Том 21, № 3 (2018)

В работе проведена оценка с использованием ИФА уровня цитокинов сыворотки крови и биологических жидкостей лиц, перенесших гнойно-воспалительные заболевания урогенитального тракта. Объектом исследования стал цитокиновый профиль 58 мужчин с гонококковой инфекцией и 40 пациентов с неспецифическим уретритом. Как показало исследование, установленные значения уровней цитокинов были использованы в качестве маркеров объема урогенитального воспаления, что послужило основанием для разработки способа диагностики и прогнозирования течения инфекционного процесса. Выявленные отличия иммуноцитокинового профиля могут способствовать раскрытию механизмов формирования различных форм инфекции, а также определять методологические и тактические подходы к терапии и реабилитации пациентов с нарушением сексуального и репродуктивного здоровья.

В отдалённые сроки после хронического радиационного воздействия с преимущественным облучением красного костного мозга (средняя доза облучения – 1,04±0,17 Гр, индивидуальные значения: 0,01–2,96 Гр) у лиц с повышенной частотой апоптоза лимфоцитов периферической крови не отмечено снижения числа Т-лимфоцитов и их основных субпопуляций, а также B-лимфоцитов и клеток врождённого иммунитета в крови. Средние значения большинства показателей, характеризующих врождённый иммунитет и уровни сывороточных цитокинов у них соответствовали таковым у облучённых людей с нормальным уровнем апоптоза лимфоцитов периферической крови. У облучённых лиц с повышенным уровнем апоптоза лимфоцитов наблюдалось увеличение показателей спонтанного НСТ-теста нейтрофилов и снижение уровней сывороточного ИФНγ. Результаты исследования свидетельствовали о том, что в отдалённые сроки после хронического радиационного воздействия индукция апоптоза лимфоцитов периферической крови не приводила к развитию вторичного иммунодефицита.

Дозозависимые эффекты антибиотиков и их влияние на иммунокомпетентные клетки организма, в частности нейтрофильные гранулоциты, до сих пор остаются малоизученными. Методом проточной цитометрии была определена минимальная действующая доза (МДД) хемомицина путем оценки дегрануляции нейтрофильных гранулоцитов. Было установлено, что при действии МДД хемомицина нейтрофилы образуют нейтрофильные внеклеточные ловушки (НВЛ), являющиеся одним из механизмов адаптивного иммунитета.

В работе приведены результаты исследования нейроцитокиновых взаимодействий у детей с расстройствами аутистического спектра с разным уровнем социальной адаптации. Было выявлено два отличных образа функциональных сетей: в группе «РАС, социальный контакт есть» – сеть с малым количеством корреляционных связей – «образ замедленного нейроразвития»; в группе «РАС, социального контакта нет» – сеть корреляционных связей напряженная, свидетельствует об активации симпато-адреналовой оси, являющейся базовой в реакции адаптации «бой/бегство» или «замороженное поведение» – образ «закрытой системы».

Проведен анализ наличия у композиции из метионина и куркумы антиоксидантных и дополнительных иммуностимулирующих свойств в условиях in vitrо. Определение активности кaтaлaзы в отношении метионина, куркумы, композиции из куркумы и метионина проводили на модели нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров по реакции с aммония молибдaтом, функционально-метаболический статус нейтрофильных гранулоцитов изучен по показателям активности и интенсивности фагоцитоза, активности и интенсивности нейтрофильных гранулоцитов в НСТ-тесте. Показано, что совместная инкубация  нейтрофильных гранулоцитов крови здоровых доноров с раствором куркумы и композицией из куркумы и метионина обладает высокой антиоксидантной активностью, приводит к усилению спонтанной и индуцированной НСТ-редуцирующей активности, увеличению функционального резерва и фагоцитарного потенциала данных клеток.

В статье представлены результаты сравнительного исследования системных и локальных уровней матриксных металлопротеиназ ММР-2, ММР-8, ММР-9 и их тканевых ингибиторов TIMP-1, TIMP-2 у пациентов с пародонтитом и сахарным диабетом II типа (I группа) и с пародонтитом без сахарного диабета (II группа). Проведено обследование 65 больных, из них: 30 чел. – I группы и 35 чел. – II группы. Контрольную группу составили здоровые добровольцы (30 человек). У пациентов обеих групп зарегистрировано достоверное увеличение ММР-9, TIMP-1, -2 в сыворотке крови, повышение ММР-2, -8, -9, TIMP-1, -2 в слюне, а также ММР-8 и ММР-9 в крови, полученной из микроциркуляторного русла десны пациентов. Определено снижение уровней ММР-2 и ММР-8 в сыворотке крови, а также понижение уровней ММР-2 и TIMP-2 в крови, полученной из МЦР десны у пациентов 1 и 2 групп. У больных с пародонтитом на фоне сахарного диабета II установлена гиперпродукция ММР-9, а также повышение уровней TIMP-1 в крови, полученной из МЦР десны. В группе пациентов без сопутствующей патологии, напротив, определено более выраженное увеличение уровней ММР-8, а также повышение TIMP-1 в слюне и TIMP-2 – в сыворотке крови.

Проведено изучение уровня нейроспецифических белков и аутоантител к субъединице NR2 рецептора NMDA у ветеранов с ранними формами хронической ишемии мозга. Показано наличие у данных пациентов нарушений проницаемости гематоэнцефалического барьера с нарастанием процессов аутосенсибилизации к мозговым антигенам, что может являться одним из механизмов прогрессирования хронической ишемии мозга и прогноза срывов компенсации мозгового кровообращения у больных с прогрессирующим течением хронической ишемии мозга. С другой стороны определение нейроспецифических белков в системном кровотоке может быть перспективно именно для диагностики ранних стадий хронической ишемии мозга, когда другие объективные методы исследования могут быть малоинформативными.

В статье изложены данные о влиянии замещенных 1,3,4-тиадиазинов на изменение гематологических показателей крыс с аллоксановым диабетом. Установлено, что синтетическое соединение L-17 обладает способностью к коррекции гематологических нарушений у крыс с аллоксановым сахарным диабетом.

В условиях эксперимента на крысах показано, что хроническая физическая нагрузка умеренной и субмаксимальной мощности приводит к увеличению нейтрофилов с изменением их функциональной активности. При хронической физической нагрузке умеренной мощности происходит снижение хемотаксиса. Фагоцитарная функция изменяется неоднозначно – активность фагоцитоза растет, а интенсивность снижается. При хронической физической нагрузке субмаксимальной мощности показатели функциональной активности лейкоцитов остаются в пределах контрольных значений. 

В работе приведены результаты исследования, посвященные изучению возможности создания нового метаболического препарата (с использованием биологически активных веществ пробиотического штамма Bacillus subtilis B-3679) для применения в качестве профилактического и лечебного средства при воспалительных заболеваниях тканей и органов ротовой полости. Ранее метаболиты споровых пробиотических микроорганизмов практически не использовались для конструирования медицинских фармакологических препаратов.

Изучали роль хорионического гонадотропина (ХГ) и пептидных фрагментов его β-субъединицы (LQGV, AQGV, VLPALP) в регуляции экспрессии индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) активированными моноцитами человека в системе in vitro. Установлено, что ХГ (20 мкг/мл) стимулировал экспрессию IDO как в LPS-, так и в IFN-γ- индуцированных моноцитах. В то же время, пептиды AQGV, LQGV (20 мкг/мл) стимулировали только LPS-индуцированную экспрессию IDO, а пептид VLPALP (20 мкг/мл) стимулировал только IFN-γ-индуцированную экспрессию IDO. Одновременно, пептиды (AQGV, VLPALP), повышали продукцию IL-1β моноцитами в условиях LPS-стимуляции, в то время как ХГ не оказывал самостоятельного эффекта. В целом, как ХГ, так и пептидные фрагментов его β-субъединицы, повышали экспрессию IDO моноцитами, что вносит свой вклад в формировании периферической иммунной толерантности

Обследовано 95 пациентов в возрасте 18–60 лет с бронхиальной астмой, круглогодичным аллергическим ринитом без или в сочетании с пищевой аллергией. Исследовались IFN-g, IL-4, IL-17 и IL-22 в экссудатах «кожного окна». Выявлено существенное повышение содержания IL-22 при атопической патологии в сочетании с пищевой аллергией.

Представлены результаты изучения эффективности применения ультазвуковой кавитационной терапии у больных с искривлением носовой перегородки в раннем послеоперационном периоде. Методы исследования: микробиологические, иммунологические (оценка активности и интенсивности фагоцитоза, тест восстановления нитросинего тетразолия), биохимические (исследование интенсивности липопероксидации по уровню первичных, вторичных и конечных продуктов перекисного окисления липидов: диеновых коньюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов, оснований Шиффа в липидном экстракте), статистические. Показана положительная динамика функциональной и биохимической активности нейтрофильных гранулоцитов в назальных смывах у лиц, перенесших ринохирургическое вмешательство после ультразвуковой кавитационной терапии, что свидетельствует о наличии качественных и количественных изменений нейтрофильных гранулоцитов назального секрета, регистрируемых в реакциях кислородзависимого метаболизма, свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты при использовании метода ультразвуковой кавитационной терапии в раннем послеоперационном периоде.

Являясь иммунокомпетентными клетками, мастоциты имеют ряд свойств, характерных для клеток нервной системы, отчего их нередко рассматривают в качестве ключевых посредников между интегрирующими системами организма. Учитывая нарастающий интерес научного сообщества к проблеме противовоспалительной функции парасимпатической нервной системы, вопрос о регуляторном воздействии холинергических нервных волокон на работу тучных клеток изучен недостаточно. В качестве модели тучных клеток использовали клетки перевиваемой линии тучных клеток человека HMC-1. Результаты нашего исследования показали, что карбахол (Cch), функциональный аналог ацетилхолина (АХ), проявляет одновременно свойства либератора гистамина и супрессора IgG-индуцированной активации тучных клеток. Такое двойственное влияние нейромедиатора может указывать на наличие холинергического тонуса, поддерживающего возбуждение тучных клеток на определенном уровне. Показано, что модулирующее влиянии Cch на функциональную активность клеток линии HMC-1 реализуется через никотиновые ацетилхолиновые рецепторы (н-АХР). Полученные нами данные способствуют углублению представлений о механизмах негативной регуляции работы тучных клеток.

На основании экспрессии CD45RA, CD62L, CD27 и CD28 в периферической крови больных с хроническим впервые выявленным саркоидозом (n=46) были выделены субпопуляции цитотоксических Т-лимфоцитов, находившиеся на различных стадия дифференцировки. При хроническом саркоидозе отмечалось снижение относительного содержания CD3+CD8+ Т-лимфоцитов «не эффекторных» популяций – «наивных» клеток и клеток центральной памяти по сравнению группой контроля (n=46), тогда как TEMRA CD3+CD8+ клетки были повышены. В рамках ЕМ клеток отмечалось снижение уровня ЕМ1 клеток, тогда как среди TEMRA наблюдалось увеличение популяций рЕ2 и зрелых эффекторных клеток. Полученные результаты указывают на интенсификацию процессов созревания CD3+CD8+ лимфоцитов в лимфоидной ткани под постоянным антигенным воздействием.

Важную роль в канцерогенезе при ПВИ, как у женщин, так и у мужчин играет иммунная система. В данном исследовании с высокой установленной точностью классификации методом дискриминантного анализа было установлено, что у женщин из семейных пар с ВПЧ ВКР итоговая функция позволяет определить прогноз результативности элиминации вируса после проведенного лечения в результате подстановки значения функционального резерва нейтрофилов цервикальной слизи в функцию, при этом итоговый результат сравнивается со значениями центроидов 1,163 и –0,263, т. е. при большем значении последнего ВПЧ ВКР не обнаруживается (р<0,002). У мужчин из семейных пар при подстановке в аналогичную формулу функции данных абсолютной жизнеспособности нейтрофилов, функционального резерва нейтрофилов эякулята и вирусной нагрузки значения центроидов укладываются в значения 11,700 и –1,003 и ВПЧ ВКР не обнаруживается при большем значении итогового результата (p<0,001).

Проведенное исследование физиологических и иммунологических показателей у крысят в возрасте от 1 до 30 дней, родившихся от пассивно куривших крыс Вистар, выявило достоверное отставание их соматического и сенсомоторного развития. У крысят, родившихся от самок, подвергшихся пассивному курению, отмечено снижение массы тимуса, селезенки и числа спленоцитов.

Наше исследование фокусирует внимание на трансфорованном фенотипе нейтрофильных гранулоцитов (НГ), экспрессирующих рецепторы IFNα/βR1, IFNγR(CD119), TLR4, выявляемом у пациентов с различными хроническими герпес-вирусными инфекциями (ХГВИ) и изучении возможности регуляции негативно измененного фенотипа субпопуляции IFNα/βR1+IFNγR+TLR4+НГ периферической крови этих пациентов под влиянием глюкозаминилмурамилдипептида (ГМДП) в системе in vitro. Описаны особенности трансформированного фенотипа субпопуляции IFNα/ βR1+IFNγR+TLR4+НГ пациентов с ХГВИ в сравнении с нетрансформированным фенотипом этой субпопуляции НГ условно-здоровых лиц. Показано, что в группе пациентов с ХГВИ процент НГ, несущих молекулы IFNα/βR1 и IFNγR, достоверно выше, чем в контрольной группе условноздоровых лиц. Продемонстрировано, что количество TLR4+НГ у пациентов с ХГВИ имело место четкое разделение TLR4+НГ на две группы, показатели которых различались между собой с высокой степенью достоверности различий и достоверно отличались от уровня TLR4+НГ контрольной группы. При этом в одной группе число НГ, экспрессирующих рецепторы к TLR4, было ниже чем в контрольной группе условно-здоровых лиц, а в другой группе – выше. У пациентов с ХГВИ под влиянием ГМДП количество НГ, экспрессирующих на поверхностной мембране рецепторы к IFNα/βR1 и IFNγR уменьшилось. Снизилось также число TLR4+НГ обеих групп до одного уровня, который был существенно ниже, чем в контрольной группе. Кроме того, ГМДП достоверно увеличил плотность экспрессии молекул IFNα/βR1 на мембране НГ, умеренно уменьшил плотность экспрессии IFNγR, и не изменил плотность экспрессии TLR4 на НГ у пациентов с ХГВИ.

Обследованы дети 6–17 лет с ювенильным идиопатическим артритом (ЮИА): 74 больных в стадии активности заболевания и 14 пациентов c ремиссией получали болезнь-модифицирующую терапию, 12 детей со стойкой ремиссией и 32 здоровых ребенка (контроль) не получали лечение. Методом проточной цитометрии исследовано количество CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, СD3+СD4– СD8–, СD3+СD4+СD8+, СD3+СD16/56+, СD3+СD4+СD25+СD127low/neg и СD3+СD4+СD25+СD127+ в периферической крови. У всех пациентов с ЮИА было снижено количество регуляторных Т-клеток (СD3+СD4+СD25+СD127low/neg) и дубль-позитивных Т-клеток (СD3+СD4+СD8+) по сравнению с контролем. У больных с активной стадией ЮИА и медикаментозной ремиссией также наблюдалось снижение количества Т-натуральных киллеров (СD3+СD16/56+).

В статье представлена оценка системного уровня фактора некроза опухоли α, интерферона γ, интерлейкина-4, интерлейкина-10, матриксной металлопротеиназы-9 и тканевого ингибитора-1 типа у больных с посттравматическим остеомиелитом и неосложненными переломами нижней челюсти. В ходе исследования определены показатели системы про- и противовоспалительных цитокинов, свидетельствующие об их существенной роли в иммунопатогенезе посттравматического остеомиелита нижней челюсти. Выявлены дополнительные маркеры диагностики посттравматического остеомиелита нижней челюсти (ФНОα, ИФНγ, ИЛ-10), определение которых в начале терапии и в динамике ее проведения позволят наиболее персонифицированно подойти к тактике ведения этой категории больных.

Целью работы явилось изучение зависимости респираторного взрыва нейтрофилов от активности NAD(P)-зависимых дегидрогеназ у больных хроническими эндометритами и аднекситами. Обследовано 89 женщин репродуктивного возраста с хроническим эндометритом и аднекситом. В качестве контроля обследовано 98 здоровых женщин аналогичного возраста. Состояние респираторного взрыва нейтрофильных гранулоцитов исследовали с помощью хемилюминесцентного анализа. Исследование активности NAD(P)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах проводили с помощью биолюминесцентного метода. При хроническом эндометрите обнаружена высокая интенсивность респираторного взрыва нейтрофилов, которая определяется повышением уровня синтеза первичных и вторичных активных форм кислорода (АФК). У больных хроническим аднекситом респираторный взрыв нейтрофилов реализуется при дисбалансе синтеза первичных и вторичных АФК: при сниженной активности NADPH-оксидазы наблюдается высокий уровень синтеза вторичных АФК. Метаболизм нейтрофилов у женщин с инфекционно-воспалительными заболеваниями органов малого таза характеризуется высоким уровнем липидного обмена и NAD-зависимого субстратного потока между реакциями цикла трикарбоновых кислот и аминокислотного обмена. Особенностью метаболизма нейтрофилов при хроническом эндометрите является высокая активность малатдегидрогеназы. Характерными особенностями метаболизма нейтрофильных гранулоцитов у больных хроническим аднекситом являются снижение интенсивности анаэробного гликолиза и NADP-зависимого субстратного обмена между реакциями цикла трикарбоновых кислот и аминокислотного обмена. При хроническом эндометрите взаимосвязи между показателями респираторного взрыва и метаболизма нейтрофилов отражают ингибирующее влияние анаэробной реакции лактатдегидрогеназы на индуцированный синтез первичных АФК. У женщин с хроническим аднекситом респираторный взрыв нейтрофилов зависит от активности NADP-зависимых дегидрогеназ, но при выраженном влиянии ферментов энергетического профиля. Также характерной особенностью при хроническом аднексите является стимулирующее влияние на синтез первичных АФК активности глутатионредуктазы. Определение механизмов метаболической регуляции респираторного взрыва нейтрофилов позволяет охарактеризовать регуляторные аспекты иммунопатогенеза инфекционно-воспалительных заболеваний и может явиться основой для разработки новых методов иммунометаболической терапии.

В статье освещена возможная роль аллерген-ассоциированных молекулярных паттернов в формировании перекрестной сенсибилизации, а также роль других факторов в патогенезе и выборе тактики лечения больных с астмой и другими атопическими аллергическими заболеваниями методом аллерген-специфической иммунотерапии.

Восстановление пула инсулинсинтезирующих клеток посредством модуляции макрофагальной активности может быть перспективным направлением в лечении сахарного диабета. У крыс при моделировании сахарного диабета 2 типа (110 мг/кг никотинамида и 65 мг/кг стрептозотоцина) наблюдали спонтанное компенсаторное увеличение количества внеостровковых инсулинсинтезирующих клеток до 30 суток, сменяющееся уменьшением массы этих клеток к 60 суткам без усиления их функциональной активности. Модуляция активности макрофагов при введении аминофталгидразида (2 мг/кг, 20 инъекций) диабетическим крысам сопровождалась увеличением количества внеостровковых инсулиноцитов, накоплением инсулина во всех исследованных группах этих клеток и снижением гипергликемии.

Изучали роль самостоятельного эффекта TCR-активации в формировании малых субпопуляций Т-лимфоцитов-хелперов – Treg, TCM, TEM, TEMRA. Показано, что в условиях TCR-активации происходило перераспределение пулов клеток в пользу эффекторных субпопуляций (TEM, TEMRA), одновременно снижалось количество наивных Т-клеток и TCM. В отношении Treg продемонстрировано, что TCR-активация клеток приводила к повышению внутриклеточной экспрессии FOXP3, HELIOS, CTLA-4. В целом, присутствие TCR-активатора приводит к повышению количества эффекторных Т-хелперов, которое сопровождается одновременным повышением уровня супрессорных Treg.

В работе приведены результаты исследования супернатантов суточных бульонных культур Staphylococcus aureus по определению в них цитокино-подобных веществ (INF-γ, INF-α, IL-1Ra, IL-1, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17а, TNF-α) методом иммуноферментного анализа с применением наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург), а также методом мультиплексного анализа с использованием иммунофлюоресцентных тест-систем компании БиоРад (США) и Multiplex (Luminex, США). Установлено, что в супернатантах некоторых штаммов Staphylococcus aureus выявлялись цитокино-подобные вещества (INF-γ, IL-1Ra, IL-1β и TNF-α) обоими методами (иммуноферментным и иммунофлюоресцентным), тогда как IL-6, IL-8, IL-10 и IL-17а определялись только иммунофлюоресцентным методом, а INF-α – только иммуноферментным. Отмечено, что часть цитокино-подобных веществ (IL-1Ra, TNF-α) в большей концентрации определялись методом иммунофлюоресцентного анализа, а INF-γ и IL-4 – методом иммуноферментного анализа.

Проблема часто и длительно болеющих детей, страдающих рецидивирующими острыми респираторными инфекциями, остается актуальной проблемой и сегодня. Нами изучена структура заболеваемости детей раннего возраста, научно обоснован, разработан и применен алгоритм формирования групп детей, часто и редко болеющих респираторными инфекциями, с использованием ан ке ты-ин тер вью и критериев, полученных при проведении дискретно-динамичес ко го анализа, а также на основе проведенного кли ни ко-иммунологического исследования. Показана возможность использования прогностических таблиц, полученных при проведении дис крет ноди на ми чес ко го анализа, для выявления детей из группы риска по развитию возвратных респираторных инфекций для дальнейшей ранней профилактики возвратных респираторных инфекций и иммунореабилитации.

Полифункциональность нейтрофильных гранулоцитов (НГ) является результатом богатой экипировки НГ структурами, тонко реагирующими на изменения экстрацеллюлярного окружения и внутриклеточных процессов. В настоящее время идет волна публикаций, отмечающих важность полноценного участия НГ в каскаде иммунологических реакций. При этом авторы отводят ключевую роль именно НГ как при запуске, так и последующей регуляции и реализации иммунного ответа. Показано существование различных популяций НГ, отличающихся по профилю оснащения мембранными антигенами и проявляющих различные фукциональные возможности. Целью настоящего исследования явилось изучение влияний рекомбинантного ИФНα2b (rIFNα2b) на нетрансформированную и экспериментально трансформированную в системе in vitro CD16+CD66b+CD33+CD11b+ субпопуляцию НГ в образцах периферической крови ус лов но-здо ро вых детей. Уровень экспрессии мембранных рецепторов НГ определяли методом проточной цитометрии. Проведена оценка изучаемых показателей нетрансформированных НГ (контроль) и НГ после инкубации с rIFNα2b и N-формил-метионил-лейцил-фенилаланином (fMLP). Установлено иммунорегуляторное влияние rIFNα2b на нетрансформированный фенотип CD16+CD66b+CD33+CD11b+НГ и иммуномодулирующие эффекты rIFNα2b в отношении fMLP-трансформированного фенотипа НГ периферической крови условно-здоровых детей.

Представлены результаты сравнительной оценки влияния секреторных продуктов нейтрофилов, предварительно подвергшихся воздействию моделированным низкоинтенсивным электромагнитным излучением природного и антропогенного (техногенного) происхождения, на биопленкообразующую способность микроорганизмов, выделенных из ротовой полости лиц, использующих стоматологические ортопедические конструкции. Установлено, что электромагнитное излучение как природное, так и техногенное оказывает дифференцированное воздействие на функционирование нейтрофильных гранулоцитов. Оно проявляется в дифференцированном влиянии указанных излучений на процессы биопленкообразования стрептококков, стафилококков, кишечной палочки и лактобактерий. Полученные результаты открывают перспективы разработки мер профилактики и коррекции инфекционных процессов в ротовой полости с применением низкоинтенсивного ЭМИ.

В работе освещены результаты экспериментальной оценки воздействия пептидосодержащего вещества и кремнийцинксодержащего глицерогидрогеля на модели гриппозной инфекции. Объекты исследования, белые беспородные мыши, которые в период заражения, интраназально получали вышеописанные вещества по схеме. В итоге, при анализе выживаемости, на начальном этапе, наилучший результат был обнаружен в группе мышей с пептидсодержащим веществом.