибилизация к березе и миксту луговых трав. В группе НР- неинфицированных детей чаще выявлена сенсибилизация к домашней пыли, шерсти кошки, шерсти собаки. Таким образом, при обследовании детей с гастроинтестинальными проявлениями аллергии необходимо исключить наличие инфекции Helicobacter pylori, которая может модифицировать течение истинной аллергической патологии.

Ревматоидный артрит (РА) на сегодняшний день является одним из самых распространенным аутоиммунным заболеванием в мире, которое связано с прогрессирующей инвалидизацией, системным поражением органов и тканей, а также социально-экономическими издержками для государства. Актуальным и научно значимым представляется изучение роли врожденных лимфоидных клеток (ILC) в развитии аутоиммунного воспаления при РА, в особенности роли пластичности данных клеток. ILC представляют собой резидентные в тканях врожденные лимфоидные клетки, которые имеют функциональное разнообразие, сходное с Т-клетками, а также ILC регулируют направленность иммунного ответа с помощью продукции цитокинов. В небольшом количестве ILC присутствуют в кровеносном русле, предположительно для миграции в целевые органы и ткани. Соответственно, изучение ILC при РА позволит расширить представление о патегенезе РА, а также возможно в перспективе разработать новые терапевтические стратегии, основанные на влиянии на иммунологический баланс, а также снижении воспалительного процесса при РА.

Целью данного исследования было определить субпопуляционный состав и фенотипические особенности ILC при РА.

В исследовании использовались мононуклеарные клетки периферической крови (МНК ПК) от 7 пациентов с РА и 6 условно здоровых доноров. Выделенные МНК ПК окрашивали моноклональными антителами, конъюгированными с флюорохромами: анти-Lineage (CD3/14/16/19/20/56) и анти-FceR1 alpha-FITC, анти-CD294-APC/Cy7, анти-CD127-PerCP/Cy5.5, анти-CD336-PE, анти-CD117-APC. ILC определялись как Lin-CD127+, в общей популяции оценивали количество CD294+ILC (ILC2), CD117-CD294-ILC определялись нами как ILC1, а CD117+СD294- ILC были идентифицированы как ILC3. Фенотип клеток анализировали на проточном цитофлуориметре FACS Canto II (BD Biosciences, США).

Нами было определено относительное количество различных популяций ILC (ILC1, ILC2 и ILC3) среди МНК ПК. Было показано, что у пациентов с РА статистически значимо снижено число ILC2 клеток по сравнению со здоровыми донорами, в то время как в процентное соотношение ILC1 и ILC3 не наблюдалось достоверных различий между донорами и пациентами. Также нами была проведена оценка количества c-Kit+ILC2, достоверных различий в доле данных клеток между донорами и пациентами не наблюдалось.

Таким образом, ILC являются популяцией клеток, которые вносят свой вклад в патогенез РА, роль ILC2 предположительно является протективной при РА. Нарушение баланса ILC может способствовать развитию РА, для лучшего понимания патогенеза РА необходимо дальнейшее изучение субпопуляционного состава, фенотипических и функциональных характеристик ILC при данном заболевании.

Атопический дерматит – мультифакторное генетически детерминированное воспалительное заболевание кожи, характеризующееся зудом, хроническим рецидивирующим течением, возрастными особенностями локализации и морфологии очагов поражения. Атопический дерматит принадлежит к группе заболеваний, которые, как полагают, возникают в результате сложных взаимодействий между генетическими, иммунологическими факторами и факторами окружающей среды. При атопическом дерматите нарушается барьерная функция кожи. Противомикробные пептиды типа LL-37, b-дефенсины участвуют в поддержании барьерной функции кожи (в частности межклеточных контактов). Дисбаланс противомикробных пептидов приводит к развитию различных заболеваний, в том числе и аллергических. Целью этого исследования является изучение экспрессионного профиля генов противомикробных пептидов HBD1 и LL37 в коже и мононуклеарных клетках крови при среднетяжелом и тяжелом течении атопического дерматита у детей в динамике. С помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени в образцах кожи и в мононуклеарных клетках крови был выявлен уровень экспрессии генов HBD1 и LL37. Анализ экспрессионного профиля таргетных генов показал достоверное (p ≤ 0,017) повышение уровней экспрессии HBD1 (H-критерий = 24,76; 2, n = 72; p = 0,00001) и LL37 (H-критерий = 15,69; 2, n = 72; p = 0,00039) в крови у пациентов с атопическим дерматитом по отношению к группе сравнения, а также снижение (p ≤ 0,05) уровня экспрессии HBD1 в пораженной коже по отношению к контрольной группе. Наши данные по гену кателицидина в коже не расходятся с примерами из литературы, поскольку его экспрессия в случае атопического дерматита снижена. В нашем случае также имеет место повышение экспрессии этого гена в МНК. Пептид HBD1 экспрессируется как в моноцитах, так и в макрофагах и является, таким образом, связующим звеном между врожденным и приобретенным иммунитетом. В нашем исследовании экспрессия гена HBD1 повышалась только в крови, что свидетельствует об активации структур врожденного иммунитета на системном уровне в ответ на воспаление. Выявление роли иммунологических маркеров в течении атопического дерматита позволит создать новые прогностические подходы при ведении пациентов с атопической патологией. Поэтому важно иметь полное представление о патогенетических механизмах аллергического заболевания.

В статье приведены результаты оценки популяционного иммунитета у жителей Калининградской области к актуальным антигенным вариантам вирусов гриппа в период 2018-2021 гг. Для оценки спектра циркулирующих на территории Калининградской области типов гриппа, использовался метод ПЦР в реальном времени с использованием наборов реагентов «АмплиСенс». Материалом для исследования служили мазки из рото-носоглотки, полученные от лиц, обратившихся в поликлиники с воспалительными заболеваниями верхних дыхательных путей или проходящих лечение в амбулаторных или стационарных условиях в ЛПУ Калининградской области. Для оценки гуморального иммунитета служила сыворотка крови, полученная от здоровых жителей Калининградской области, при прохождении периодических профилактических осмотров в поликлиниках города и области. Исследования проводились во всех возрастных группах. За изучаемый период 2018-2021 гг. проведено более 14000 исследований. Определение специфических антител в сыворотке крови проводилось постановкой реакции торможения гемагглютинации с использованием актуальных гриппозных диагностикумов (ООО «ППДП», Санкт-Петербург). Определение титра антител в сыворотках на уровне 1/40 и выше считалось достаточным для снижения риска заболевания по крайней мере на 50% За исследуемый период в области было лабораторно подтверждено 2165 случаев гриппа. В исследуемый период, основным штаммом, вызывающим грипп, был серотип A(H1N1) pdm, его удельный вес достигал 57,5%. Однако, наряду с A(H1N1) pdm, в эпидемический процесс внесли существенный вклад, будучи этиологической причиной гриппозной инфекции, в 2019 г. штамм A(H3N2) – 42,2%, а в 2020 г. штаммы гриппа типа B – 42,5%. На наличие антител за период 2018-2021 гг. обследовано 420 образцов сывороток крови вакцинированных и не вакцинированных лиц. Сыворотки забирались через 1-2 месяца после вакцинации и в период между подъемами заболеваемости (апрель-май). У вакцинированных лиц титр антител был протективным у 58,3-64,5%. У этой группы лиц, достаточный для поддержания иммунитета титр сохранялся и в весенне-летний период. Среди лиц, отказавшихся от вакцинации защитный титр антител в предэпидемический период отмечен у 41,2% обследованных, а в период межсезонья выявлен у 37,4% добровольцев. Таким образом, основной этиологической причиной, вызывающей грипп на территории Калининградской области в 2018-2021 гг. был штамм A(H1N1) pdm. Защитный уровень антител у привитого населения, в период предшествующий эпидемическому подъему заболеваемости, отмечался на 30% чаще, чем у не привитых лиц. Отмеченная в 2020 году высокая заболеваемость гриппом, вызванным штаммами гриппа В, по-видимому требует смены вакцинного препарата.

Вирус SARS-CoV-2 может проникать в клетки с помощью S1 вирусного шипового (S) белка не только через связывание с ACE2, но и через другие рецепторы клеток. К таким кандидатным рецепторам относится CD46, который также, как и CD45, относится к панлейкоцитарным рецепторам и экспрессируется на всех видах лимфоцитов. В свою очередь SARS-CoV-2-инфекция сопровождается повреждением практически всех компартментов иммунной системы и в первую очередь Т-лимфоцитов.

Целью исследования явилось изучение уровней экспрессии CD45⁺ и CD46⁺ на различных субпопуляциях лимфоцитов у пациентов, перенесших SARS-CoV-2-инфекцию.

Было обследовано 72 пациента, перенесших SARS-CoV-2-инфекцию. Методом проточной цитометрии определены CD45⁺ и CD46⁺ (панлейкоцитарный маркер для гейтирования лимфоцитов), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺ (Т-лимфоциты), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺, CD4⁺ (хелперы индукторы), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺, CD8⁺ (цитотоксические Т-лимфоциты,), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺, CD56⁺ (TNK-клетки), CD45⁺ и CD46⁺, CD3^-, CD56⁺ (натуральные киллеры), CD45⁺ и CD46⁺, CD3^-, CD19⁺ (В-лимфоциты), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD25⁺ (активированные хелперы, ранняя активация лимфоцитов), CD45⁺ и CD46⁺, CD3⁺, HLA-DR (активированные Т-лимфоциты – поздняя активация лимфоцитов).

Исследования показали, что снижение экспрессии CD46⁺ на Т-лимфоцитах (CD3⁺) сопровождается таким же снижением его экспрессии на цитотоксических Т-лимфоцитах (CD3⁺, CD8⁺), TNK (CD3⁺, CD56⁺), а также Т-хелперах, несущих маркеры ранней активации (CD3⁺, CD4⁺, CD25⁺). При этом наиболее выраженное снижение отмечалось как среди общих Т-лимфоцитов, так и цитотоксических. У этих больных несколько повышался уровень экспрессии CD46⁺ на В-лимфоцитах. Последние данные говорят об отсутствии вовлечения в нарушении рецептора CD46 на В-лимфоцитах. Полученные нами данные говорят о том, что вирус SARS-CoV-2 может воздействовать на рецептор CD46. Такое воздействие может приводить к усилению симптомов лонг-ковида (постковидного синдрома) у таких пациентов и требует формированию новых подходов к коррекции этих нарушений.

Хронические воспалительные заболевания органов малого таза у женщин представляют собой одну из основных и недостаточно изученных проблем в гинекологии во всем мире с неблагоприятными медицинскими и социально-экономическими последствиями, такими как хроническое течение воспалительного процесса, синдром хронической тазовой боли, внематочная беременность, бесплодие. В связи с тенденцией к росту хронизации и рецидивирования инфекционно-воспалительных заболеваний генитального тракта является необходимым дальнейшее изучение эффекторных и регуляторных механизмов иммунной системы. Особенно актуальным является изучение трансформации рецепторного аппарата нейтрофильных гранулоцитов (НГ), как основных клеток противомикробной защиты, с дальнейшим обоснованием применения таргетной иммуномодулирующей терапии. Цель исследования – оценить эффект влияния рекомбинантного IFNα2b в системе in vitro на негативно трансформированный фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов CD11b⁺CD64^-CD32⁺CD16⁺ и CD11b⁺CD64⁺CD32⁺CD16⁺ у иммунокомпрометированных женщин в период обострения хронических воспалительных заболеваний органов малого таза. Проведено тестирование НГ периферической крови 10 условно здоровых женщин от 20-40 лет (группа сравнения), 17 женщин 20-40 лет в период обострения хронических воспалительных заболеваний органов малого таза (группа 1) соответствующего возраста. Влияние рекомбинантного IFNα2b на НГ периферической крови 17 женщин с ХВЗОМТ оценивали в системе in vitro (группа 2). Методом проточной цитометрии (CYTOMICS FC500, США) определяли количество НГ и уровень экспрессии рецепторов субпопуляций CD11b⁺CD64^-CD32⁺CD16⁺НГ и CD11b⁺CD64⁺CD32⁺CD16⁺ НГ. У женщин в период обострения хронических воспалительных заболеваний органов малого таза выявлено увеличение плотности экспрессии поверхностных мембранных молекул: в субпопуляции CD11b⁺CD64^-CD32⁺CD16⁺НГ – СD16 на 91,7%, а в субпопуляции CD11b⁺CD64⁺CD32⁺CD16⁺ НГ – СD16 на 116% и СD32 на 81% относительно группы сравнения. В системе in vitro при инкубации периферической крови с рекомбинантным IFNα2b (группа 2) было выявлено увеличение количества НГ субпопуляции CD11b⁺CD64^-CD32⁺CD16⁺НГ относительно группы сравнения и группы 1 и значительное увеличение плотности экспрессии CD16 на 212%, CD11b на 56% и CD32 на 83% относительно группы сравнения и плотности экспрессии CD16 на 163%, CD11b на 223% относительно группы 1. Изменение плотности экспрессии мембранных молекул выявлено и в активационной субпопуляции CD11b⁺CD64⁺CD32⁺CD16⁺ НГ: увеличение CD16 на 232% относительно группы сравнения и снижение плотности экспрессии CD64 на 150% на фоне увеличения плотности экспрессии CD16 на 54% и CD11b на 103% относительно группы 1, что свидетельствует о перепрограммировании негативно трансформированного фенотипа НГ и может расцениваться как позитивный иммуномодулирующий эффект, а также служит основанием для дальнейших исследований с целью разработки новых комплексных подходов к лечению ХВЗОМТ различной этиологии.

Общая вариабельная иммунная недостаточность (ОВИН) представляет собой одну из самых распространенных форм первичных иммунодефицитов с преимущественной недостаточностью антител. В отличие от большинства других первичных иммунодефицитов, этот вариант достаточно часто дебютирует у взрослых, что создает определенные сложности в его выявлении. Проявления общей вариабельной иммунной недостаточности весьма многоообразны: инфекционный синдром (инфекции респираторного тракта, септические артриты), диарейный синдром (как инфекционного, так и неинфекционного генеза), аутоиммунный синдром (аутоиммунные цитопении, системные ревматические заболевания), лимфопролиферативный синдром (доброкачественная лимфоидная пролиферация, лимфомы), достаточно часто встречается интерстициальная болезнь легких и гранулематозные изменения по типу саркоидоза. Из-за отсутствия характерной клинической картины диагноз «общая вариабельная иммунная недостаточность» часто устанавливают с большим опозданием, такие больные долго наблюдаются у разных специалистов, и отсутствие патогенетической терапии (внутривенные иммуноглобулины) приводит к неуклонному прогрессированию заболевания а, нередко, и к летальным исходам. В статье представлено клиническое наблюдение, иллюстрирующее сложности в постановке этого диагноза. У женщины, госпитализированной по поводу пневмонии, было выявлено объемное образование в подслизистой толстой кишке. После исключения туберкулеза и лимфомы на основании гистологического исследования был поставлен диагноз «липома толстой кишки». Через несколько лет у пациентки стали периодически увеличиваться подчелюстные лимфоузлы, при повторном гистологическом исследовании установлен диагноз «гранулематозный некротизирующий лимфаденит», пациентка была направлена к ревматологу для исключения системного васкулита. Данный диагноз не подтвердился, но при лабораторном обследовании было выявлено резкое снижение гамма-фракции белков, на этом основании рекомендована консультация иммунолога для исключения иммунодефицита. При дальнейшем обследовании в сыворотке крови выявлено крайне низкое содержание иммуноглобулинов G и M, отсутствие иммуноглобулина A, на основании чего был впервые поставлен диагноз «общая вариабельная иммунная недостаточность». Рекомендована заместительная терапия внутривенными иммуноглобулинами в больших дозах с контролем претрансфузионного уровня, с дальнейшим переходом на поддерживающую схему. Таким образом, можно констатировать, что практикующие врачи до сих пор еще слабо осведомлены о первичных иммунодефицитах, особенно если в клинической картине доминируют неинфекционные проявления. Рутинный анализ содержания общего белка и белковых фракций может дать информацию, позволяющую заподозрить дефицит антител и на этом основании исследовать содержание сывороточных иммуноглобулинов для подтверждения диагноза.

Черепно-мозговая травма (ЧМТ) является одной из важнейших проблем в системе здравоохранения. В патогенезе первичной травмы важную роль играет воздействие механической энергии на ткани покровов головы и мозга за счет ударной волны, которая распространяется от места приложения травмирующего агента, а также перемещение и ротация полушарий мозга относительно более фиксированного ствола головного мозга. В результате этих механизмов инициируется каскад метаболических, биохимических и воспалительных изменений, приводящих к вторичному повреждению. ЧМТ в зависимости от ее механизма, тяжести и вида приводит к различным по степени и распространенности первичным структурно-функциональным повреждениям мозга на молекулярном, клеточном, тканевом и органном уровнях с расстройством центральной регуляции всех систем организма. Большинство данных свидетельствует о том, что травма головного мозга повышает риск развития эпилепсии и нейродегенеративных расстройств, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и хроническая травматическая энцефалопатия (ХТЭ), при этом наблюдается ущерб психическому здоровью. ЧМТ – это процесс, а длительно существующие симптомы у пациентов представляют собой функциональные и структурные повреждения. В ответ на травматическое воздействие происходит высвобождение молекулярных паттернов, связанных с повреждением (DAMP), что приводит к активации резидентных клеток мозговой ткани и последующей секреции этими клетками хемокинов и цитокинов. К очагу повреждения мигрируют нейтрофилы, которые способствуют удалению поврежденных клеток. Миграция Т- и В-клеток происходит через 3-7 дней после травмы. Таким образом после первичной травмы в результате каскада иммунных ответов возникает более обширное повреждение, называемое «вторичной травмой».

Целью нашего исследования является изучение роли иммунологических реакций в патогенезе ушиба легкой степени тяжести.

Было достоверно повышено количество Bm2-клеток, IgD^dimCD27^low «наивных» В-клеток и B-клеток с фенотипом IgD^lowCD27^hi («плазмобласты») у больных с ушибом головного мозга легкой степени тяжести по сравнению с контрольной группой пациентов, а количество «наивных» зрелых В-клеток с фенотипом CD27^lowCD38^dim достоверно снижено в сравнении с группой контроля.

Грипп является одной из наиболее актуальных проблем мирового здравоохранения на сегодняшний день. Вирус гриппа обладает иммуносупрессивными свойствами, что способно приводить к развитию вторичных иммунодефицитов, препятствуя функционированию механизмов активации системы интерферонов, приводя к нарушению образования провоспалительных цитокинов. Наиболее важным участником формирования противовирусного иммунитета является IL-1β. Данный цитокин играет важную роль в повышении экспрессии генов MCP-1 и MCP-3 и созревании макрофагов и дендритных клеток. Индукция выработки IL-1β происходит в результате взаимодействия лиганда с Toll-подобными рецепторами. В настоящее время существует большое количество препаратов, направленных на профилактику и терапию гриппозной инфекции, однако их применение в ряде случаев является затруднительным ввиду высокой мутационной изменчивости вируса гриппа, что делает его устойчивым к данным препаратам. Следовательно, особо важным является вопрос разработки и создания эффективных методов борьбы с подобными инфекциями. Перспективным методом терапии и профилактики вирусных респираторных инфекций может являться процесс РНК-интерференции. РНК-интерференция – процесс деградации чужеродной мРНК посредством молекул малых интерферирующих РНК (миРНК). Целью настоящего исследования является оценка экспрессии гена IL- 1β при трансфекции комплексов миРНК, направленных к клеточным генам FLT4, Nup98, Nup205. Оценка изменения вирусной репродукции проводилась с помощью титрования по ЦПЭ вируссодержащей жидкости. Уровень экспрессии гена IL-1β определялся с помощью ОТ-ПЦР-РВ. По результатам оценки изменения вирусной репродукции получено, что использование всех комплексов миРНК, направленных к клеточным генам, приводит к достоверному снижению вирусной репродукции на первые сутки после заражения. Применение комплексов Nup205 + FLT4 и FLT4 + Nup205 + Nup98 приводило к снижению вирусной репродукции также и на вторые сутки (р < 0,05) соответственно, по сравнению с неспецифическим и вирусным контролями. При анализе экспрессионного профиля гена IL-1β наблюдался рост его экспрессии на 1-е сутки для всех комплексов миРНК и на 2-е и 3-и сутки для комплексов Nup98 + FLT4 и Nup205 + Nup98. В ходе исследования было установлено, что подавление активности клеточных генов FLT4, Nup98 и Nup205, необходимых для вирусной репродукции, приводило к достоверному снижению вирусной активности и росту экспрессии IL-1β.

COVID-19 является мультисистемным заболеванием, однако масштабы последствий SARS-CoV-2 инфицирования в настоящее время недостаточно изучены, особенно у лиц с метаболическими нарушениями. Цель исследования – изучить особенности изменения уровней цитокинов семейства IL-6 (IL-6 и sIL-6, LIF и sLIFr), адипонектина и лептина в течение 360 дней после SARS-CoV-2 инфицирования у пациентов с метаболическим синдромом (МС) для выделения иммунопатогенетических особенностей в зависимости от вакцинации для профилактики COVID-19 в анамнезе.

Для достижения поставленной цели были сформированы группы пациентов: 1) больные с МС, которые перенесли COVID-19 (КТ-1-2) через 6-12 месяцев после полной вакцинации векторной вакциной (32 человека); 2-я группа – пациенты с МС, которые перенесли COVID-19 (КТ-1-2) без вакцинации в анамнезе (29 человек). Группа контроля – условно здоровые лица без МС: 3) вакцинированные и 4) невакцинированные, также перенесшие COVID-19.

Определение IL-6 и sIL-6, LIF и sLIFr, лептина и адипонектина, NO, ADMA, SDMA проводили методом ИФА. У пациентов с МС выявлены изменения цитокиновой регуляции в сторону провоспалительных реакций (рост уровня IL-6 в крови, повышение лептина), что наиболее выражено при МС в первые 30 дней постковидного периода, но с сохранением ряда изменений в течение 12 месяцев наблюдения (например, повышение в крови концентрации лептина). Вакцинация для профилактики COVID-19 снижает степень выраженности эффектов действия провоспалительного звена в системах sIL-6r/IL-6 и лептин/адипонектин в сторону протективного адипонектина, но не отменяет стойкого повышения лептина. В рамках представленных результатов не выявлено негативных отличия в группе однократно вакцинированных лиц с МС в рамках анализируемых звеньев цитокиновой регуляции МС в течение 1 года после COVID-19. Проведенный однофакторный, а далее многофакторный корреляционный анализ содержания в сыворотке крови sIL-6r/IL-6, LIF/ sLIFr, адипонектина и лептина с уровнями вазоактивных веществ (NO, ADMA и SDMA), гликированным гемоглобином, ЛПНП определил: рост отношения sIL-6r/IL-6 выступает независимым фактором снижения NО (r = 0,74, p < 0,01); увеличение sLIFr положительно коррелирует с повышением гликированного гемоглобина (r = 0,69, p < 0,01) и независимая связь с ростом АDMA (r = 0,82, p < 0,001), лептин (в указанной модели) – независимый фактор увеличения ЛПНП (r = 0,69, p < 0,05).

Изучение влияние «предковидных» модифицируемых факторов, в частности вакцинации, в аспекте снижения вероятности прогрессирования ранее существующих хронических заболевания (артериальной гипертензии, атеросклероза, сахарного диабета) у лиц с МС после перенесенного COVID-19 является актуальном и имеет перспективы внедрения в клиническую практику.

Представлен клинический случай реабилитации после развития острой воспалительной полирадикулонейропатии аутоиммунного генеза – синдрома Гийена–Барре у пациента, перенесшего новую коронавирусную инфекцию SARS CoV-2. Пациенту с отягощенным преморбидным фоном (гипертоническая болезнь, гиперхолестеринемия, сахарный диабет 2 типа, стенозирующий атеросклероз брахиоцефальных артерий) было проведено исследование однонуклеотидных полиморфизмов генов, ассоциированных с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний, нарушений обмена, иммунопатологией, фармакогенетикой – с применением полимеразной цепной реакции PCR-RT «Генетический паспорт» и трактовка результатов для прогноза развития осложнений, нежелательных лекарственных реакций и выбора биомаркеров для проведения превентивных мер. Сопоставлены клинические проявления, коморбидный фон и выявленные особенности генотипа: минорные гомо- и гетерозиготные варианты генов ACE, AGT, CYP1A2, NOS3, PPARD, EDN, PALLD, SNX19, ассоциированные с предрасположенностью к сердечно-сосудистой патологии, увеличивающие риск нарушения регуляции артериального давления, развития эндотелиальной дисфункции; варианты генов: FXII, ITGA2, ITGB3, MTHFR, MTRR, MTR, PAI-1, увеличивающие риск венозных и артериальных тромбозов, варианты генов ADRB3, FTO, INSIG2, KCNG11, LEP, PPARD, TCF7L2, ApoC3, PON1, ассоциированные с нарушениями углеводного и липидного обмена; полиморфизмы в генах, детерминирующих иммунный ответ: IL4, IL6, IL8, IL10, CDH1, BDNF1, CRP, гена CCR5 (в котором аллель del 32 считается маркером тяжелого течения SARS-CoV-2), гомозиготный полиморфизм гена FCGR2, ассоциирован с риском развития антиген-антитело-комплемент-опосредованной цитотоксичности, циркуляторного стаза, оседанием иммунных комплексов на эндотелии микрососудов, снижением антитромбогенной и повышением прокоагулянтной активности; по данным фармакогенетического исследования антикоагулянтов выявлен вариант гена CYP4F2; при оценке ответа на антиагреганты выявлен полиморфизм гена CYP2С19, ассоциированный с замедлением метаболизма ряда лекарств, что определяет необходимость повышения дозы или выбора препарата с другим механизмом действия; варианты генов CYP1A2, GSTP1, GSTT1 снижают эффективность детоксикационной системы организма; варианты генов NAT2*5 и NAT2*6 определяют снижение активности фермента, при назначении стандартной дозы лекарственных препаратов – процесс их детоксикации замедлен, накопление токсических метаболитов клинически проявляется нежелательными реакциями (гепатотоксичность, диспепсия, волчаночноподобный синдром, полиневриты). На основе генотипа, определяющего патогенез мультифакториальной патологии (в т. ч. и иммуно-опосредованные осложнения COVID-19), для пациента рекомендован персонализированный подход к лечению и профилактике осложнений с мониторингом биохимических, иммунологических и коагулологических биомаркеров, адекватным выбором фармпрепаратов.

По мере накопления данных в процессе развития пандемии SARS-CoV-2 инфекции стало ясно, что к факторам риска тяжелого течения COVID-19 среди пациентов с первичными иммунодефицитами относятся нарушения, связанные с дисрегуляцией иммунного ответа. В этой связи представляет интерес выявление возможных предикторов развития выраженной воспалительной реакции при инфицировании коронавирусом у пациентов с общей вариабельной иммунной недостаточностью. С этой целью на примере случая из практики проведено изучение динамики параметров иммунной системы у пациента с CVID, перенесшего тяжелый клинический вариант COVID-19.

Пациент К., 49 лет, диагноз «CVID» верифицирован в 35 лет, получает регулярную заместительную терапию ВВИГ. Перенес COVID-19 в тяжелой форме, при лечении получал антицитокиновую терапию и дополнительный курс ВВИГ. Выписан в удовлетворительном состоянии. Методом проточной цитофлуориметрии оценивали количественные и функциональные показатели Т- и В-звеньев иммунной системы при плановом обследовании до инфицирования и через три месяца после выписки из стационара после COVID-19. Показано, что до болезни имелись изменения в параметрах В-клеток, характерные для CVID в виде снижения переключенных В-клеток памяти и плазмобластов. Также верифицированы изменения в Т-клеточном звене в виде перераспределения субпопуляционного состава в сторону Т-эффекторов с увеличением цитолитического потенциала этих клеток и ослаблением Т-клеточной супрессии за счет снижения в циркуляции Тreg. После перенесенного COVID-19 у пациента сформировались специфические антитела класса М и G. Развитие иммунитета сопровождалось увеличением количества непереключенных и переключенных В-клеток памяти. В Т-клеточном звене при этом зарегистрировано увеличение Т-клеток памяти, готовых к пролиферативному ответу Т-хелперов и Treg. Исходный провоспалительный настрой Т-звена иммунной системы у нашего пациента с CVID объясним реализацией компенсаторных возможностей иммунной системы, что привело к активации цитолитических эффектов клеточного звена адаптивного ответа при ослаблении гуморальной составляющей. С другой стороны, вероятно, что именно эти изменения внесли свой вклад в клиническое течение COVID-19 в данном клиническом случае. Формирование специфического гуморального ответа к SARS-CoV-2 у пациента с CVID после перенесенной инфекции COVID-19 сопровождается увеличением доли В-клеток памяти, согласованной динамикой параметров Т-клеточной супрессии и активации.

В XXI веке в связи с увеличением средней продолжительности жизни увеличилось число пациентов с хроническими заболеваниями. При этом сердечно-сосудистые заболевания до сих пор занимают одно из лидирующих мест в структуре заболеваемости и смертности. К сожалению, при не эффективности консервативной терапии, пациентам сердечно-сосудистого профиля показаны инвазивные методы лечения. Аортокоронарное шунтирование в условиях искусственного кровообращения является одним из самых распространенных методов лечения. Открытые операции на сердце имеют ряд потенциальных осложнений, возникающих в раннем послеоперационном периоде. Одним из часто встречающихся осложнений у пациентов кардиохирургического профиля является острое повреждение почек, которое приводит к резкому повышению продуктов азотистого обмена в сыворотке крови. Данный синдром встречается в 30% всех прооперированных случаев, а в 2% случаях требуется применение методов заместительной почечной терапии. Цель нашей работы – определить особенности реагирования факторов врожденного иммунитета на длительность искусственного кровообращения у пациентов после операций на открытом сердце. В наше исследование включены 100 пациентов после аортокоронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения в зависимости от его длительности. В результате, проанализировав данные о содержании про- и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови у пациентов с ОПП 1-й и 2-й стадии (KDIGO) в зависимости от длительности искусственного кровообращения, мы установили, что динамика соответствовала стандартной картине изменений после аортокоронарного шунтирования, где отмечалась гиперпродукция про- и противоспалительных цитокинов в группах, где продолжительность искусственного кровообращения была выше.

В современном мире врожденные ошибки иммунитета (ВОИ), или первичные иммунодефициты (ПИД), являются одной из основных причин детской инвалидности и смертности, отражающих демографическое состояние человечества не только в настоящее время, но и в перспективе. В Свердловской области за последние 5 лет детей, погибших от тяжелого комбинированного первичного иммунодефицита, было около 30%. Настоящее ретроспективное исследование посвящено изучению нозологического спектра в структуре смертности детей с иммунозависимой патологией в Свердловской области, также оценке информативности анализа внехромосомных кольцевых молекул ДНК – TREC и KREC. В пользу предполагаемого диагноза первичных иммунодефицитов выступали некоторые анамнестические данные о течении пренатального периода настоящей и предшествующих беременностей – наличие угрозы прерывания на ранних сроках, наличие случаев ранней детской смерти, персистирующие вирусные и бактериальные инфекции у матери, наличие осложнений течения беременности у матери, а также клинические проявления, включающие грибково-бактериальный сепсис, генерализованную вирусную инфекцию, нарушения репарации, сниженную физиологическую толерантность, которая сопровождается аутоиммунным поражением органов и неконтролируемым системным воспалением. Проведенное исследование продемонстрировало широкий спектр нозологических форм врожденных ошибок иммунитета в структуре ранней детской смертности, среди которых встречались как классические формы первичных иммунодефицитов, так и нозологии, не относящиеся непосредственно к врожденным ошибкам иммунитета, но в фенотипе которых наблюдается явный иммунодефицит, и их непосредственную роль в статистических девиациях. Одним из основных критериев, способных отметить возможное наличие иммунозависимой патологии в раннем неонатальном периоде, оказались маркеры наивных Т- и В-клеток (TREC и KREC соответственно), в 70% изучаемых случаев почти хотя бы один этих показателей был снижен. Важно понимать, что первичные иммунодефициты уже не на столько редкая патология, как считалось прежде, и необходимо проводить своевременную и качественную диагностику во избежание непредотвратимых летальных исходов.

Проблема острого остеомиелита у детей занимает одно из центральных мест среди воспалительных заболеваний костно-мышечной системы. Причинами являются возникшие в организме инфекционные процессы, распространившиеся на костную ткань при различных дисрегуляторных процессах иммунной системы, и в первую очередь нейтрофильных гранулоцитов. Представляет интерес изучение субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов, образующихся при включении клетки в воспалительный процесс, при остром остеомиелите у детей и определение возможности влияния на уровень экспрессии рецепторов для коррекции их функций. Целью исследования явилась оценка влияния гексапептида аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинина на измененный фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63^- и CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63⁺ детей с острым остеомиелитом в эксперименте in vitro. Исследованы образцы периферической крови детей 10-17 лет с острым остеомиелитом (гематогенным или посттравматическим, n = 12) при поступлении в стационар и условно здоровых детей (n = 7). Образцы крови детей с острым остеомиелитом инкубировали с гексапептидом (10^-6 г/л) 60 мин, Т 37 °С. Проводили определение содержания субпопуляций CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63^- и CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63⁺ нейтрофильных гранулоцитов, оценку плотности экспрессии мембранных рецепторов (FC 500, Beckman Coulter, США); исследовали фагоцитарную функцию с учетом степени завершенности фагоцитарного акта в отношении S. aureus. Установлено, что при остром остеомиелите выявлено значительное увеличение в 8,5 раз доли активированной субпопуляции CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63⁺НГ с фенотипом CD16^brightCD62L^brightCD11b^brightCD63^dimНГ, на фоне снижения субпопуляции CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63^-НГ и изменения ее фенотипа – CD16^dimCD62L^brightCD11b^midCD63^-НГ в сравнении с показателями условно здоровых детей. При этом отмечено увеличение количества активно фагоцитирующих клеток, но снижение показателей, характеризующих процессы захвата и переваривания бактериального антигена. Показано, что гексапептид в эксперименте in vitro модулирует фенотипы обеих изучаемых субпопуляций в CD16^brightCD62L^midCD11b^midCD63^- и CD16^midCD62L^midCD11b^midCD63^dimНГ, способствуя восстановлению уровня экспрессии рецепторов до показателей группы сравнения и фагоцитарной активности как процессов захвата, так и переваривающей способности клеток. Таким образом, установлено значительное доминирование диагностически значимой активированной субпопуляции CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63⁺НГ с фенотипом CD16^brightCD62L^brightCD11b^brightCD63^dimНГ при остром остеомиелите у детей. Показано, что гексапептид в системе in vitro модулирует фенотипы субпопуляций CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63^-НГ и CD16⁺CD62L⁺CD11b⁺CD63⁺НГ, при этом восстанавливая фагоцитарную активность клеток. В перспективе полученные результаты могут послужить основой при разработке новых эффективных терапевтических схем лечения.