Том 22, № 4 (2019)

В обзоре представлены публикации в основном за последние 5–7 лет, посвященные дальнейшему изучению роли герпесвирусов в патогенезе рассеянного склероза. Рассмотрены сведения об особенностях иммунного ответа на вирус Эпштейна-Барр и герпесвирус человека 6-го типа при рассеянном склерозе. Описаны гипотезы, касающиеся участия этих герпесвирусов в иммунопатологических процессах при рассеянном склерозе.

Ранее было показано, что моноклональные легкие цепи (МЛЦ), соответствующие фагемидной библиотеке рекомбинантных легких цепей иммуноглобулинов лимфоцитов периферической крови пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) специфически гидролизуют основной белок миелина (ОБМ). Препараты одной из легких цепей (NGTA1-Me-pro) демонстрировали два оптимальных значения рН, две оптимальные концентрации ионов металлов и два значения K_m для ОБМ. Два протеазных активных центра NGTA1-Me-pro были металл-зависимыми. В данной работе впервые проведен анализ гомологии белковой последовательности NGTA1-Me-pro с таковыми для нескольких классических Zn2^+- и Ca2^+-зависимых, а также сериновых протеаз человека. Проведенный анализ позволил выявить белковые последовательности NGTA1-Me-pro, ответственные за связывание ОБМ, хелатирование ионов металлов и непосредственно катализ. Полученные данные обобщены с помощью гипотетических моделей структуры двух активных центров легкой цепи антител. 

Целью исследования явилось изучение показателей сывороточного α- (IFN-α) и γ-интерферона (IFN-γ), уровней спонтанной и стимулированной продукции интерферонов мононуклеарами периферической крови у больных местно-распространенным почечно-клеточным раком в период до операции и через 14 дней после хирургического лечения. Обследованы больные местно-распро страненным почечно-клеточным раком (T3 N0 M0) до хирургического лечения и через 14 дней после радикальной нефрэктомии. Концентрацию IFN-α и IFN-γ в сыворотке крови определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Уровень спонтанной и стимулированной (конканавалин А) продукции IFN-α и IFN-γ определяли в супернатантах мононуклеаров периферической крови, культивированных в течение 72 часов, методом ИФА. Установлено, что у больных местно-распространенным ПКР как до операции, так и после хирургического лечения наблюдается повышение содержания IFN-α и IFN-γ в сыворотке крови, а также увеличена спонтанная продукция IFN-γ мононуклеарами периферической крови. В динамике, через 14 дней после операции отмечается снижение спонтанной продукции IFN-α в сочетании с повышенной способностью мононуклеаров периферической крови к индуцированной выработке IFN-α и IFN-γ. Выявленный дисбаланс в IFN-продуцирующей системе у больных ПКР в послеоперационном периоде необходимо учитывать при разработке иммунореабилитационных программ у данной категории больных.

С целью исследования фенотипического состава Т-лимфоцитов периферической крови у людей в динамике послеоперационноо лечения в зависимости от исхода распространенного гнойного перитонита (РГП) обследовано 38 пациента с острыми хирургическими заболеваниями и травмами органов брюшной полости, осложнившимися РГП. Забор крови производили перед операцией (дооперационный период), а также на 7, 14 и 21 сутки послеоперационного периода. Исследование фенотипа Т-лимфоцитов крови проводили методом проточной цитометрии. Установлено, что фенотип Т-лимфоцитов крови у больных РГП в до- и послеоперационном периоде значительно различается в зависимости от исхода заболевания. При благоприятном исходе РГП в дооперационном периоде выявляется повышенное количество общих Т-лимфоцитов, в том числе, с экспрессией CD62L, а также CD4⁺-Т-клеток, прежде всего за счет Treg (включая активированные клетки). Следовательно, повышение количества в крови Treg у больных РГП на пике заболевания является прогностическим признаком благоприятного исхода. Treg регулируют интенсивность воспалительного процесса, что приводит к улучшению клинического состояния больных РГП и, соответственно, повышает вероятность благоприятного исхода заболевания. Фенотип Т-лимфоцитов крови значительно меняется в динамике послеоперационного лечения. Независимо от исхода заболевания у больных значительно снижается содержание Т-клеток, экспрессирующих CD28 и CD62L, а также уровень Т-хелперов и Treg. Только при благоприятном исходе заболевания к концу наблюдаемого периода (21 сутки лечения) в крови повышается количество цитотоксических Т-лимфоцитов и Т-клеток с экспрессией CD57. Данные изменения фенотипического состава Т-лимфоцитов определяются применением антибиотиков и миграцией клеток в зону воспаления. 

Корь – высоко контагиозное инфекционное заболевание, чреватое тяжелыми осложнениями вплоть до смертельных исходов. Принятая ВОЗ программа элиминации кори дала ощутимые плоды, однако корь все еще не побеждена. На этапе элиминации кори особенно актуальными становятся меры по повышению достоверности результатов и качества лабораторных исследований антител к вирусу кори. Целью данных исследований явилась валидация препарата «ВЛК Корь-IgG» для определения коревых антител класса G в сыворотке крови иммуноферментным методом и отработка параметров учета для качественного и количественного вариантов проведения исследований. Материалом исследования являлись коммерческие наборы реагентов для определения концентрации антител к вирусу кори «ВектоКорь-IgG» (ЗАО Вектор-Бест, Новосибирск, Россия), с помощью которых определяли концентрацию искомого аналита в сыворотках крови 654 случайно выбранных условно здоровых жителей г. Москвы и Московской области в возрасте от 0 до 60 лет. При проведении внутрилабораторного контроля качества для оценки внутри- и межсерийной сходимости анализа использовали «ВЛК Корь-IgG» (лиофильно высушенный препарат, содержащий IgG к вирусу кори). Показано, что аттестованный на базе референслаборатории ЕРБ ВОЗ, ФБУН «МНИИЭМ им. Г. Н. Габричевского» образец «ВЛК Корь-IgG» пригоден для внутрилабораторного контроля качества при определении коревых IgG в сыворотке крови с использованием наборов «ВектоКорь-IgG» качественным (ОП о. е.) и количественным (МЕ/мл) способом. Установлено, что при оценке сходимости и воспроизводимости результатов «ВЛК Корь-IgG» значения CV не должны превышать 8% и 19% соответственно, а показатели ОП (о. е.) и МЕ/мл рабочих растворов «ВЛК Корь-IgG» (цельный или разведенный 1:2) не должны находиться в зоне значений (точек) тестовых калибровочных образцов.

Проведён ретроспективный анализ динамики числа нейтрофилов в крови у облучённых жителей прибрежных сёл реки Течи, заболевших впоследствии острыми лейкозами. Обнаружены особенности в реакции гранулоцитарного ростка кроветворения на облучение у этих лиц по сравнению с облучёнными людьми без лейкозов.

Т-лимфоциты привитых людей вовлекаются в поствакцинальный иммунный ответ на полисахаридную вакцину против A, C, Y и W серогрупп N.meningitidis даже, если вакцина не является гликопротеиновым конъюгатом, однако функциональная активность Т-лимфоцитов, продуцирующих IFNγ и IL-4 различна при первичном и вторичном ответе на вакцину. В случаях, когда при ревакцинации гуморальный иммунный ответ на А-полисахарид Neisseria meningitidis развивается слабо, в их крови регистрируется недостаточная активность Т-лимфоцитов, продуцирующих IFNγ, а изменение баланса между активностью Тh1 и Тh2 более сходно с динамикой у первично привитых людей, а не у успешно ревакцинированных.

Исследован уровень 25(ОН) гидроксихолекальциферола у здоровых, детей с рекуррентными респираторными заболеваниями и пациентов с бронхиальной астмой легкой степени тяжести. Установлено, что у детей с повторными респираторными инфекциями отмечается значимое снижение концентрации витамина Д на фоне нарастания общего сывороточного иммуноглобулина Е в сравнении с группой здоровых лиц. Пациенты с бронхиальной астмой легкой степени тяжести демонстрируют более низкие значения витамина Д.

Исследовали уровни специфических IgE-антител (IgE-АТ) к бытовым, пищевым, пыльцевым и лекарственным аллергенам, динамику СD45 в тест-системе с лекарственными препаратами (ЛП) у пациентов с АЗ. Наиболее часто повышенные уровни IgE-АТ отмечаются к пыльцевым (30,8%) аллергенам, к эпидермальным – 24,6%, пищевым – 25,5% случаев. При лекарственной непереносимости (ЛН) наиболее востребованным является СD45-тест (КСCD45) с анестезирующими средствами (76%), среди которых 61,8% составляют исследования с местными анестетиками (МАН). Повышенные КСCD45 наиболее часто отмечались в тест-системе с лидокаином (30%) и ультракаином (21,4%), среди препаратов для предоперативного скрининга – к кетамину (20%) и диазепаму (17%).

Исследованы сывороточные концентрации IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-α, IFN-β, IFN-γ, TFN-α, MCP-1, RANTES, MIP-1α, MIP-1β у детей с острыми бронхитами. Установлено, что у детей с острым бронхитом в целом (n = 87) отмечается статистически значимо высокий уровень IL-8, IFN-β, MCP-1, RANTES, MIP-1α, MIP-1β в сравнении с группой контроля. Обнаружено, что концентрация MIP-1α и MIP-1β в группе детей с острым простым бронхитом в два раза выше, чем у детей с острым обструктивным бронхитом, что свидетельствует о преобладании клеточной фазы иммунного ответа над гуморальной. Иммунологическими маркерами острого обструктивного бронхита являются более низкие концентрации MIP-1α и MIP-1β в сыворотке крови, при высоких значениях IL-10, что подтверждает значимость Th2-пути в патогенезе бронхиальной обструкции.

Персистенция высокоонкогенных вирусов папилломы человека является причиной рака шейка матки и играет значительную роль в развитии рака ротоглотки и аногенитальной области. В статье приведен анализ накопленного опыта применения вакцин против вируса папилломы человека с учетом введения рутинной вакцинации во многих странах мира. Вакцины против папилломавирусов являются эффективными, иммуногенными и безопасными при массовом применении. Самую частую группу нежелательных явлений составляют реакции в месте введения.

В результате проведенного анализа канонической корреляции между показателями клеточного звена и уровнем продукции гуморальных факторов установлен определенный характер взаимосвязи между ними и выявлены наиболее важные факторы, определяющие своеобразие функционального состояния иммунной системы у разных групп пациентов с коксартрозом до и после эндопротезирования тазобедренного сустава.

Цель: с помощью кластерного анализа выделить фенотипы бронхиальной астмы при поступлении пациентов на санаторно-курортный этап медицинской реабилитации и проанализировать их патогенетические особенности. Под наблюдением было 518 больных БА, поступивших на реабилитацию. Комплекс обследования включал клиническое, функциональное, лабораторное исследование. Изучались иммунологические показатели: IgЕ, IFN-α, IFN-γ, IL-4, EGF, TGF-β, TNF-α. Статистическая обработка материала с помощью программного продукта SPSS25. На основании результатов первичного обследования пациентов с БА применен кластерный анализ и разработана модель из трех кластеров. Определены диагностические параметры для отнесения пациентов к кластерам и описаны особенности иммунологического обследования. Выделение однородных групп на этапе реабилитации имеет значение для разработки персонализированных программ реабилитации.

В работе изучена секреция нейтрофилами преформированных цитокинов после часовой инкубации в среде RPMI 1640. Секрецию цитокинов определяли с использованием мультиплексных наборов компании БиоРад (США) для определения 17 цитокинов (G-CSF, GM-CSF, IL-10, IL-12p70, INF-γ, IL-13, IL-17A, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, TNF-α, IL-8, MCP-1, MIP-1β) на приборе MAGPIX-100 (США). Установлено, что при инкубации нейтрофилов в среде RPMI 1640 в течение 1 часа в среде инкубации (супернатанте) выявляются GM-CSF, IL-12p70, IL-17A, IL-1β, IL-6 IL-8 и MIP-1β, концентрация которых в супернатанте нейтрофилов превышала контрольный уровень (среда RPMI-1640) в 1,2–7,0 раз (p<0,05–0,001). Таким образом, нейтрофилы способны секретировать преформированные цитокины в среду культивирования в течение 1 часа после начала их инкубации.

Проведен расширенный анализ иммунного статуса (более 45 показателей) у 120 тяжело обожженных пациентов. Выявленные статистически значимые иммунные нарушения сопряжены с параллельно идущими процессами: иммунной гиперактивацией и иммуносупрессией, тяжесть которых зависит от площади ожогового поражения и периода ожоговой болезни. Ранняя иммунодиагностика по формуле прогноза сепсиса, разработанная нами позволяет выявлять пациентов с высоким риском генерализации инфекции и септическими осложнениями для обеспечения соответствующей комплексной терапии и своевременной иммуннокоррекции.

В работе проведена оценка информативности соотношения активности митохондриальных дегидрогеназ глицерол-3-фосфата (ГФДГ) и сукцината (СДГ) в основных популяциях лимфоцитов для прогноза отторжения трансплантата у 15 реципиентов группы риска до проведения повторной трансплантации роговицы. У пациентов с неблагоприятным исходом выявлено увеличение отношения активности ГФДГ/СДГ во всех основных популяциях лимфоцитов, наиболее выраженное в В-лимфоцитах и NK-клетках. Отношение активности ГФДГ/СДГ может служить прогностическим показателем отторжения трансплантата при рекератопластике.

В статье рассмотрены результаты иммунофенотипирования Т-лимфоцитов по маркерам контрольных точек иммунного ответа, представляющих перспективные мишени противоопухолевой иммунотерапии, у пациенток с ранними стадиями вирус-ассоциированного рака шейки матки. Обсуждаются различия в профиле экспрессии данных маркеров субпопуляциями лимфоцитов в составе опухоли и в периферической крови.

Проведена оценка реакций мононуклеарных клеток крови (МНК) при сокультивировании с титановыми подложками, несущими двустороннее кальцийфосфатное покрытие (КФ), в условиях дополнительной активации Т-клеточного рецептора. Установлено, что в активационной 3D модели при контакте с КФ-покрытием, усиливается секреция про- и антивоспалительных цитокинов (IL-2, TNF-α, IL-10, IL-4), на фоне снижения жизнеспособности культуры МНК и изменения их иммунофенотипа, в сторону увеличения числа клеток, экспрессирующих CD95+ и CD45R0+, (число CD25+ клеток не изменялось), что может свидетельствовать о гиперактивации МНК в 3D модели при ее стимуляции активатором Т-клеток.

Несмотря на развитие хирургической техники, методов анестезиологического пособия, защиты органов в условиях искусственного кровообращения, нерешенной остается проблема ранних послеоперационных осложнений после аортокоронарного шунтирования (АКШ), одним из таких осложнений остается острое повреждение почек (ОПП), распространенность которого по данным разных авторов достигает 30%. Цель: оценить диагностическое и прогностическое значение в определении уровня матриксной металлоротеиназы 8 и их ингибитора 1 типа (ММР-8, TIMP 1) у пациентов с острым повреждением почек до и после АКШ. Материалом исследования служила сыворотка крови 70 пациентов обоего пола с ишемической болезнью сердца (ИБС) до и после АКШ, разделенных на 3 группы: с ОПП (I гр.), с ОПП и фоновым заболеванием СД 2 типа (II гр.), без осложнений в виде ОПП (III гр.). Зарегистрировано увеличение концентрации ММР-8 в сыворотке крови при развитии ОПП в I гр. (p<0,05), выявлен низкий уровнень ММР-8 до операции во II группе с последующим его нарастанием в 2 раза (p<0,05), увеличение уровня TIMP 1 после оперативного вмешательства зафиксировано в всех группах (p<0,05).

Папилломавирусная инфекция является одной из самых распространенных инфекций, передаваемой преимущественно половым путем. ПВИ наиболее часто сопровождается снижением клеточного иммунитета, а так же дефицитом общего и местного интерферона. Обследовано 129 пациенток на ИППП и ВПЧ. Было установлено разнонаправленное изменение ИЛ-28 (ИФНлямбда 3) и ИЛ-29 (ИФН-лямбда 1) в сыворотке венозной крови. При ПВИ определено снижение ИФН-лямбда-1 при статистически значимом увеличении ИФН-лямбда-3 в сыворотке крови.

Рак шейки матки, вызываемый папилломавирусом, занимает второе место в структуре онкологических заболеваний у женщин. Разработка вакцин против вируса папилломы человека отечественного производства является важным аспектом национальной и биологической безопасности населения. Доклинические исследования, как один из этапов разработки отечественных вакцин против вируса папилломы человека, должны отражать весь спектр требований к безопасности и быть гармонизированными с требованиями ведущих международных организаций.

Заболеваемость медработников вирусным гепатитом В (ВГВ) варьирует от 2 ⁰/₀₀₀₀ (2011 г.) до 42 ⁰/₀₀₀₀ (2014 г.) Прививки против ВГВ медработникам проводятся на добровольной основе по схеме 0–1–6. Серологическое исследование на наличие поствакцинального иммунитета среди привитых медработников свидетельствует о серопозитивности у 74,7% с защитным титром антител от 10 до 200 МЕ/мл у 50,8%. 

Цель исследования – изучить динамику содержания IL-1β, IL-1α, IL-1ra, IL-18, IL-18BP, IL-37, IL-6, sIL-6r, LIF, sLIFr, IGF-1, TNF-α, sTNF-RI, IL-17, IL-2, IL-4, IL-10, TGF-β1, IL-8, CX3CL1, CXCL10, INFγ, M-CSF, IL-34, VEGF-A, ЕРО в сыворотке крови у больных с метаболическим синдромом (МС) при применении статинов. Применение статиновв течение 6 месяцев у больных с МС характеризуется снижение M-CSF до 399 [375–440] пг/мл (р<0,001) с вторичным увеличением концентрации протективного фактора – сертуина-1 (р<0,001) и ЛПВП, что блокирует прогрессирование атеросклеротических процессов, но при концентрации M-CSF в интервале [395–454] пг/мл отменяется его стимулирующее влияние на синтез VEGF-A, что соотносится со снижением выраженности коронарных коллатералей и сохраняет высокий риск развития инфаркта миокарда (возможно, что данный эффект нивелируется при применении статинов более 6 месяцев). Полученные данные доказывают актуальность долгосрочных исследований в данном направлении.

Сведения о внутриутробном инфицировании плода и перинатальной передаче вируса гепатита С носят противоречивый характер и нуждаются в дальнейшем изучении. Существует множество факторов, которые могут увеличить риск перинатального инфицирования ВГС, такие как вирусная нагрузка, акушерские факторы, способы родоразрешения. Целью нашей работы была оценка риска перинатальной трансмиссии вируса гепатита С у детей, рожденных женщинами с ХГС, и возможности профилактики перинатального инфицирования ВГС.

В статье обсуждаются трудности установления диагноза вирусного гепатита Е и формы болезни у пациентов с коморбидными состояниями, при обнаружении в сыворотке крови антител к вирусу гепатита Е.

Проведен анализ уровня IgE в группе детей с острыми вирусными инфекциями, среди которых была корь, краснуха, парвовирусная инфекция В-19, энтеровирусная инфекция и острые респираторные вирусные инфекции с сопутствующим аллергическим дерматитом.

В настоящее время исследования по изучению действия цитокинов на функциональную активность иммунокомпетентных клеток вызывают большой научный интерес. Наиболее показательным является использование различных моделей культивирования клеток иммунной системы. В данной работе описываются две клеточных модели, используемые для изучения прямого влияния интерлейкина-7 на функциональные свойства Т-лимфоцитов. Интерлейкин-7 (IL-7) участвует в основных этапах жизненного цикла Т-клетки: проведение необходимых для выживания сигналов, дифференцировка, пролиферативная активность, защита от апоптотической гибели, гомеостатическое поддержание численности Т-лимфоцитов. Направленность и выраженность эффектов IL-7 оценивали на предложенных гомеостатической и активационной Т-клеточных моделях in vitro.