Том 27, № 2 (2024)
- Год: 2024
- Дата публикации: 12.08.2024
- Статей: 41
- URL: https://rusimmun.ru/jour/issue/view/33
Весь выпуск
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
Генетическая модификация первичных В-клеток человека для моделирования процессов в зародышевых центрах
Аннотация
Основные этапы созревания антиген-специфических В-клеток протекают в герминативных центрах лимфоузлов. Здесь наивные В-клетки проходят процесс соматического гипермутагенеза, а также переключение классов синтезируемых антител. В процессе дифференцировки принимается решение, по какому пути В-клетки будут развиваться далее. Они либо превратятся в короткоживущие плазмабласты, либо в В-клетки памяти или плазматические клетки. Взаимоотношение этих процессов очень важно для развития продуктивного гуморального иммунного ответа. Имеется насущная необходимость в более детальном изучении отмеченных процессов. Целью работы являлось создание системы, которая ex vivo способна моделировать процессы, протекающие в герминативных центрах. В качестве исходного материала мы использовали первичные В-клетки из периферической крови человека. После иммуномагнитной сепарации В-лимфоциты стимулировали in vitro с помощью фидерных клеток, несущих молекулы CD40L. Другим стимулирующим фактором являлся рекомбинантный растворимый IL-21. При IL-21/CD40L стимуляции В-лимфоциты изменяли свою морфологию, поверхностный фенотип, а также функциональную активность. После активной экспансии в течении 10 дней дальнейший рост клеток останавливался, и через некоторое время они погибали. Для получения стабильно пролиферирующих В-клеток мы использовали лентивирусную трансдукцию IL-21/CD40L стимулированных IgM+ В-лимфоцитов. Для этого были получены препараты лентивируса, которые несли кассету, состоявшую из генов BCL6 и BCL2L1, разделенных последовательностью кодирующей саморазрезаемый пептид P2A, а также репортерный ген GFP, отделенный от целевых генов элементом IRES. Использованная кассета обеспечивала в клетках-мишенях синтез транскрипционного фактора Bcl-6 и белка Bcl-XL. Репрессор Bcl-6 не позволял В-клеткам уходить в терминальную дифференцировку и превращаться в плазматические клетки, а белок Bcl-XL оказывал анти-апоптотическое действие. Трансдуцированные В-клетки пролиферировали более месяца и сохраняли фенотип плазмабластов. При этом через 42 дня после начала стимуляции трансдуцированные В-клетки оставались GFP-позитивными, коэкспрессировали антигены CD27 и CD38, несли поверхностный CD20 и IgM, внутриклеточный Bcl-6, Bcl-XL и IgM, сохраняли секрецию IgM, но оставались негативными по поверхностному и внутриклеточному IgG. Таким образом, длительное культивирование В-клеток не приводило к переключение класса синтезируемого Ig. Отработанная система стимуляции позволит имитировать ключевые аспекты развития В-клеток в зародышевых центрах для изучения формирования В-клеточной памяти, что в конечном счете будет способствовать разработке эффективных вакцин.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Цибридные линии на основе THP-1 с различным митохондриальным геномом имели разный провоспалительный ответ
Аннотация
Большинство возрастных заболеваний человека сопровождается хроническим воспалением. Современные исследования направлены на изучение принципов формирования иммунного ответа. До сих пор не известны причины, по которым локальная воспалительная реакция не может разрешиться и переходит в вялотекущую хроническую форму. Врожденный иммунитет первым отвечает на вторжение патогенам. Важной составляющей воспалительной реакции является секреция иммунными клетками провоспалительных цитокинов, таких как TNFα, IL-1β, IL-6, IL-8, CCL2. Это необходимо для рекрутирования в очаг воспаления иммунокомпетентных клеток. Чтобы избежать гибели клеток в результате высоких концентраций цитокинов и, как следствие, повреждения ткани, существует механизм толерантности врожденного иммунитета. Толерантность врожденного иммунитета заключается в снижении секреции провоспалительных цитокинов в ответ на повторное влияние патогена. Известно, что в формировании иммунного ответа важную роль играют митохондрии. Следовательно, нарушения в функционировании митохондрий могут приводить к нарушениям иммунного ответа. Чтобы избежать накопления дефектных митохондрий в клетке, существует контроль качества митохондрий. Митофагия, являясь специализированной формой аутофагии, очищает клетку от дисфункциональных митохондрий. Ранее нашей лаборатории удалось разработать цибриды. Это линии, которые были получены на основе моноцитарной клеточной линии THP-1, в которой предварительно убрали митохондрии. Чтобы получить цибриды, получившиеся безъядерные клетки THP-1 кокультивировали с тромбоцитами от пациентов. Таким образом, цибриды несут в себе ядерный геном THP-1 и митохондриальный геном пациента. В нашем исследовании мы решили изучить способность клеток, несущих разный митохондриальный геном, генерировать провоспалительный ответ, а также формировать толерантность в дальнейшем. Для это мы выбрали модель толерантности к экдотоксину. Толерантность к эндотоксину или липополисахариду определяется как резистентное, противовоспалительное состояние в ответ на вторичную дозу липополисахариду после первичного воздействия. Таким образом, мы дважды стимулировали цибридные линии липополисахаридом и после этого оценивали секреции цитокинов TNFα, IL-1β, IL-6, IL-8, CCL2 с помощью ИФА. Цибриды демонстрировали два уровня провоспалительного ответа: высокий и низкий. Более того, цибриды с высоким провоспалительным ответом либо формировали, либо не формировали толерантность при повторной стимуляции. В результате исследования мы установили, что клетки, различающиеся по митохондриальному геному, отличались друг от друга по своему иммунному ответу. Будущие исследования улучшат наше понимание механизмов участия митохондрий в патологических процессах. Вероятно, что исследования недостаточной митофагии и роли определенных мутаций мтДНК в ее развитии принесут многообещающие результаты.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Экспериментальная модель легочного фиброза у мышей, индуцированная посредством аэрозольной доставки LPS
Аннотация
Повреждение легких, вызванное воздействием липополисахарида (LPS), является наиболее часто используемой моделью острого воспаления легочной ткани у мышей, что позволяет имитировать развитие синдрома респираторного расстройства у человека. Эффекты индуцированного экспериментального острого LPS-зависимого воспаления дыхательных путей хорошо изучены и связаны с накоплением нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости (БАЛ), локальной и системной продукцией провоспалительных цитокинов, а также сужением просвета дыхательных путей. В последнее время появляется все больше исследований, показывающих наличие признаков легочного фиброза, таких как усиленная пролиферация фибробластов и избыточное отложение внеклеточного матрикса на поздних стадиях острого воспаления легких, вызванного воздействием LPS. В данной работе описана экспериментальная модель острого повреждения легких, индуцированная с помощью однократного аэрозольного введения LPS в качестве воспроизводимой in vivo модели легочного фиброза. Для этого мышей линии C57BL/6 помещали в камеру, и с помощью распылителя Aeroneb Lab Nebulizer подвергали воздействию аэрозоля, содержащего 10 мг LPS.
Было установлено, что через 5 недель после однократного ингаляционного введения LPS мыши демонстрировали повышенную продукцию IL-6 в БАЛ. Несмотря на то, что количество нейтрофилов не изменялось, на 5-й неделе после воздействия LPS происходило снижение процентного содержания альвеолярных макрофагов, что может свидетельствовать о продолжающемся локальном воспалении. В то же время доставка LPS с помощью аэрозольной установки, спустя несколько недель, приводило к увеличению продукции и экспрессии ключевых медиаторов фиброза, таких как повышенной продукции IL-10 в БАЛ, увеличенной экспрессии Tgfb1, Col1a1, Il13 и Acta2, а также отложению коллагена в легочной ткани по сравнению с мышами с острым воспалением легких.
Таким образом, использование метода однократного введения LPS с помощью небулайзера представляет собой релевантную, воспроизводимую и физиологичную модель на мышах, что в дальнейшем позволит исследовать механизмы развития фиброза легких и поможет в поиске новых терапевтических средств и подходов.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Сурфактантная система легких при антифосфолипидном синдроме в условиях введения иммуносупрессора FTY-720
Аннотация
Антифосфолипидный синдром (APS) является тромбофилическим заболеванием, в патогенезе которого ведущая роль принадлежит антителам, реагирующим с антигенными детерминантами фосфолипидов. APS – это системная аутоиммунная патология, которая вовлекает в патологический процесс многие органы и системы, в том числе и дыхательную систему. Учитывая тот факт, что сурфактант легких представлен в основном фосфолипидами, можно предположить повреждение сурфактанта и нарушение его функционирования при APS. В работе показана эффективность применения терапии данной аутоиммунной патологии иммуносупрессором FTY-720, который представляет собой структурный аналог эндогенного сфингозина. Действие препарата основано на модуляции сфингозин-1 фосфатных рецепторов лимфоцитов. Основным эффектом иммуносупрессора FTY-720 в результате рецепторного взаимодействия является снижение количества циркулирующих лимфоцитов. Исследования были проведены на 85 белых беспородных крысах-самцах: 1-я группа (моделирование APS) состояла из 30 крыс, которым внутривенно вводили кардиолипиновый антиген в суммарной дозе 0,2-0,4 мг на крысу через день в течение трех недель, 2-я группа (контроль) состояла из 25 крыс, которым вводили 0,9%-ный раствор NaCl по той же схеме; в 3-ю группу вошло 30 крыс, которым APS сочетали с введением иммуносупрессора FTY-720 (внутрибрюшинно 1 мг/кг массы животного). Через 3 недели с целью извлечения бронхолегочного комплекса производилось оперативное вмешательство, которое осуществляли под наркозом («Золетил» 0,5 мг/кг). После извлечения бронхолегочного комплекса осуществлялся его трехкратный лаваж 0,9%-ным раствором NaCl. Материалом экспериментального исследования служила лаважная жидкость, в которой изучали биофизические и биохимические показатели сурфактанта. Используя метод Ленгмюра-Блоджетта, определяли статистическое, минимальное и максимальное поверхностное натяжение. Исходя из данных величин рассчитывали интегративный показатель, отражающий поверхностно-активные свойства сурфактанта – индекс стабильности по Clements. Методом тонкослойной хроматографии определяли фракционный состав фосфолипидов сурфактанта. Результаты наших экспериментов показали, что при антифосфолипидном синдроме наблюдалось ухудшение функциональной активности сурфактанта и изменение его биохимического состава. Введение FTY-720 нормализовало параметры сурфактантной системы легких, измененные при моделировании антифосфолипидного синдрома.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Авидин-позитивные тучные клетки печени при воздействии водорастворимого кремния в течение девяти месяцев
Аннотация
Тучные клетки за счет содержащихся в них медиаторов – активные участники различных процессов, происходящих в организме. Изучена реакция авидин-позитивных тучных клеток печени на поступление кремния с питьевой водой в концентрации ٢٠ мг/л в течение девяти месяцев.
Эксперимент проведен на лабораторных нелинейных крысах-самцах, которые были разделены на две группы: контрольная получала питьевую бутилированную воду с концентрацией кремния 10 мг/л, опытная – ту же самую воду, но с добавлением девятиводного метасиликата натрия, которая использовалась для доведения общей концентрации кремния в питьевой воде до 20 мг/л. Массовая концентрация кремния в воде контрольной и опытной групп была определена с помощью спектрометра эмиссионного с индуктивно связанной плазмой 5110 ICP-OES. Через девять месяцев животные были выведены из эксперимента, печень извлечена и помещена в 10% нейтральный формалин для последующей заливки в парафин. Срезы печени толщиной 6 мкм после депарафинизации инкубировались 30 минут с авидином, меченным флуоресцентной меткой зеленого цвета (Avidin, Alexa Fluor® 488 conjugate, Invitrogen, Германия). Препараты анализировались под люминесцентным микроскопом при длине волны возбуждающего света 495 нм.
По результатам исследования в печени крыс опытной группы обнаружено увеличение количества авидин-позитивных тучных клеток за счет слабо флуоресцирующих, а также увеличение медианы их площади и интенсивности флуоресценции. Выявлено, что изменение медианы площади авдини-позитивных тучных клеток в печени крыс опытной группы идет за счет уменьшения количества клеток малого размера и увеличения количества клеток среднего и большого размера. Установлены прямая сильная и прямая средняя корреляционные связи между площадью клетки и ее интенсивностью в контрольной и опытной группах соответственно.
Таким образом, проведенное исследование позволило расширить данные о воздействии водорастворимого кремния на печень и косвенно предположить о возникновении воспалительных процессов в изучаемом органе.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Анализ элементного состава костной ткани челюсти крысы в модели пародонтита
Аннотация
Элементный состав костной ткани челюсти зависит от множества внешних и внутренних факторов, влияющих на организм. При пародонтите воспалительные процессы охватывают мягкие и костные ткани, окружающие зуб. Структура костной ткани напрямую отражает ее способность сдерживать воспаление и регенерировать после воздействия повреждающих факторов.
Цель исследования – изучить элементный состав костной ткани челюсти крысы при хроническом воспалительном процессе пародонта. В ходе эксперимента моделировали пародонтит у лабораторной крысы линии Wistar путем введения инсулиновой иглы в десневой край нижней челюсти крысы и последующим ее извлечением через неделю. Спустя месяц особь вывели из эксперимента передозировкой эфира для выделения исследуемого костного сегмента. Далее изучение образца костной ткани осуществляли методом атомно-эмиссионной спектроскопии.
В исследуемом сегменте костной ткани определено 67 химических элементов в количественном диапазоне до 10-4 массовых процентов. Самая высокая массовая доля принадлежит базовым элементам костной ткани: кальцию, фосфору, магнию, натрию и сере, поступление которых обеспечивается за счет питательных веществ, при этом в течение эксперимента животные получали стандартный полнорационный комбикорм, в котором содержалось приближенное к норме количество белков, витамина D, Са, P и Se. В изучаемом образце костной ткани количественное соотношение Са/Р составило 1,685, что незначительно превышает оптимальное. Повышение данного показателя связано с уменьшением содержания фосфора в костной ткани, что можно объяснить недостаточным суточным поступлением этого элемента с пищей, а также с рядом местных факторов. При травматизации челюсти в ходе моделирования пародонтита в данной области протекает воспалительный процесс, экспериментальное животное испытывает стресс, что приводит к деминерализации тканей альвеолярного отростка челюсти, о чем свидетельствует понижение содержания фосфора и селена в составе костной ткани. Кроме того, элементный анализ показал наличие инородных элементов в составе костной ткани, количество которых соответствует интервалу от 0,001% до 0,06%. В основном это элементы, образующие простые вещества – металлы: висмут, галлий, свинец, иридий, титан, цинк, ртуть, молибден. Перечень этих металлов соответствует химическому составу инсулиновой иглы, контактирующей с костной тканью при травматизации на протяжении недели.
Полученные результаты исследования могут быть учтены при планировании и проведении полиэтиотропной терапии воспалительно-дистрофических заболеваний пародонта еще на ранних стадиях их развития, когда видимые клинические проявления заболевания в полости рта минимальны.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Влияние белков целомической жидкости голотурий с поверхностной раной на активность фагоцитов
Аннотация
Голотурии являются одними из наиболее способных к регенерации животных. Их фагоциты являются аналогами макрофагов, которые играют ключевую роль в регуляции заживления ран, но механизмы участия фагоцитов в ранозаживлении не изучены. Целью работы явилось выяснение влияния отдельных белковых компонентов, выделенных из целомической жидкости голотурии Eupentacta fraudatrix с поверхностными повреждениями стенки тела, на уровень функциональной активности двух типов фагоцитов (Ф1 и Ф2).
Белковые компоненты целомической жидкости голотурий с поверхностным ранением стенки тела анализировали и собирали методом гель-проникающей хроматографии. Использовали белки, содержание которых значительно менялось в период заживления в предварительных опытах. Два белка и пептид добавляли к выделенным методом градиентного центрифугирования фагоцитам одновременно с термостабильным токсином Yersinia pseudotuberculosis и инкубировали 24 ч. Продукцию супероксиданион-радикала определяли по восстановлению нитросинего тетразолия (НСТ) колориметрическим методом. Для оценки специфичности действия белков в качестве внутреннего контроля использовали бычий сывороточный альбумин (БСА). В 24 ч опытах in vivo белки вводили раненым животным.
Два белка, при сравнении с действием БСА, не проявили специфичного влияния на продукцию активных форм кислорода в фагоцитах in vitro. Однако сравнение действия пептида на оксидантную активность и жизнеспособность фагоцитов с таковыми БСА выявило специфичность его действия. При этом пептид снижал оксидантную активность Ф1-фагоцитов и повышал ee в Ф2-фагоцитах в прямой концентрационной зависимости. Введение одного из двух белков раненым голотуриям вызывало разнонаправленное концентрационно-зависимое действие на оксидантную активность фагоцитов двух типов, с преимущественным подавлением активности Ф1-фенотипа. Исследованные белки разнонаправленно влияли на концентрацию целомоцитов у раненых голотурий, что указывает на их способность влиять на рекрутирование фагоцитов. Способность белковых компонентов вызывать сдвиг в соотношении оксидантной активности двух типов фагоцитов в сторону преимущественной активизации Ф2-фагоцитов, являющихся функциональными аналогами М2-макрофагов, позволяет предположить, что их действие носит антивоспалительный характер.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
К вопросу о экспериментальном моделировании инвазий и перспективы применения иммуностимуляторов при нематодозах
Аннотация
В настоящее время актуален поиск путей преодоления лекарственной устойчивости к антигельминтикам. Данная проблема решается за счет ограничения длительности применения препаратов с одинаковым механизмом действия и комбинированием антигельминтиков. Представленные в статье исследования показали, что также весьма перспективно применение иммунотропных препаратов.
Для экспериментального моделирования инвазий Trichinella spiralis, Trichinella nativа использовали 40 белых мышей, 20 белых крыс. Были изучены изменения в лимфоидной ткани, ассоциированной в кишечнике, в селезенке, а также в периферической крови животных и птиц при инокуляции вышеуказанных видов. Далее, на отработанных моделях инвазий Trichinella spiralis исследовали влияние препаратов с иммунотропной активностью, для чего использовали использовали 30 белых мышей (массой 20,5±2,5 г) которые были рандомизированы и распределены на группы. Оценка протективных свойств иммунотропных препаратов при трихинеллезе осуществлялась на лабораторных моделях по определению приживаемости при исследованиях после эвтаназии всех мышей и подсчитывания количества личинок трихинелл. Оба эксперимента были проведены в соответствии с принципами Хельсинкской декларации. После выведения лабораторных животных из эксперимента (в соответствии с принципами вышеуказанной декларации) проводили макро- и микроанатомические исследования и забор гистологического материала (комплектов кишечника и селезенок) для качественной и количественной оценки.
Вышесказанное подтверждается тем, что в паразитологических исследованиях установлена высокая эффективность полиоксидония в отношении приживаемости личинок трихинелл, которая сопровождалась увеличением площади лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником и белой пульпы селезенки, в которой разрастались лимфоидные фолликулы. Таким образом, полиоксидоний является эффективным препаратом, который можно использовать при комплексном лечении нематодозов, как иммунотропное средство.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Изучение противовоспалительной активности супернатантов Bifidobacterium bifidum и клеток куриного эмбриона на модели описторхозной инвазии
Аннотация
Морфологические изменения печени, как основного органа, в котором локализуется Opisthorchis felineus, по данным литературы характеризуются значительными структурными изменениями. Так же недавние исследования показывают, что инфекция O. felineus модифицирует иммунную реактивность за счет увеличения синтеза супрессоров иммунного ответа IL10 и TGF-β и снижения уровня провоспалительных маркеров IL-4, IL-5. Эксперимент проведен на 15 сирийских золотых хомячках (Mesocricetus auratus) в возрасте от 4 до 6 недель. Животные были разделены на 3 равные группы. Длительность наблюдения составила 24 дня. Живые метацеркарии Opisthorchis felineus были выделены из зараженной рыбы семейства карповых. Заражение проводилось путем их перорального введения (доза заражения – 50 метацеркариев). Животным в экспериментальных группах при заражении метацеркариями внутрибюшинно параллельно вводили 1 мл исследуемых супернатантов. Гистологический материал обработан стандартными методами. Гистологические препараты исследованы методами светооптической микроскопии с иммерсией, видеомикроскопии с морфометрией. В результате исследования установлено, что в острую фазу описторхоза преобладает общая инфильтрация области портального тракта. Клеточный состав инфильтратов характеризовался наличием лимфоцитов, макрофагов, фибробластов, эпителиоидных клеток и клеток инородных тел. Описанные изменения клеток связаны с локальным снижением доступа кислорода к гепатоцитам периферической зоны дольки из-за их сдавления фиброзной тканью. В печени экспериментальных групп отмечались лишь тканеспецифические изменения, а поражения гепатоцитов были наименее выраженные в группе с введением супернатанта B. bifidum. Цитокиновый профиль в контрольной группе соответствовал Th1-варианту. В экспериментальной группе 1 при применении супернатанта B. bifidum в сравнении с контролем в 4 раза уменьшалась способность лимфоцитов продуцировать основной провоспалительный цитокин – TNFα, также супрессирующий эффект наблюдался в отношении IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, IFNγ. Вместе с тем наблюдалось угнетение продукции основного противовоспалительного цитокина IL-10, при этом в сравнении с контролем увеличивается уровень IL-4, IL-5. При применении супернатанта клеток куриного эмбриона, мы наблюдали схожие результаты с 1-й группой: супрессирующий эффект в отношении провоспалительных и активацию продукции противовоспалительных цитокинов. Уровень IL-17 снижался в обеих экспериментальных группах. Активация продукции противовоспалительных цитокинов в обеих экспериментальных группах модулирует иммунный ответ в сторону Th2, что способствует блокированию воспалительных эффектов.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Моделирование in situ и in silico гемопоэзиндуцирующего влияния хелидоновой кислоты
Аннотация
Современным трендом регенеративной медицины, в условиях старения населения, является поиск новых путей и средств для оптимизации биоинженерии тканей. Одной из удобных моделей для in situ изучения регенерации костного мозга является тест подкожного эктопического остеогенеза на скаффолдах, имитирующих архитектонику костной ткани. Хелидоновая кислота (ХК) представляет собой малую молекулу, способную участвовать в разнообразных клеточных процессах и метаболических путях и активировать остеогенную дифференцировку мезенхимных стволовых клеток. Однако молекулярные механизмы регуляторных эффектов ХК до сих пор неизвестны.
Целью данного исследования была оценка модулирующего влияния ХК на in situ формирование очагов кроветворения, а также in silico прогнозирование генов-мишеней и внутриклеточных сигнальных путей, которые могут участвовать в реализации гемопоэтический активности тестируемой субстанции.
Водный раствор ХК, выделенной из экстракта растения Saussurea controversa. Курсовое (ежедневное в течение 35 дней) пероральное введение ХК. Тест эктопического остеогенеза на мышах линии Balb/c. Морфометрический анализ гистологических срезов через 45 суток. Моделирование экспрессии генов in silico. Статистический анализ.
ХК при курсовом пероральном введении в малой дозе (10 мг/кг) троекратно увеличивает удельную площадь костного мозга в составе костных тканевых пластинок, выросших in situ в тесте эктопического подкожного остеогенеза на мышах. Гемостимулирующий эффект субстанции прогностически значимо (вероятность активности Pa > 0,5 и вероятность неактивности Pi < 0,5) связан с усиленной экспрессией 358 генов-регуляторов кроветворения по данным in silico исследования. Топ-лист с наибольшим значением Pa включал 10 целевых генов: GATA1, CITED2, SFRP1, EP300, LGALS9, VNN1, IL10RB, RARA, CD83, HMOX1.
ХК обладает существенной способностью усиливать репаративное ремоделирование кроветворной ткани in situ. Следующим этапом исследований является проверка реальных генов-мишеней и сигнальных путей, реализующих регуляторное влияние ХК на гемопоэз in vitro, in vivo и в клинике.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Влияние эндоморфинов-1, 2 на особенности поглощения глюкозы Т- и В-лимфоцитами in vivo
Аннотация
Основным способом лечения болевого синдрома является применение морфина и его аналогов, обладающих широким спектром побочных эффектов. В связи с этим, многие современные исследования направлены на поиск более безопасных анальгезирующих соединений. В настоящее время, среди аналогов морфина большое внимание уделяется эндогенным опиоидным пептидам, которые вместе с анальгетическим эффектом обладают выраженными иммунорегуляторными свойствами. В настоящее время известно, что функциональная активность иммунных клеток обеспечивается метаболизмом. Данный процесс снабжает клетки энергией, необходимой для активации, дифференцировки, пролиферации, апоптоза и др. Ключевую роль в обеспечении функций иммунных клеток играет метаболизм глюкозы. Цель настоящей работы – оценить влияние эндоморфинов-1, 2 на особенности поглощения глюкозы Т- и В-лимфоцитами in vivo. Объектом исследования являлись белые мыши самцы, пептиды вводились мышам внутрибрюшинно в дозе 100 мкг/кг, поглощение глюкозы клетками оценивали с использованием флуоресцентных аналогов глюкозы (2-NBDG). Установлено, что эндоморфин-1 не влиял на интенсивность потребления глюкозы как в Т-, так и в В-клетках. Введение животным эндоморфина-2, напротив, приводило к существенному усилению поглощения глюкозы в Т-лимфоцитах. При этом уровень потребления глюкозы в В-клетках после введения эндоморфина-2 значительно не изменялся. При исследовании двух субпопуляций Т-лимфоцитов было отмечено, что эндоморфин-2 приводит к увеличению потребления глюкозы как в CD4+, так и в CD4-Т-клетках. Введение эндоморфина-1 не оказало существенного влияния на уровень поглощения этого субстрата в обеих субпопуляциях Т-лимфоцитов. Пролиферирующие В-лимфоциты, в отличие от покоящихся клеток, после введения эндоморфина-2 усиливали потребление глюкозы в присутствии LPS. Оба эндоморфина на потребление глюкозы в пролиферирующих CD4+ и CD4-Т-клетках существенного влияния не оказали.
Таким образом, эндоморфин-1, в отличие от эндоморфина-2, не оказывает существенного влияния на метаболизм глюкозы в Т- и В-клетках. Принимая во внимание роль гликолиза в функционировании иммунных клеток и реализации воспаления, можно заключить, что применение эндоморфина-1 может быть сопряжено с меньшим риском возникновения побочных эффектов, связанных с иммунной системой.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Механизмы RORα-зависимых эффектов мелатонина
Аннотация
Транскрипционному фактору RORα традиционно не приписывали принципиальной роли в развитии клеток Th17, однако недавними исследованиями показано, что он необходим для формирования патогенного варианта клеток Th17 – так называемых Th1-поляризованных Th17 (Th17.1). Поскольку транскрипционная активность RORα зависит от связывания лиганда, высокую актуальность имеет поиск таких лигандов, и в этой связи особый интерес представляет мелатонин – вопрос о способности RORα напрямую связывать мелатонин на сегодняшний день остается открытым, данные по этой проблеме крайне противоречивы. В 1995 г. I. Wiesenberg с коллегами идентифицировали RORα как ядерный рецептор для мелатонина, продемонстрировав способность гормона усиливать связывание данного фактора с ДНК и определив с помощью классического скэтчардовского анализа константу диссоциации для взаимодействия RORα с мелатонином. В 2011 г. P.J. Lardone с коллегами «переоткрыли» RORα как рецептор для мелатонина, продемонстрировав копреципитацию мелатонина с RORα. А в 2016 г. A.J. Slominski и соавт. опубликовали статью, которая поставила под сомнение возможность связывания мелатонина с RORα – исходя из данных молекулярного моделирования лиганд-рецепторных взаимодействий, подкрепленных функциональными исследованиями. Однако внимательный анализ этих данных указывает на неоднозначность такого вывода, позволяя говорить, скорее, о средней или низкой аффинности связывания гормона с RORα, но не о его отсутствии. В пользу этого заключения говорит и тот факт, что RORα опосредует многие эффекты мелатонина – как физиологические, так и фармакологические, включая регуляцию циркадных ритмов и окислительного метаболизма, нейро- и кардиопротекцию, а также контроль иммунного ответа. В целом, имеющиеся на сегодняшний день данные позволяют рассматривать транскрипционный фактор RORα как рецептор для мелатонина со средней аффинностью, хотя не исключена и непрямая регуляция этого фактора гормоном, и RORα-зависимые механизмы должны вносить вклад в ответ клеток на мелатонин как в физиологических условиях, так и в случае фармакологического применения гормона.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Особенности состояния митохондрий CD4+Т-лимфоцитов различных субпопуляций
Аннотация
Пул циркулирующих в периферической крови CD4+Т-лимфоцитов неоднороден и включает в себя наивные элементы, клетки центральной и эффекторной памяти, терминально-дифференцированные эффекторы. Каждая из субпопуляций выполняет различные функции и обладает уникальными метаболическими свойствами. Митохондрии являются жизненно важными органеллами CD4+Т-лимфоцитов, которые связаны с метаболизмом, производством энергии, продукцией активных форм кислорода, клеточным дыханием, пролифераций, дифференцировкой и апоптозом. Использование митохондриально-селективных флуоресцентных красителей совместно с мечеными моноклональными антителами является относительно доступным и простым способом оценки ряда параметров митохондрий в CD4+Т-клетках различной степени зрелости методом проточной цитометрии. Целью данной работы было исследование показателей состояния митохондрий в различных субпопуляциях CD4+Т-лимфоцитов. Объектом исследования служили мононуклеарные клетки, полученные из периферической крови девяти относительно здоровых добровольцев. Методом проточной цитометрии с использованием коммерческих флуоресцентных красителей MitoTracker Green FM и MitoTracker Deep Red FM были определены, соответственно, масса и заряд мембраны митохондрий в общем пуле CD4+Т-лимфоцитов и в субпопуляциях клеток: наивных (CD45R0-CCR7+), центральной памяти (CD45R0+CCR7+), эффекторной памяти (CD45R0+CCR7-) и терминально-дифференцированных эффекторах (CD45R0-CCR7-). Показано, что у здоровых лиц CD4+Т-лимфоциты центральной и эффекторной памяти по сравнению с наивными клетками обладают более высокой массой и величиной мембранного потенциала митохондрий. Масса органелл в функционально различных субпопуляциях CD4+Т-клеток памяти существенно отличается: снижена в лимфоцитах центральной памяти относительно таковой в клетках эффекторной памяти. При этом обе субпопуляции клеток памяти не различаются между собой величиной заряда мембраны митохондрий. Терминально-дифференцированные эффекторы отличаются от остальных субпопуляций CD4+Т-лимфоцитов уникальными характеристиками митохондрий: при высокой массе обладают сниженным зарядом мембраны. Данная особенность может быть связана с «готовностью» клеток, находящихся на терминальной стадии дифференцировки, к программируемой гибели.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Маркеры системной активации лейкоцитов в оценке острого и хронического системного воспаления
Аннотация
Феномен системной активации лейкоцитов можно рассматривать как одну из составляющих более интегрального феномена системного воспаления (СВ) – системной воспалительной реакции (СВР). В настоящее время известны сотни молекулярных маркеров – продуктов активации лейкоцитов, которые возможно применять в качестве критериев их системной активации; к таким маркерам относятся растворимый рецептор к IL-2 (sIL-2R) или CD25, β2-микроглобулин, эозинофильный катионный белок (ECP).
Целью нашего исследования стала оценка возможности использования маркеров системной активации лейкоцитов в качестве критериев острого и хронического системного воспаления.
Для изучения острого СВ были проанализированы данные пациентов с острыми критическими состояниями инфекционного (n = 121) – реанимационные пациенты с сепсисом-2 (согласно консенсусу 2001 г., без ПОН) и сепсисом-3 (консенсус 2016 г., ПОН) и неинфекционного (n = 136) генеза (политравма без/с ПОН), для изучения хронического СВ – данные пациентов с иммуновоспалительными ревматическими заболеваниями (n = 148).
По авторской методике рассчитывали уровень реактивности (УР) для оценки интенсивности СВР, а также баллы по шкалам острого СВ и хронического СВ (ХрСВ) – для верификации развития СВ на основании измеренных концентраций IL-6, IL-8, IL-10, TNFα и CRP, D-димеров, кортизола, миоглобина и тропонина I. В качестве критериев феномена активации лейкоцитов использовали уровень sIL-2R > 700 ед/мл, β2-микроглобулина > 3000 нг/мл и ECP > 10 нг/мл.
Согласно результатам исследования, наиболее стабильными показателями, позволяющими разделить группы без/с СВ при острых и хронических заболеваниях как по частоте регистрации, так и по концентрации в плазме, стали TNFα, ECP и β2-микроглобулин, что свидетельствует о типовом характере системной активации лейкоцитов и возможности применения данных показателей для оценки интенсивности описываемого феномена при интегрировании в балльную шкалу СВ. Однако самостоятельное применение этих показателей в качестве критериев комплексного процесса СВ и даже феномена СВР весьма сомнительно, поскольку регистрация пороговых значений одновременно двух критериев при остром процессе СВ была лишь в 40,2% случаев, а при хроническом – в 23,7%, при этом была сопоставима с группой без острого СВ. Все три дополнительных критерия одновременно определялись при остром СВ в 20,5% случаев, при хроническом – в 3,4%.
Также не выявлено сильных корреляционных взаимосвязей этих показателей со шкалами УР, СВ и ХрСВ.
Таким образом, маркеры sIL-2R, ECP и β2-микроглобулин применимы для определения выраженности феномена активации лейкоцитов и для интегрирования в шкалу СВ при условии выделения диапазонов концентрации, соответствующих динамике развития острого и хронического СВ.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Ингибирование TLR4 и NLRP3 рецепторов усиливает продукцию аллерген-специфических IgE-антител в моделях аллергии с использованием подкожного и интраназального введения антигена соответственно
Аннотация
В настоящее время наблюдается повсеместный рост распространенности заболеваний, связанных с продукцией IgE в ответ на попадание в организм безвредных аллергенов. Однако вопрос о роли активации PRR-рецепторов в формировании продукции аллерген-специфических антител еще остается дискуссионным. Существует так называемая гигиеническая гипотеза, согласно которой причиной развития аллергических заболеваний является уменьшение контакта современных людей с различными патогенами, содержащими лиганды PRR-рецепторов. Целью настоящей работы было определить роль активации TLR4 и NLRP3-рецепторов в формировании продукции аллерген-специфических антител.
Мыши линии BALB/c были иммунизированы двумя способами: 1) подкожно в течение 6 недель 2-3 раза в неделю дозой OVA 0,1 мкг; 2) интраназально в течение 8 недель 2 раза в неделю дозой OVA 0,3 мкг с бензо(а)пиреном (BaP) в дозе 4 нг. В обоих случаях части животным вводили низкомолекулярные ингибиторы TLR4 и NLRP3 – TLR4-IN-C34 в дозе 1 мг/кг и CY-09 в дозе 20 мг/кг соответственно. Продукцию специфических антител определяли методом ИФА по окончанию протокола.
Введение TLR4-IN-C34 достоверно (p < 0,01) и примерно в 2,5 раза усиливало продукцию специфического IgE, но не IgG1, в модели с использованием подкожной иммунизации. Титры специфического IgE в контрольной группе без ингибитора и в опытной группе с TLR4-IN-C34 составили, соответственно, (3±0,6) × 103 и (8±2) × 103. Введение CY-09 не оказывало влияния на гуморальный ответ в данной модели. Противоположная ситуация наблюдалась в случае интраназальной иммунизации с BaP. BaP достоверно стимулировал формирование продукции специфического IgE и IgG1. В данной модели введение CY-09, но не TLR4-IN-C34 на фоне введения BaP, достоверно (p < 0,05) и примерно в 2 раза повышало продукцию специфического IgE, но не влияло на продукцию IgG1. Титры специфического IgE в контрольной группе без ингибитора и в опытной составили (2,0±0,4) × 102 и (5,1±0,3) × 102.
Таким образом, активация PRR, TLR4 и NLRP3 в модели с использованием подкожной иммунизации и в модели с использованием интраназального введения антигена с BaP подавляла продукцию аллерген-специфического IgE, но не IgG1 антител. Полученные данные в целом находятся в согласии с гигиенической гипотезой формирования аллергопатологий.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Аллергия у ВИЧ-инфицированных пациентов (на примере клинического наблюдения)
Аннотация
Статья посвящена изучению причин формирования аллергических заболеваний у пациентов с ВИЧ на примере клинического случая. Пациентка Ц., 35 лет, находилась на диспансерном наблюдении в клинике «Виктори» с 2013 года по 2015 год с проявлениями кожной аллергии. В течение последующих четырех лет пациентка получала терапию при обострении атопического дерматита, придерживалась диеты с исключением молочных продуктов и говядины. Состояние пациентки можно было оценить как удовлетворительное, рецидивы атопического дерматита отмечались 2 раза после нарушений диеты. В 2017 году после незащищенного контакта пациентка заметила: слабость, снижение веса, сухость кожи и увеличение периферических лимфоузлов. В июне 2017 года пациентка обратилась к участковому педиатру, который выписал направление на общий анализ крови и мочи, анализ крови на СПИД и гепатиты. В результате обследования у пациентки выявлена ВИЧ-инфекция. Больная была обследована и пролечена в СПИД-центре города Якутска. С августа 2017 года пациентку беспокоит заложенность носа, чихание, слезотечение, головные боли.
В начале сентября 2017 года пациентка обратилась к аллергологу-иммунологу. Было проведено обследование: взят анализ крови на аллергоскрин панель № 1 и иммунограмму, риноцитограмму.
Были получены следующие результаты: по аллергоскрину № 1 – аллергия на березу 3.0, молоко 3.2, пшеничную муку 2.8. Данные риноцитограммы от 28.09.2017: нейтрофилы 67 в п/зр, эозинофилы 10 в п/зр.
У людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), наблюдается высокий уровень аллергических состояний, включая аллергический ринит (сенную лихорадку), лекарственную аллергию и астму. Вирус ВИЧ заражает и разрушает CD4+Т-клетки, тип белых кровяных телец. Это приводит к изменению иммунной функции, что способствует развитию аллергии, инфекций, рака и других иммунных проблем. У пациентки с ВИЧ-инфекцией, после выявления патологии наблюдается формирование и трансформация аллергических заболеваний. Формирование аллергопатологии у пациентов с ВИЧ связано с сниженным уровнем клеток CD4+, что является одним из факторов, способствующим развитию трансформации аллергии. Лечение аллергических заболеваний: бронхиальной астмы, атопического дерматита, аллергического ринита и аллергической крапивницы у пациентов с ВИЧ такое же, как у пациентов, не инфицированных ВИЧ. Следует избегать перорального приема глюкокортикостероидов ввиду иммунодепрессивного воздействия данной группы препаратов.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Выявление IgE-опосредованной сенсибилизации у детей методами иммуноферментного и иммунофлуоресцентного анализа
Аннотация
Нашей целью было определение частоты выявления и структуры причинно-значимой сенсибилизации к основным группам аллергенов у детей с аллергическими заболеваниями в Сибири при оценке результатов методами иммуноферментного и иммунофлуоресцентного анализа. Всего обследовано 968 детей с аллергическим ринитом, бронхиальной астмой, крапивницей, аллергическим дерматитом, проходящими лечение в консультативно-диагностическом центре аллергологии и иммунологии ГДКБ № 2 им. В.П. Бисяриной г. Омска. В лаборатории клинической иммунологии была проведена диагностика образцов сыворотки крови и определены аллергенспецифические концентрации IgE к 109 аллергенам, включая пищевые аллергены (молоко, яйцо, мясо, рыба, крупы, фрукты, овощи), бытовые аллергены (эпидермальные домашних животных, пыль и клещей домашней пыли, плесневые грибы), ингаляционные антигены (трава, деревья). Обследование 435 детей проведено методом иммуноферментного анализа, 533 детей – методом непрямой иммунофлуоресценции. Проведенное исследование выявило преобладание у детей с аллергическими заболеваниями в Сибири IgE-опосредованной сенсибилизации на бытовые аллергены, которые были выявлены у 33,7% обследованных. IgE-опосредованная сенсибилизация на ингаляционные и пищевые аллергены встречалась в 1,5 раза реже. Самым распространенным причинно-значимым аллергеном среди бытовых являлась домашняя пыль (90%), перхоть и эпителий животных (86%), клещи домашней пыли (13,5%), плесневые грибы (1,4%). Наиболее распространенным причинно-значимым аллергеном среди пыльцевых оказались аллергены деревьев (47,8%), злаковые (23,5%) и сорные травы (20,1%). Установлено наличие поливалентной сенсибилизации с преимущественным сочетанием бытовых и респираторных аллергенов и более редким сочетанием бытовых и пищевых аллергенов. Уровень специфических IgE антител в сыворотке крови большинства обследованных детей с аллергическими заболеваниями в Сибири был высоким и одинаково хорошо выявлялся как методом иммуноферментного анализа, так и методом иммунофлюоресценции на аппарате Phadia ImmunoСАР. При низкой концентрации специфических IgE в сыворотке крови наибольшей чувствительностью обладал метод ImmunoСАР. Возможность сочетания и рационального использования методов ИФА и ImmunoСАР повышают качество диагностики аллергических заболеваний у детей и ее доступность в регионах Сибири.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Растворимый рецептор конечных продуктов гликозилирования как новый биомаркер бронхиальной астмы у детей: краткий обзор литературы и собственные данные
Аннотация
В последние годы внимание исследователей все чаще привлекает рецептор конечных продуктов гликозилирования (RAGE), который играет важную роль в различных заболеваниях, связанных с деструкцией тканей, метаболическими и нейродегенеративными процессами, инфекциями, иммунными реакциями и воспалением различного генеза. Особенно актуальным становится изучение растворимой формы этого рецептора (sRAGE) как потенциального биомаркера для диагностики и мониторинга бронхиальной астмы (БА) у детей.
В данной статье представлен краткий обзор литературы, посвященной роли RAGE и его лигандов в патогенезе респираторных заболеваний, а также анализируются собственные данные по изучению уровней sRAGE у детей с БА.
Был обследован 101 ребенок в возрасте 7-18 лет страдающий БА, направленный в детский аллергологический центр (Красноярск, Россия). Дети с БА были разделены на три группы: контролируемая (n = 45), частично контролируемая (n = 19) и неконтролируемая астма (n = 37) в соответствии с GINA-2023. Контрольную группу составили 92 сопоставимых по возрасту и полу ребенка (практически здоровые дети без признаков инфекции или аллергии). Уровень sRAGE в сыворотке крови определяли с помощью магнитно-иммуноферментного анализа (MAGPIX, Luminex, США; Merk Millipore, США). Данные представлены в виде медианы (25-75% квартили). Использовался тест Краскела–Уоллиса.
Уровень сывороточного sRAGE был снижен только при неконтролируемой БА у обследованных детей (рис. 1, p (тест Краскела–Уоллиса) = 0,001). Кроме того, уровень sRAGE в сыворотке крови был снижен в группах обострения астмы, независимо от статуса обострения, вызванного вирусной инфекцией либо аллергенами.
Уровень сывороточного sRAGE тесно связан с контролем астмы и состоянием обострения у детей с БА и может быть использован как новый маркер потери контроля над заболеванием и, возможно, как потенциальная мишень для терапевтического вмешательства.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Субпопуляции лимфоцитов в эпикардиальной, тимусной и подкожной жировой ткани при выраженном коронарном атеросклерозе у пациентов с ишемической болезнью сердца
Аннотация
Обсуждается важная роль эпикардиальной (ЭЖТ) и тимусной (ТЖТ) жировой ткани в развитии атеросклероза у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС). Целью данной работы стало исследование субпопуляций лимфоцитов и свойств FoxP3+Treg-лимфоцитов в эпикардиальной, тимусной и подкожной жировой ткани в зависимости от выраженности коронарного атеросклероза у пациентов с хронической ИБС. Обследовано 24 пациента с ИБС (21 мужчина; средний возраст 65,0 (58,0-68,0) лет), имеющих показания для проведения хирургической операции на открытом сердце. В образцах ЭЖТ, ТЖТ и подкожной жировой ткани (ПЖТ) методом проточной цитометрии с визуализацией определяли содержание CD4+, CD8+, B-лимфоцитов, NK- и NKT-клеток, а также оценивали долю CD4+CD25hiFoxP3+ и CD4+CD25lowFoxP3+T-регуляторных лимфоцитов (Treg) и долю Treg с транслокацией FoxP3 в ядро. В зависимости от выраженности атеросклероза, оцененной по данным селективной ангиографии и расчетному индексу Gensini Score, пациенты были разделены на две группы: группа 1 – пациенты с Gensini Score < 65 баллов; группа 2 – пациенты с Gensini Score ≥ 65 баллов (наиболее выраженный и распространенный коронарный атеросклероз). В ЭЖТ для пациентов группы 2 было характерно большее относительное содержание CD4+CD25lowTreg-клеток с внутриядерной транслокацией FoxP3, а в ТЖТ – большее содержание CD8+Т-лимфоцитов и NK-клеток и меньшее – двойных позитивных CD4+CD8+Т-лимфоцитов. Также в ТЖТ выявлена тенденция к снижению относительного содержания CD4+CD25hiTreg-клеток с внутриядерной транслокацией FoxP3 по сравнению с пациентами группы 1. Уровень ядерной транслокации FoxP3 в CD4+CD25hiTreg-клетках ТЖТ был обратно взаимосвязан с долей CD8+Т-лимфоцитов (rs = -0,653; p = 0,012) и NK-клеток (rs = -0,723; p = 0,003) в ТЖТ, и прямо – с долей двойных позитивных CD4+CD8+Т-лимфоцитов в ТЖТ (rs = 0,567; p = 0,034) и значением отношения окружности талии к окружности бедер (rs = -0,474; p = 0,041). Требуется проведение дальнейших исследований для изучения молекулярных механизмов реализации данных взаимосвязей у пациентов с коронарным атеросклерозом и хронической ИБС.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Проатерогенный протеомный профиль ЛПНП, полученных от пациентов с сахарным диабетом: иммунологические аспекты
Аннотация
Атеросклероз представляет собой заболевание сосудов, в основе которого лежит хронический воспалительный процесс, включающий в себя сложное взаимодействия компонентов крови, а также клеток, формирующих стенку сосуда, и липидного обмена в организме. Ключевую роль в патогенезе атеросклероза играют липопротеины низкой плотности (ЛПНП). При нарушении проницаемости эндотелиального слоя сосуда, ЛПНП могут проникать в интрамуральное пространство и накапливаться клетками субэндотелиального слоя интимы, приводя к началу воспалительного процесса и, в конечном итоге, к образованию пенистых клеток, основному морфологическому компоненту атеросклеротической бляшки. Однако только лишь уровень ЛПНП в плазме крови пациента не является ключевым фактором развития атеросклероза. Многочисленные исследования указывают, что именно окисленные модификации ЛПНП (окЛПНП) влияют на повышенное локальное накопление холестерина клетками сосудистой стенки, однако недавние работы демонстрируют противоречивые результаты относительно роли окЛПНП в развитии атеросклероза. Мы предполагаем, что на прогрессирование атеросклероза могут влиять иные компоненты фракции ЛПНП. Общеизвестным является тот факт, что пациенты с сахарным диабетом (СД) страдают от сердечно-сосудистых заболеваний, в частности от атеросклероза, чаще, чем пациенты без диагностированного СД и других аутоиммунных заболеваний, при этом заболевание прогрессирует быстрее. Целью данного исследования являлось выявление потенциальных биомаркеров во фракции ЛПНП, свидетельствующих о взаимосвязи иммунной системы с развитием атеросклероза у таких пациентов. ЛПНП были выделены из плазмы пациентов и здоровых доноров с помощью последовательного ультрацентрифугирования с растворами разной плотности, белковый профиль образцов ЛПНП оценивали с помощью хромато-масс-спектрометрии. Нами было обнаружено 9 белков, которые имеют статистически значимую разницу между группами (СД и контроль). В группе СД содержание антимикробного пептида кателицидина и липополисахарид-связывающего белка выше почти в 2 раза по сравнению с контролем. Эти белки могут быть вовлечены в развитие воспаления, приводящего к прогрессированию атеросклероза. В то же время снижение иммуноглобулинов и компонентов комплемента (С9 и субкомпонент C1s), связанных с ЛПНП, может влиять на развитие атеросклероза.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Влияние приема статинов на воспалительный ответ моноцитов у пациентов с атеросклерозом
Аннотация
В настоящее время статины являются основными средствами антиатеросклеротической терапии, поскольку обладают, помимо гиполипидемического действия, рядом эффектов, замедляющих прогрессирование атеросклероза, в том числе противовоспалительной эффективностью. Целью настоящего исследования явилось изучение воспалительного ответа моноцитов у больных с гемодинамически значимым атеросклерозом на фоне терапии гидрофильными и липофильными статинами, а также у пациентов с атеросклерозом, не получающих гиполипидемическую терапию. Всего в исследование включены 60 пациентов с гемодинамически значимым атеросклерозом коронарных артерий, в три группы: 1) получающие терапию атовастатином в течение не менее 12 месяцев до включения в исследование, n = 20; 2) получающие терапию розувастатином в течение не менее 12 месяцев до включения в исследование, n = 20; 3) не получавшие терапию статинами в течение года до включения в исследование, n = 20. Первичную культуру моноцитов участников исследования получали методом градиентного центрифугирования с последующей иммуномагнитной сепарацией CD14+ моноцитов. Выделенные клетки культивировали в течение 7 суток без стимуляции и в условиях провоспалительной стимуляции с использованием липополисахарида (ЛПС). Методом иммуноферментного анализа определяли уровень базальной, ЛПС-стимулированной и повторно стимулированной секреции TNFα и IL-1β. Базальная секреция TNFα и IL-1β у пациентов, получающих статины, была ниже, чем у пациентов, которые не получали статины в течение года, секреция обоих цитокинов была достоверно ниже в группе розувастатина. ЛПС-стимулированная секреция TNFα была недостоверно ниже в группах пациентов, получающих статины, секреция IL-1β была достоверно ниже в группах аторвастатина и розувастатина по сравнению с группой без статинов. Повторно стимулированная секреция IL-1β не отличалась достоверно между группами, повторно стимулированная секреция TNFα была достоверно ниже в группе розувастатина по сравнению с группами аторвастатина и без статинов. Таким образом, результаты исследования демонстрируют противовоспалительную эффективность розувастатина, выражающуюся в снижении секреции провоспалительных цитокинов культивируемыми моноцитами/макрофагами пациентов с выраженным коронарным атеросклерозом.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Динамические особенности гуморального звена иммунитета у пациентов с острым коронарным синдромом в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3-CD19+CD5+, болевших и не болевших COVID-19
Аннотация
Целью работы явилось изучение динамических особенностей гуморального звена иммунитета у пациентов с острым коронарным синдромом в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3-CD19+CD5+, болевших и не болевших COVID-19. Проанализированы данные показателей гуморального иммунитета у мужчин в возрасте от 40 до 65 лет с острым коронарным синдромом, болевших и не болевших COVID-19, в зависимости от содержания B-лимфоцитов с фенотипом CD3-CD19+CD5+. Всем пациентам проводилась коронароангиография с дальнейшим стентированием коронарных артерий. Учитывали значения лимфоцитов с фенотипом CD45+CD3-CD19+ и наличие или отсутствие COVID-19 ранее.
Методом проточной цитометрии гейтировали по панлейкоцитарному маркеру CD45+ 2 группы: подгруппа В-лимфоцитов CD3-CD19+CD5+ и подгруппа В-лимфоцитов CD3-CD19+CD5-, B-лимфоциты (CD45+CD3-CD19+). Уровни общих IgA, IgG, IgM, C1-ингибитора, С3а и С5а компонентов комплемента методом иммуноферментного анализа.
После стентирования коронарных артерий В-лимфоциты (CD3-CD19+CD5+) значимо повысились в группе лиц, болевших COVID-19, с исходно низкими этими клетками (р < 0,01) и нормальными клетками (р < 0,05). У лиц, перенесших COVID-19 и не болевших этим заболеванием, с исходно пониженными CD3-CD19+CD5+ клетками значимо (р < 0,001 и р < 0,05 соответственно) выросли в динамике (р < 0,05) B-лимфоциты (CD45+CD3-CD19+), В-лимфоциты (CD3-CD19+CD5-). В группе больных, переболевших COVID-19, с нормальными CD3-CD19+CD5+ клетками в динамике снизилось (р < 0,01) относительное число B-лимфоцитов (CD45+CD3-CD19+) и CD3-CD19+CD5- клеток. У лиц, болевших ранее COVID-19, с повышенными CD3-CD19+CD5+ клетками в динамике значимо (р < 0,05) понизилось число B-лимфоцитов (CD45+CD3-CD19+), у не болевших COVID-19 с высокими вышеупомянутыми клетками достоверно (р < 0,05) увеличился иммуноглобулин А. Наиболее тяжелой в клиническом плане была группа лиц с пониженными CD3-CD19+CD5+В-клетками и COVID-19 в анамнезе.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Влияние интервальной гипокситерапии на иммунный статус больных гипертонической болезнью
Аннотация
В последние годы доказана роль вялотекущего неспецифического воспаления в патогенезе гипертонической болезни. Оксидативный стресс, развивающийся при гипертонической болезни, приводит к повреждению эндотелиального гликокаликса с нарушением барьерной и адаптерной функций эндотелия. Активация транскрипционного фактора NF-kB приводит к усилению синтеза свободных радикалов кислорода, молекул адгезии (VCAM-1, ICAM-1, Р-selectin, E-selectin) и провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-1, IL-6), запуская воспалительный процесс в эндотелии. Современные антигипертензивные препараты, влияя на различные патогенетические механизмы развития артериальной гипертензии, не в полной мере воздействуют на иммунный компонент артериальной гипертонии. Поэтому поиск различных методов, влияющих на иммунологическую реактивность больных гипертонической болезнью, остается актуальным в наше время.
Целью исследования стало выявление влияния интервальной гипокситерапии на состояние иммунологической реактивности больных гипертонической болезнью I стадии.
Было обследовано 170 пациентов мужского пола 30-45 лет (средний возраст 38,36±1,64 года) с гипертонической болезнью I стадии (n = 170), которая прошла комбинированное лечение, включающее медикаментозную терапию и нормобарическую интервальную гипокситерапию в режиме гипоксия-нормоксия (содержание кислорода в гипоксической газовой смеси составляло 20,9%). Изучены показатели редокс-статуса и иммунологической реактивности до и после интервальной гипокситерапии.
Обладая существенным антиоксидантным действием, интервальная гипокситерапия привела к стиханию оксидантного стресса, на что указывало повышение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы в эритроцитах крови и снижение содержания малонового диальдегида в крови в результате уменьшения генерации свободных радикалов кислорода и подавления процессов перекисного окисления липидов. Интервальная гипокситерапия привела к статистически значимому увеличению изначально сниженного содержания Т-лимфоцитов CD3+ (р < 0,05), Т-лимфоцитов CD3+CD4+ (р < 0,02), Т-лимфоцитов CD3+CD8+ (р < 0,02). Изначально повышенное количество В-лимфоцитов CD19+, CD16+ лимфоцитов, CD95+ лимфоцитов достоверно снизилось. Важным результатом интервальной гипокситерапии стало выраженное противовоспалительное действие: статистически значимое снижение содержания провоспалительных интерлейкинов IL-1β (р < 0,02), IL-6 (р < 0,01) и повышение содержания противовоспалительных цитокинов IL-4 (р < 0,005) и IL-10 (р < 0,005), что привело к стиханию вялотекущего неспецифического воспаления.
Подавление оксидантного стресса и нормализация иммунологической реактивности больных гипертонической болезнью после интервальной гипокситерапии привела к стиханию вялотекущего неспецифического воспаления, уменьшению эндотелиальной дисфункции и восстановлению структуры и тонуса сосудистой стенки со снижением артериального давления и улучшением клинического течения гипертонической болезни.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Взаимосвязи между содержанием железа и иммунными дисфункциями у часто болеющих детей региона Приаралья
Аннотация
Широкое распространение иммунозависимых заболеваний и нарушения метаболизма железа, а также их совместные случаи и влияние дефицита железа на иммунную систему подчеркивают актуальность данного исследования. Современные данные также указывают на участие железа в регуляции цитокиновой продукции и синтезе белка лимфоцитами. Помимо возрастных особенностей иммунной системы ребенка, существенное значение в развитии неадекватного течения инфекционного процесса имеет срыв адаптации иммунной системы, причинами которого могут быть как частые инфекции, так и другие соматические заболевания, такие как анемия, а также экологические факторы.
Целью настоящего исследования является оценка взаимосвязи между содержанием железа и иммунными дисфункциями при частых острых респираторных заболеваниях у детей, проживающих в Приаралье.
Всего было обследовано 127 детей, которые являются коренными жителями и проживают в эпицентре экологического кризиса. Возраст детей составил от 1 до 5 лет. Под наблюдением находились 105 часто болеющих детей (6 и более эпизодов ОРЗ в год) с железодефицитной анемией (ЖДА) и 22 здоровых детей такого же возраста. Был проведен клинический осмотр всех детей и общепринятые лабораторные анализы: общий анализ крови, относительное содержание и соотношение Т- и В-лимфоцитов, а также содержание про- и противовоспалительных цитокинов (IL-2 и 4) и ферритина в сыворотке крови.
По результатам проведенных исследований выявлено, что у часто болеющих детей с железодефицитной анемией (ЖДA) отмечается умеренная положительная корреляция между относительным количеством Т-лимфоцитов и уровнем гемоглобина (r = +0,62), а также сильная положительная корреляция с уровнем сывороточного железа (r = +0,78). Это указывает на значительное влияние дефицита железа на уровень клеточного иммунитета. Клинические данные также свидетельствуют о более высоком риске развития инфекций дыхательных путей у детей с ЖДA по сравнению с контрольной группой. Ферритин, гемоглобин, лимфоциты, и цитокины являются при ЖДА позитивными регуляторами гемопоэза и в условиях восполнения дефицита железа приводят к компенсации анемии.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Соотношение иммунных индексов у женщин семиаридного региона
Аннотация
Экологические и климатические факторы оказывают существенное влияние на иммунную систему, формируя ее состав и функции. Семиаридный регион г. Алеппо, характеризующийся жарким сухим летом и умеренной, влажной и холодной зимой, также отличается загрязнением окружающей среды, например, загрязнителями воздуха и промышленными химикатами. Взаимодействие этих экологических и климатических факторов может нарушать иммунную функцию, вызывая воспалительные реакции, нарушая целостность иммунных клеток и ослабляя способность организма обеспечивать эффективный иммунный ответ. До настоящего времени недостаточно исследованы физиологические особенности параметров системы крови человека и развития физиологических реакций адаптивного иммунного гомеостаза в зависимости от территории проживания. В настоящей работе изучено состояние иммунных индексов у женщин, проживающих в семиаридном регионе. Обследовано 30 женщин в возрасте от 20 до 60 лет без хронических и острых заболеваний. Иммунокомпетентность оценивали с помощью количества лейкоцитов, анализа субпопуляции лимфоцитов и расчета иммунных показателей, включая соотношение нейтрофилов к лимфоцитам (NLR), соотношение лимфоцитов к моноцитам (LMR), индекс системного воспалительного ответа (SIRI), индекс иммунорегуляции (CD4+/CD8+) и соотношение лимфопролиферации и апоптоза (CD10+/CD95+ и CD71+/CD95+). Результаты анализа показали, что медиана NLR составляет 2,18 (1,50-2,90), LMR 6,66 (5,47- 8,87), SIRI 0,64 (0,45-0,98), иммунорегуляторного индекса 0,99 (0,84-1,27) и соотношения процессов лимфопролиферации к апоптозу (CD10+/CD95+ и CD71+/CD95+) 0,95 (0,65-1,29) и 0,94 (0,78-1,11) соответственно, что указывает на стрессовое состояние иммунного гомеостаза и признаки преждевременного старения иммунной системы. Определено, что соотношение нейтрофилов и лимфоцитов (NLR), соотношение лимфоцитов и моноцитов (LMR), индекс системного воспалительного ответа (SIRI), иммунорегуляторный индекс (CD4+/CD8+) и соотношение лимфопролиферации и апоптоза. (CD10+/CD95+ и CD71+/CD95+) у обследуемых женщин семиаридной климатической зоны проживания, подчеркивает стрессовый уровень иммунного гомеостаза. Полученные результаты подчеркивают необходимость систематического индивидуального медико-биологического мониторинга для поддержания иммунного гомеостаза в популяциях, населяющих схожие условия окружающей среды.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Иммунотерапия – новая возможность ведения пациенток с «тонким» эндометрием в циклах переноса размороженных эмбрионов
Аннотация
Тенденция последних десятилетий – поиск терапевтического воздействия на так называемый «тонкий» эндометрий. Тем не менее до настоящего времени не существует оптимальной схемы ведения пациенток с «тонким» эндометрием в программах вспомогательных репродуктивных технологий.
Цель – оценить эффективность применения рекомбинантного IL-2 перед проведением криотрансфера у женщин старшего репродуктивного возраста с «тонким» эндометрием и многократными неудачными попытками переноса эмбрионов хорошего качества.
В исследование включено 63 пациентки позднего репродуктивного возраста с «тонким» эндометрием.
Первую группу составили 25 пациенток позднего репродуктивного возраста с неудачными попытками экстракорпорального оплодотворения в анамнезе при переносе эмбрионов хорошего качества. Криоперенос пациенткам первой группы был проведен в модифицированном естественном цикле.
Вторая группа – 38 женщин позднего репродуктивного возраста с неудачными попытками экстракорпорального оплодотворения в анамнезе при переносе эмбрионов хорошего качества. Криоперенос женщинам второй группы был проведен в цикле с заместительной гормональной терапией.
Всем женщинам в цикле перед криопереносом был назначен рекомбинантный IL-2.
В обеих группах оценены частота имплантации, клинической беременности и живорождения после назначения рекомбинантного IL-2.
Статистическая обработка данных осуществлялась с применением прикладного программного пакета Statistica 6.0 (StatSoft, Ink. 1994-2001), адаптированного для медико-биологических исследований. При использовании описательной статистики определялись параметры: выборочное среднее (М); среднее квадратическое отклонение (SD); медиана (Ме), 25-й квартиль (Q0,25), 75-й квартиль (Q0.75). Интерпретация полученных результатов проводилась путем определения их статистической значимости. Во всех случаях критическое значение уровня значимости принималось р < 0,05 (5%).
После лечения рекомбинантным IL-2 пациенток с бесплодием и тонким эндометрием, толщина эндометрия статистически значимо увеличивается в первых двух менструальных циклах после лечения, поэтому перенос размороженных эмбрионов следует планировать в первые два менструальные цикла после иммунотерапии.
С целью увеличения толщины эндометрия при проведении криопереноса в модифицированном естественном цикле, а также в цикле с заместительной гормональной терапией можно использовать рекомбинантный IL-2 у женщин с «тонким» эндометрием с многократными неудачными попытками имплантации при переносе эмбрионов хорошего качества.
Криоперенос следует производить в первые два менструальных цикла после проведенной иммунотерапии.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Трансфузия аллогенной пуповинной крови пациентам с множественной миеломой: Анализ безопасности и влияние на иммунофенотип лимфоцитов крови в ранний период
Аннотация
Тяжелые иммунные дисфункции имеют место у большинства онкологических пациентов. Одним из методов преодоления иммунных нарушений является трансплантация гемопоэтических стволовых клеток периферической крови как аутологичных, так и аллогенных, трансфузии аллогенных натуральных киллерных клеток (NK-клеток). Пуповинная кровь является известным источником не только гемопоэтических стволовых клеток (ГСК), но также и NK-клеток, характеризуется быстрой доступностью образцов крови из публичных банков пуповиной крови. Цель исследования – проанализировать безопасность одновременной трансфузии трех концентратов ГСК аллогенной пуповинной крови пациентам с рецидивирующей/рефрактерной множественной миеломой в ранний период – 7 дней после введения, а также изучить реакцию субпопуляций лимфоцитов периферической крови пациентов на данное вмешательство.
В пилотное исследование включено 10 пациентов (7 мужчин и 3 женщин) с рецидивирующей/рефрактерной множественной миеломой, ранее получивших более 3 линий терапии. Возраст пациентов – 59,4±3,4 года, всем проводилась однократная трансфузия трех аллогенных образцов концентрата ГСК пуповинной крови со средней дозой лейкоцитов 60,50±8,2 × 108 (NK-клетки – 4,36±1,2 × 108) на одного пациента. Всего проведена трансфузия 30 образцов концентрата ГСК пуповинной крови, аллореактивных по KIR-рецепторам по типу рецептор-лиганд. Подбор концентратов ГСК осуществлялся в банке пуповинной крови ГБУЗ «МЦ “Династия”». Перед трансфузией концентрата ГСК пуповинной крови пациенты получали циклофосфамид 5 мг/кг. После трансфузии пациенты получали пять подкожных инъекций IL-2 (ронколейкина) в количестве 1 млн ЕД в сутки. Наблюдение на момент оценки предварительных результатов – 7 дней после трансфузии. Анализ иммунофенотипа лимфоцитов периферической крови пациентов исследовался дважды: в день трансфузии до начала протокола и через 7 дней после трансфузии концентрата ГСК пуповинной крови.
Ранних нежелательных реакций на трансфузии не наблюдалось.
Одновременная трансфузия трех концентратов ГСК аллогенной пуповинной крови пациентам с рецидивирующей/рефрактерной множественной миеломой является безопасной процедурой, отсутствуют побочные реакции и серьезные нежелательные явления, а также значимые реакции и изменения иммунофенотипа лимфоцитов пациентов в ранний период наблюдения в течение 7 дней после вмешательства.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Плейотропность иммуномодулирующих влияний синтетического тимического гексапептида при хронических инфекционно-воспалительных заболеваниях генитального тракта у иммунокомпрометированных женщин
Аннотация
Причиной затяжного течения и частого рецидивирования хронических инфекционно-воспалительных заболеваний генитального тракта (ХИВЗГТ) является дефектное функционирование иммунной системы, что диктует необходимость поиска эффективных иммунотерапевтических подходов. Цель: уточнить особенности функционирования иммунной системы, системы интерферонов, профиля про- и противовоспалительных цитокинов в период обострения ХИВЗГТ у женщин и на этой основе разработать таргетную иммуномодулирующую терапию с использованием гексапептида с оценкой ее клинико-иммунологической эффективности. Исследуемые имммунокомпрометированные женщины 20-40 лет с обострением ХИВЗГТ по терапевтической тактике были разделены на 4 группы исследования (ГИ): ГИ1 (n = 22) и ГИ2 (n = 70) до лечения; ГИ1а – ГИ1, получавшая стандартную терапию; ГИ2а – ГИ2, получавшая стандартную терапию и гексапептид (ГП, Имунофан®). Группа сравнения (ГС) – 20 условно здоровых женщин. Определяли параметры клеточного и гуморального иммунитета, уровни сывороточных интерферонов, цитокинов. При обострении ХИВЗГТ выявлено снижение IFNα в обеих группах и IFNγ, более выраженное в ГИ1. В ГИ1 были увеличены уровни двух системных провоспалительных цитокинов, IL-6 и TNFα и снижен уровень нейтрофил-ассоциированного цитокина IL-8. В ГИ2 был повышен уровень провоспалительного цитокина IL-6. Отмечено повышение противовоспалительных цитокинов IL-4 и IL-10 в обеих группах. На фоне дефицита IFNα, IFNγ и дисбаланса цитокинов в обеих группах исследования наблюдалось значимое снижение Т-лимфоцитов CD3+CD19-, Т-хелперов CD3+CD4+, В-лимфоцитов CD3-CD19+. После проведения стандартного лечения (ГИ1а) не отмечалось восстановления IFNα и IFNγ. Из провоспалительных цитокинов снижался только TNFα, а уровни IL-1β, IL-6 были повышены к окончанию лечения, при этом отсутствовал компенсаторный рост противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10), что также не сопровождалось восстановлением клеточного и гуморального иммунитета. Полученные результаты создают предпосылки для поддержания хронического воспаления с возникновением обострения ХИВЗГТ уже через 3 месяца после лечения. После комплексного лечения с включением фГП (ГИ2а) IFNα восстанавливался в 50% случаев. Показано снижение ранее повышенных IL-1β и TNFα на фоне отсутствия значимых изменений уровней нейтрофил-ассоциированных цитокинов IL-8 и IL-18. Разрешение воспаления сопровождалось ростом противовоспалительного цитокина IL-10. Модулирующий эффект влияния фГП на интерфероны и цитокины способствовал восстановлению Т-клеточного и гуморального иммунитета, что тесно взаимосвязано с наступлением клинической ремиссии ХИВЗГТ в более ранние сроки и увеличением длительности межрецидивного периода. Позитивная клинико-иммунологическая эффективность включения в комплексное лечение иммунокомпрометированных женщин с обострением ХИВЗГТ таргетной иммуномодулирующей терапии Имунофаном® обусловлена его плейотропными эффектами влияния, что дает существенные преимущества по сравнению с использованием только стандартной терапии.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Уровень некоторых матриксных металлопротеиназ в сыворотке крови во взаимосвязи с их генетическим полиморфизмом в зависимости от возраста
Аннотация
В статье представлены данные о состоянии системы протеолиза и генов регуляции матриксных металлопротеиназ у 180 условно здоровых женщин и мужчин молодого, среднего, пожилого и старческого возрастов. У пациентов производился однократный забор материала (буккальный эпителий). ПЦР-исследование буккального эпителия для анализа полиморфизмов генов ММР-1 rs1799750 и MMP-3 rs 3025058 проводили на приборной базе ДНК-амплификатора Bio-Rad CFX96 (г. Новосибирск, ООО «Национальный центр генетических исследований»). Уровни MMP-1, MMP-3 в сыворотке крови исследовали методом сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа (R&D Diagnostics Inc., США). Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с использованием программы IBM SPSS Statistics 26 методами непараметрической статистики. Результаты исследования. Значения ММР-1 и ММР-3 в группе условно здоровых женщин в молодом возрасте были ниже значений среднего возраста, тогда как в старческом возрасте их содержание в сыворотке крови изменялось разнонаправленно: ММР-1 уменьшались, а ММР-3 – увеличивались. При анализе полиморфизмов гена ММР-1 rs1799750 у женщин молодого и среднего возраста с большим удельным весом превалировал гомозиготный генотип -/- с низкой экспрессией гена ММР-1, а у женщин старше 75 лет зафиксировано носительство гомозиготы G/G с активной экспрессией гена. При оценке экспрессии гена ММР-3 rs 3025058 установлено, что у женщин молодого возраста достоверно чаще встречался полиморфизм 5А/5А с высокой активностью гена, но с более низким уровнем ММР-3. В среднем и пожилом возрасте в 65% установлен гетерозиготный аллель 5А/6А с пониженной экспрессионной активностью гена. У условно здоровых мужчин уровень ММР-1 в сыворотке крови повышался в группах среднего и старческого возрастов, значения ММР-3 в группе до 45 лет были низкими по сравнению с группой пожилого возраста (р = 0,041). ММР-1 rs1799750 у мужчин до 75 лет идентифицировался в варианте -/G у большинства, а в группе мужчин старше 75 лет превалировал гомозиготный вариант G/G с уровнем ММР-1 0,74 нг/мл. Гомозиготный полиморфизм гена ММР-3 rs 3025058 5А/5А с высокой активностью ММР-3 превалировал в группах мужчин до 60 лет с сывороточным уровнем ММР-3 100,2 нг/мл и 92,5 нг/мл соответственно.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Частота встречаемости полиморфизма генов C-589T IL4 и G-1082A IL10 у детей с новой коронавирусной инфекцией
Аннотация
Иммунные реакции участвуют в инициации и развитии COVID-19. По сравнению с легкими случаями COVID-19 уровни интерлейкинов в сыворотке крови значительно повышались у тяжелых и критических пациентов с COVID-19. Повышение IL-4 и IL-10 связано с тяжестью заболевания. Полиморфизм С-589Т гена IL4 ассоциирован с повышенной промоторной активностью гена. Аллельные варианты GA и GG-1082 гена IL10 обладают большей активностью по сравнению с генотипом АА-1082 гена IL10.
Целью исследования было изучение частоты встречаемости полиморфных вариантов генов C-589T IL4 и G-1082A IL10 у детей с новой коронавирусной инфекцией в популяции Республики Крым.
Обследованы 68 пациентов в возрасте от 0 до 14 лет с диагнозом «НКИ средней и тяжелой степени тяжести», 100 взрослых пациентов (45,6±6,14 года). Анализировали частоту встречаемости полиморфизма генов C-589T IL4, G-1082A IL10.
Варианты СС и СТ полиморфизма C-589T гена IL4 в группе детей с НКИ встречались чаще, чем ТТ C-589T IL4. Статически значимые различия по частоте встречаемости мутантного генотипа СС полиморфизма C-589T гена IL4 были показаны между группой детей и взрослых. При проведении статического анализа не было выявлено каких-либо различий генотипов с заболеванием НКИ ни у детей, ни у взрослых. Анализ распространенности генотипов G-1082A IL10 показал, что у детей наиболее частым является – GA, такая же тенденция характерна и для взрослых, и для группы контроля.
Анализ отношения шансов показал, что патогенетического значения между полиморфизмом генов C-589T IL4 и G-1082A IL10 и риском развития новой коронавирусной инфекции в исследованных группах выявлено не было.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Аутоиммунно обусловленное суицидальное поведение
Аннотация
Известно аутоиммунное заболевание, которое получило название «анти-NMDA-рецепторного энцефалита», или «энцефалита Далмау» (по имени его первооткрывателя). Оно связано с наличием высоких титров антител к определенному эпитопу NR1 субъединицы NMDA-рецепторов в крови и/или в ликворе. Это заболевание в своей классической форме сопровождается выраженными психическими (депрессия, бред, галлюцинации, тревога, нарушения сна, когнитивные нарушения, кататония и др.) и неврологическими (судороги, дискинезии) симптомами, нарушениями сознания и вегетативной регуляции (регуляции дыхания, температуры, артериального давления, сердечного ритма), а также суицидальностью, которая не пропорциональна степени тяжести психической патологии. Однако существуют и «неклассические» формы анти-NMDA-рецепторного энцефалита, которые могут проявляться исключительно психической симптоматикой (например депрессией, психозом, суицидальным поведением), без характерных неврологических симптомов и/ или нарушений вегетативной регуляции. В некоторых из подобных случаев диагноз «анти-NMDA-рецепторного энцефалита» был в итоге поставлен с опозданием на месяцы, годы и даже десятилетия. Кроме того, в последние десятилетия накапливается все больше данных о том, что у части пациентов с, казалось бы, «классическими» психическими расстройствами, такими как шизофрения, биполярное аффективное расстройство, депрессивные расстройства – и особенно у тех из них, которые проявляют резистентность к традиционной психофармакотерапии – тоже обнаруживаются повышенные титры анти-NMDA-рецепторных антител в крови и/или в ликворе. Также показано, что повышенные титры анти-NMDA-рецепторных антител часто обнаруживаются при посмертном патологоанатомическом исследовании умерших от суицида. Титры анти-NMDA-рецепторных антител у психиатрических пациентов хорошо коррелируют с наличием суицидальных попыток в недавнем анамнезе и/ или с текущей активной суицидальной идеацией. Некоторым из таких пациентов может помочь в купировании суицидальности и/или в преодолении резистентности к психофармакотерапии – энергичная иммуносупрессивная терапия, аналогичная той, которая обычно применяется при «классическом» анти-NMDA-рецепторном энцефалите с неврологическими и вегетативными проявлениями. В данной статье представлены описание и анализ трех клинических случаев пациентов с различными психическими расстройствами, острой суицидальностью и повышенными титрами анти-NMDA-рецепторных антител, у которых такая терапия оказалась эффективной.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Центральные эффекты модулированных ex vivo кофеином иммунокомпетентных клеток в механизмах редактирования депрессивно-подобного поведения
Аннотация
Депрессия является серьезной медико-социальной проблемой в силу большой распространенности, вовлеченности лиц трудоспособного возраста и отсутствия высокоэффективной терапии. Социальные стрессорные факторы способствуют распространенности депрессии. Пандемия COVID-19 и связанные с ней правила социального дистанцирования, военные столкновения, ухудшение экономической ситуации могут приводить к болезненной «ломке» социально-биологических механизмов адаптации и способствовать увеличению распространенности депрессивных расстройств, которые, по прогнозам ВОЗ, к 2030 году могут занять второе место в структуре причин нетрудоспособности, что обуславливает интерес к исследованию данной проблемы и поиску новых эффективных подходов к терапии. Патогенез депрессивных состояний до конца не изучен, тем не менее многочисленные факты указывают на важную роль нарушения процессов нейроиммунного взаимодействия. Снижение когнитивных функций при депрессивных расстройствах вызвано нейровоспалительными и нейродегенеративными изменениями. Последние преимущественно регистрируются в гиппокампе, многочисленные изменения пластичности которого наблюдались как у пациентов с клинической депрессией, так и при моделировании депрессии на грызунах. Имеется также достаточное количество данных о существенной роли иммунокомпетентных клеток и продуцируемых ими цитокинов при депрессии, в том числе в формировании характерного поведенческого фенотипа. Ранее нами было показано, что иммунокомпетентные клетки селезенки депрессивно-подобных мышей после обработки ex vivo кофеином, психоактивным препаратом с широким спектром иммуномодулирующих свойств изменяют свою функциональную активность и после внутривенного введения сингенным депрессивно-подобным реципиентам оказывают редактирующий депрессивно-подобное поведение эффект. Целью настоящей работы было исследовать центральные эффекты модулированных кофеином иммунокомпетентных клеток селезенки в механизмах редактирования депрессивно-подобного поведения. Установлено, что у депрессивно-подобных реципиентов после трансплантации сингенных спленоцитов, ex vivo модулированных кофеином, отмечается увеличение плотности пирамидных нейронов в СА1 и СА3 зонах гиппокампа, сопровождающееся повышением уровня BDNF в гиппокампе и префронтальной коре на фоне снижения содержания ряда провоспалительных (IL-1β, IL-6, IFNγ и TNFα) и повышения уровней противовоспалительных (IL-10 и IL-4) цитокинов в патогенетически значимых для состояния депрессивности структурах головного мозга (гиппокампе, гипоталамусе, префронтальной коре и стриатуме). Обсуждаются механизмы выявленных структурных и функциональных изменений в мозге реципиентов после трансплантации, модулированных кофеином спленоцитов, включая их возможное непосредственное влияние, подтверждением чему служит визуализация трансплантированных клеток в паренхиме головного мозга депрессивно-подобных реципиентов.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Нейроцитокиновый профиль крови ветеранов современных боевых конфликтов с посттравматическим стрессовым расстройством
Аннотация
Формирование постстрессовых расстройств у ветеранов современных боевых конфликтов обусловлено особенностями взаимовлияния психических и иммуно-эндокринных процессов, направленных на поддержание стабильности организма в условиях хронической активации физиологических систем посредством процесса, известного как аллостаз. Целью исследования явилось изучение уровней стресс-медиаторов гипоталамо-гипофизарного и надпочечникового происхождения, показателей цитокинового профиля крови ветеранов современных войн с посттравматическим стрессовым расстройством (ПТСР).
В исследовании приняли участие 38 ветеранов специальной военной операции (СВО) на Украине с диагнозом по МКБ-10: ПТСР (F43.1). Диагноз верифицирован на основании нейропсихологического и патопсихологического обследования. В группу сравнения вошли 30 ветеранов Чеченской военной кампании того же возраста. В крови проводилось определение уровней стрессовых гормонов методом ИФА: АКТГ (тест-система IBL, Германия); норадреналин (Cloud-Clone, Китай); кортизол (ООО «Хема-Медика», Россия); дигидроэпиандростерон (DBC, Канада). Цитокиновый профиль крови определяли при помощи мультиплексного анализа тест-системой Bio-Plex (MERZ, Германия). Сравнение данных проводили с помощью программы Statistica for Windows vers. 10.0.
Свидетельством накопления «аллостатического груза» при формировании ПТСР у ветеранов СВО явилось повышение в крови концентраций АКТГ, норадреналина, кортизола, являющихся пластическими константами кататоксической стратегии адаптации к воздействию пролонгированного боевого стресса. Снижение концентрации дегидроэпиандростерона способствовало развитию психологической дезадаптации и стресс-индуцированных когнитивных расстройств. Аллостатические реакции при ПТСР включали изменение цитокинового профиля крови в виде повышения уровней провоспалительных цитокинов (IL-1β, IL-12 IL-6, TNFα), снижения противовоспалительных и регуляторных цитокинов (IL-4, IL-10, TGF-β, IL-2). Подобный нейровоспалительный статус также может быть связан с развитием психо-поведенческих симптомов ПТСР.
Формирование дезадаптивных изменений при накоплении «аллостатического груза» клинически выражалось в виде ПТСР и сопровождалось изменением нейроцитокинового профиля крови в виде повышения уровней АКТГ, норадреналина, кортизола, IL-lβ, IL-6, IL-12, TNFα, на фоне снижения концентрации дегидроэпиандростерона, TGF-β, IL-4, IL-10, IL-2, что в целом отражает превалирование кататоксической стратегии адаптации у комбатантов СВО.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Нарушение Т-клеточного звена иммунной системы у постковидных пациентов с впервые выявленной гипергликемией
Аннотация
Постковидный синдром объединяет множество неблагоприятных исходов с часто возникающими впервые состояниями, включая сахарный диабет (СД) 2-го типа. Актуальностью исследования являются недостаточные данные о Т-клеточном иммунитете у больных с гипергликемией после перенесенного COVID-19. Целью данного исследования явилось выявление особенностей Т-клеточного иммунитета у лиц с постковидным синдромом и впервые выявленными нарушениями углеводного обмена (НУО) в постковидном периоде. В исследование включено 100 пациентов (32 мужчин и 68 женщин) в возрасте от 38 до 70 лет (средний возраст (M±m) составил 59,40±8,80 года) с верифицированным состоянием после COVID-19. Все пациенты были распределены на три группы: группа 1 – пациенты с сопутствующей впервые выявленной нарушенной толерантностью к глюкозе (НТГ) в постковидном периоде (до инфицирования SARS-CoV-2 повышения гликемии по данным первичной медицинской документации не было выявлено) (n = 30), группа 2 – пациенты с сопутствующим впервые выявленным сахарным диабетом 2-го типа (n = 30), группа 3 – пациенты с развитием постковидного синдромом без гипергликемии (n = 40). В ходе исследования были определены следующие параметры: CD45+, CD3+ (Т-лимфоциты), CD45+, CD3+, CD4+ (хелперы индукторы), CD45+, CD3+, CD8+ (цитотоксические Т-лимфоциты,), CD45+, CD3+, CD4+, CD25+, CD127- (Т-регуляторные клетки), CD45+, CD3+, CD4+, CD25+ (Т-лимфоциты – ранняя активация), CD45+, CD3+, HLA-DR+ (Т-лимфоциты – поздняя активация). Инфицирование SARS-CoV-2 с развитием в дальнейшем постковидного синдрома и стойкой гипергликемии (НТГ, СД 2-го типа) в постковидном периоде сопровождалось более высоким уровнем общего числа Т-лимфоцитов. При исследовании популяции Т-лимфоцитов выявлены изменения субпопуляционного состава. В группе пациентов с НУО отмечено значимое повышение Т-цитотоксических, Т-регуляторных клеток. Более выраженные изменения субпопуляционного состава определены в группе больных с впервые выявленным СД 2-го типа в постковидном периоде – повышение относительного и абсолютного чисел Т-хелперов и Т-клеток поздней активации лимфоцитов. Нарушения углеводного обмена, ассоциированные с COVID-19, сопровождаются изменением субпопуляционного состава Т-лимфоцитов. У лиц с впервые выявленным СД 2 типа в постковидном периоде выявлена гиперактивация Т-клеточного звена иммунной системы. Неоднородные данные получены у лиц с впервые выявленной нарушенной толерантностью к глюкозе, что требует дальнейшего исследования указанной группы больных.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Активность клеточного иммунитета у больных алиментарно-зависимыми заболеваниями (ожирением, сахарным диабетом 2-го типа)
Аннотация
Целью исследования является анализ показателей клеточного иммунитета у больных с ожирением (ОЖ) и сахарным диабетом 2-го типа (СД2). В исследование были включены 15 больных СД2 (группа СД2), индекс массы тела (ИМТ) 37,36±1,12 кг/м2, 12 пациентов с ОЖ (группа ОЖ), ИМТ – 38,12±1,51 кг/м2 и 15 практически здоровых лиц (группа сравнения – ГС): ИМТ – 23,5±0,15 кг/м2. Исследование выполняли на проточном цитофлуориметре FC-500 (Beckman Coulter, США) с использованием двойных комбинаций моноклональных антител (Beckman Coulter – Immunotech SAS, Франция). Оценивали процентные показатели Т-клеточной популяции [общее количество Т-лимфоцитов (CD3+), количество Т-хелперов (CD3+CD4+), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+), естественных клеток-киллеров – NK-клеток (CD3-CD16+CD56+), естественных клеток-киллеров, обладающих свойствами Т-лимфоцитов – NKТ-клеток (CD3+CD16+CD56+) и В-клеточной популяции (CD19+) лимфоцитов, а также относительное содержание лимфоцитов, несущих маркеры активации (CD3+HLA-DR+, CD3+CD25+), и маркерный антиген апоптоза CD45+CD95+]. Относительное содержание В-лимфоцитов и Т-лимфоцитов в периферической крови обследованных лиц не имело статистически достоверных различий. У больных в группах СД2 и ОЖ отмечена тенденция (р < 0,1) к повышению относительного содержания Т-хелперов и достоверное (р < 0,05) снижение процента Т-цитотоксических лимфоцитов относительно ГС. Это перераспределение субпопуляций лимфоцитов привело к достоверному (р < 0,05) повышению величины ИРИ (условные единицы): СД2 – 2,87±0,58; ОЖ – 2,30±0,33 vs ГС – 1,62±0,15. Относительное содержание в периферической крови обследованных лиц NK-клеток и NKТ-клеток не имело статистически достоверной разницы в величине показателей. Обнаружено статистически достоверное (р < 0,05) повышение относительного содержания Т-лимфоцитов, экспрессирующих маркер активации HLA-DR (CD3+HLA-DR+) у пациентов в группах СД2 и ОЖ относительно ГС [(%) СД2 – 7,95±0,81; ОЖ – 6,54±0,24; ГС – 4,01±0,91] и достоверное (р < 0,05) повышение процента CD45+CD95+ лимфоцитов у больных с ОЖ и СД2 относительно ГС [(%) СД2 – 5,84±0,68; ОЖ – 5,16±0,89; ГС – 2,78±0,34]. Полученные результаты свидетельствуют о наличии метавоспаления у больных СД2 и ОЖ.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Системный дисбаланс изоформ TGF-β у пациентов с различными проявлениями диабетической ретинопатии
Аннотация
Трансформирующий фактор роста-β (TGF-β) – это группа схожих по структуре многофункциональных регуляторных белков, проявляющих плейотропность в различных тканях организма. Учитывая, что изоформы TGF-β проявляют тропность к различным клеткам, а при диабетической ретинопатии одновременно могут реализовываться как нейродегенеративный процесс, так и повреждение микрососудов, считаем, что изучение содержания TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3 у пациентов с различными проявлениями диабетической ретинопатии (ДР) является актуальным. Цель исследования – определить уровни TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3 в сыворотке крови у пациентов с нейродегенеративными и сосудистыми проявлениями диабетической ретинопатии на фоне сахарного диабета 2-го типа. В исследовании приняли участие 80 пациентов с диагнозом сахарный диабет 2-го типа и 30 практически здоровых добровольцев. На основании офтальмоскопии и оптической когерентной томографии (ОКТ) пациенты с сахарным диабетом 2-го типа были разделены на 4 группы: 1-я группа (n = 12) – пациенты без сосудистых симптомов ДР на глазном дне и без ОКТ-признаков нейродегенерации сетчатки; 2-я группа (n = 28) – пациенты без сосудистых симптомов ДР на глазном дне и наличием ОКТ-признаков нейродегенерации сетчатки; 3-я группа (n = 10) – пациенты с сосудистыми симптомами непролиферативной ДР и без ОКТ-признаков нейродегенерации сетчатки; 4-я группа (n = 30) – пациенты с сосудистыми симптомами непролиферативной ДР и наличием ОКТ-признаков нейродегенерации сетчатки. Сывороточное содержание TGF-β1 во всех группах было в пределах референсных значений на протяжении всего исследования. Сывороточная концентрация TGF-β2 во всех группах была выше в сравнении с контрольной группой. Содержание TGF-β3 в сыворотке крови пациентов с нейродегенративными проявлениями диабетической ретинопатии (2-я и 4-я группы) был достоверно ниже референсных значений. Более выраженный дефицит отмечался в 4-й группе, пациенты которой имели как сосудистые, так и нейродегенративные признаки ДР. Представленное исследование показало наличие системного дисбаланса уровней TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3 при сосудистых и нейрональных проявлениях диабетической ретинопатии. Полученные результаты подтверждают данные о том, что изменение продукции цитокинов из семейства TGF-β при одном патологическом процессе может иметь разнонаправленный характер.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
О связи между уровнями мочевой кислоты в сыворотке крови и функциональной активностью комплемента
Аннотация
Мочевая кислота является конечным продуктом обмена пуриновых нуклеотидов и веществом, способствующим развитию хронического воспалительного процесса. Одним из механизмов развития воспаления, связанного с действием мочевой кислоты, является способность кристаллов ее солей, в основном мононатриевой соли, активировать инфламмасомы NLRP3. На этом основании мочевая кислота и кристаллы ее солей отнесены к молекулярным паттернам, связанным с повреждением (DAMP). К эффектам кристаллов солей мочевой кислоты, связанных с ответом иммунной системы, относится и их способность активировать систему комплемента. Результатом такой активации становится повышение концентраций С3а, С4а и С5а, а также избыточное расходование белков системы комплемента. Несмотря на то, что о способности мочевой кислоты активировать систему комплемента известно давно, сведения о связи гиперурикемии и функциональной активности комплемента, которую можно оценить по комплемент-опосредованному гемолизу в литературе отсутствуют. Поэтому обоснование предельной концентрации мочевой кислоты в крови, не приводящей к спонтанной активации системы комплемента, является актуальным вопросом. В настоящем исследовании предпринята попытка установить предельные концентрации мочевой кислоты, которые не оказывают эффекта на функциональную активность комплемента, оцененную по параметрам комплемент-опосредованного гемолиза. В ходе исследования оценены взаимосвязи между параметрами функциональной активности комплемента и некоторыми биохимическими показателями крови с концентрацией мочевой кислоты методами корреляционного анализа. В качестве показателей функциональной активности комплемента рассматривали скорость (Vlys) и время 50%-ного гемолиза (T50). Взаимосвязи между исследованными показателями удалось продемонстрировать с использованием показательной функции y = a*e[x], которая в данном случае принимает вид y = [МК]*e[C3]. Аргументом функции является концентрация C3, основание степени равно основанию натурального логарифма, а коэффициент пропорциональности равен концентрации мочевой кислоты. Как оказалось, значения данной функции находятся в обратной зависимости от соответствующих значений T50 (r = 0,83, p < 0,0001) в диапазоне концентрации мочевой кислоты, превышающей 370 мкМ. Это значение концентрации мочевой кислоты почти равно верхней границе нормы для женщин и находится в пределах диапазона нормы для мужчин. Таким образом, подход к оценке роли мочевой кислоты в активации комплемента с использованием анализа параметров комплемент-опосредованного гемолиза эффективен для демонстрации патогенетической функции мочевой кислоты в развитии воспалительного процесса без вовлечения инфламмасом путем прямого воздействия на процессы активации комплемента. По нашему мнению, этот эффект реализуется главным образом за счет альтернативного пути комплемента. Продемонстрированные связи позволяют говорить об условности верхних границ диапазона нормальных концентраций мочевой кислоты и вероятной целесообразности их пересмотра.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Взаимосвязь фенотипа лимфоцитов периферической крови и признаков остеопении у больных с хроническим лимфолейкозом
Аннотация
Хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ) является самым распространенным лейкозом среди взрослых в западных странах, характеризуется развитием ряда осложнений, в том числе остеопороза, что является предпосылкой для изучения его предикторов. Цель работы – исследовать взаимосвязь между показателями иммунофенотипирования лимфоцитов крови и показателями остеоденситометрии при ХЛЛ. Исследование проведено на 48 пациентах мужского пола с ХЛЛ в возрасте 50-70 лет со средней продолжительностью болезни 12 месяцев и 14 условно здоровых мужчинах соответствующего возраста (группа 1). В крови методом проточной цитофлуориметрии дифференцировали лимфоциты CD5+, CD19+, CD20+, CD22+, CD23+, CD43+, CD200+. Для оценки вероятности перелома использовали международный опросник FRAX. При остеоденситометрии оценивали минеральную плотность костной массы (МПК), Т-показатель (стандартное отклонение, SD), Z-показатель (SD) в поясничном отделе позвоночника (ПОП), шейке проксимального отдела бедренной кости (ШПОБК), проксимальном отделе бедренной кости (ПОБК). Больные с ХЛЛ входили в группу 2 (n = 34) с МПК в пределах нормы (Т- и Z-показатель > – 1,0 SD) или в группу 3 (n = 14) с признаками остеопении (ОП) (Т- и Z-показатель от – 1,0 SD до – 2,5 SD). У больных с ХЛЛ в группе 3 по сравнению с больными ХЛЛ в группе 2 наблюдается значимое увеличение количества в крови лимфоцитов, экспрессирующих маркеры CD5+, CD19+, CD20+, CD22+, CD23+, CD43+, CD200+. У больных с ХЛЛ в группе 3 признаки ОП в ШПОБК нарастают по мере увеличения в крови лимфоцитов с фенотипом CD5+, CD19+, CD20+, CD22+, CD23+, CD43+, CD200+, признаки ОП в ПОБК нарастают по мере увеличения в крови лимфоцитов с фенотипом CD5+, CD19+, CD20+, CD23+, CD43+; наиболее сильные связи обнаружены между количеством лимфоцитов в крови с маркерами CD5+, CD19+, CD23+, CD43+ и Т-показателем, Z-показателем, МПК в ШПОБК. Полученные данные являются предпосылкой для дальнейшего изучения взаимодействия клона опухолевых лимфоцитов при ХЛЛ и клеток, участвующих в ремоделировании костной ткани для выявления механизма развития ОП, остеопороза и риска переломов костей, а изменение количественного состава фенотипа лимфоцитов в крови могут рассматриваться как потенциальные лабораторные предикторы снижения МПК.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Прогностическая значимость фактора роста гепатоцитов при неметастатическом колоректальном раке
Аннотация
Фактор роста гепатоцитов (HGF) – продуцируется мезенхимальными клетками и является лигандом к тирозинкиназному рецептору с-МЕТ, действует как цитокин на клетки эпителиального происхождения. В опухолевых клетках стимулирует митогенез и ангиогенез. HGF обнаружен во многих органах, включая молочные железы, легкие, почки и печень. Опухолевые клетки некоторых солидных опухолей, в частности клетки аденокарциномы поджелудочной железы, в отличие от стромальных звездчатых клеток железы, не секретируют HGF. Целью исследования была оценка прогностической значимости экспрессии HGF в опухолевой ткани при колоректальном раке. В ретроспективное исследование были включены 50 пациентов с колоректальным раком II-III стадии. Всем пациентам проведено радиакальное оперативное лечение, с последующей адъювантной химиотерапией по схеме FOLFOX/XELOX. В образцах первичной опухоли, полученных интраоперационно, методом количественной ПЦР оценивали уровень экспрессии HGF. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием ПО STATISTICA 13.0 (StatSoft Inc., США), BioStat v.7.1., Jamovi 1.6.8. Исследование направлено на изучение нового маркера, носит поисковый характер. Сравнение признаков в случае ненормального распределения проводилось с помощью непараметрического U-критерия Манна–Уитни. Для анализа выживаемости без прогрессирования использовались критерии линейной регрессии Кокса и Каплана–Майера. При обсуждении результатов были использованы полученные нами ранее данные по уровню экспрессии TGF-β, CXCL8 в опухолевой ткани пациентов с колоректальным раком. В результате проведенных исследований установлено, что в 60% исследованных образцов опухоли изученный маркер не экспрессировался, но при этом был значимо выше, чем в образцах линии резекции. Анализ безрецидивной выживаемости по Каплану–Майеру у пациентов с колоректальным раком по уровню экспрессии HGF (спрогнозированный уровень по оценке пропорциональных рисков – 0,7) показал, что медиана дожития в 1 (экcпрессия HGF более 0,7) и 2 (экспрессия HGF менее 0,7) группах составила 23,3 и 62,9 месяцев соответственно (лонг-ранговый критерий р = 0,215). Таким образом, установлено, что уровень мРНК HGF в опухоли пациентов с колоректальным раком не зависит от возраста, стадии заболевания и чувствительности к химиотерапии по схеме FOLFOX/XELOX. Значимо снижен уровень экспрессии в опухолях с KRAS-мутацией и повышен в опухолях с BRAF-мутацией EGFR-сигнального пути и при низкой дифференцировки опухоли. Таким образом, использование уровня экспрессии HGF в опухолевой ткани пациентов с неметастатическим колоректальным раком до начала химиотерапии для оценки прогноза безрецидивного периода возможно только в совокупности с показателями экспрессии TGF-β, CXCL8 в ткани и уровня РЭА в крови этих больных.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Зубочелюстные аномалии при врожденных ошибках иммунитета
Аннотация
Нарушения развития и болезни зубов, тканей пародонта и всей челюстно-лицевой области составляют значительную часть комплекса симптомов, часто встречающихся при врожденных ошибках иммунитета. Цель исследования – выявить частоту встречаемости различных зубочелюстных аномалий у пациентов с диагностированными иммунодефицитами.
В процесс исследования были вовлечены 64 пациента Свердловской областной клинической больницы № 1 и Областной детской клинической больницы (г. Екатеринбург) с различными диагнозами из 6 подгрупп в соответствии с классификацией врожденных ошибок иммунитета: комбинированные иммунодефициты, антительные дефекты, аутовоспалительные нарушения, дефекты числа и функций фагоцитов, дефекты иммунной дисрегуляции, дефекты комплемента, неверифицированный диагноз с признаками иммунодефицитов. У всех пациентов проводился осмотр полости рта, регистрировалось состояние твердых тканей зубов, пародонта и костной ткани челюсти.
Выяснили, что аномалия размеров челюсти характерна для всех исследуемых групп пациентов, кроме группы с дефектами комплимента. Наряду с этим, такая патология, как количественное и качественное изменение зубов выявлена в четырех классификационных группах: у «комбинированных иммунодефицитов» (25% случаев из подгруппы), «антительных дефектов» (31% случаев из подгруппы), «дефектов фагоцитов» (10% случаев из подгруппы), «дефектов иммунной дисрегуляции» (50% случаев из подгруппы). Такая же частота встречаемости дефектов репарации ткани: у «комбинированных иммунодефицитов» (16,6% случаев из подгруппы), «аутовоспалительных нарушений» (26,7% случаев из подгруппы), «дефектов фагоцитов» (10% случаев из подгруппы), у «неверифицированных диагнозах» (20% случаев из подгруппы).
Самый высокий процент количественного проявления таких аномалий, как размер челюсти (26% случаев из всей исследуемой группы) и лицевой дисморфизм (27% случаев из всей исследуемой группы).
У пациентов с «комбинированными иммунодефицитами» были выявлены все описанные в работе зубочелюстные аномалии. При этом самый высокий процент людей из этой группы имели задержку прорезывания зубов (33,3%) и лицевой дисморфизм (33%). У единственного пациента с диагнозом «дефекты комплимента» зубочелюстных аномалий не обнаружено. Минимальное число проявлений исследуемых аномалий у групп с «дефектами антител» и «дефектами иммунной дисрегуляции».
Накопленный опыт по описанию различных стоматологических диагнозов, характера их проявлений на фоне врожденных ошибок иммунитета, в дальнейшем, будет способствовать созданию стоматологических критериев для диагностики первичных иммунодефицитов у пациентов с ранее не установленным диагнозом, что позволит осуществлять более эффективный, т. е. комплексный подход к лечению совместно с врачами-иммунологами.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)
Иммунология в мире идей и в мире вещей: эволюционный спуск и проблемы сконструированной реальности
Аннотация
Термин «иммунитет» появился в медицине благодаря трудам И.И. Мечникова как французская интерпретация слова «невосприимчивость». Однако концепт невосприимчивости к болезням существовал в европейской культуре задолго до Мечникова в виде так называемой жизненной силы. С позиций холистической методологии историю науки об иммунитете можно разделить на три неравных периода: 1) виталистический – с античности до открытий Мечникова и Эрлиха; 2) «мечниковский» (1890-е годы – 1916 г.); 3) послемечниковский (1916 г. – настоящее время). Существование представлений о «жизненной силе» позволили во втором десятилетии XVIII века адаптировать в Европе вариоляцию, в основе которой лежали средневековые магико-мистические представления об инфекции. Без обобщения опыта вариоляции Э. Дженнер вряд ли бы смог разработать метод вакцинации. Научные открытия И.И. Мечникова не были категорическим отрицанием предыдущего периода иммунологии. Ему в течение почти 20 лет пришлось самому отражать обвинения в телеологии и витализме со стороны некоторых биологов и медиков, отрицавших возможность подвижных клеток действовать целесообразно. Подтвердить правоту «научной интуиции» Мечникову помогла аналогия – феномен внутриклеточного пищеварения у одноклеточных микроорганизмов типа амеб или инфузорий, который он глубоко изучил. Кроме того, он экспериментально показал, на какой стадии эволюции живых существ у них появились подвижные клетки-фагоциты, затем он подтвердил, что фагоцитоз – не панацея и инфекты вполне могут с ним бороться. Тем не менее в своих работах Мечников также обращался к категории «целебных сил организма». Иммунология за последнее столетие столкнулась с рядом теоретических противоречий и методологических сложностей, связанных с доминированием редукционистской парадигмы, а именно с «разрывом» между миром «иммунологических объектов» – рецепторов иммунных клеток, антител, цитокинов и пр. и «субъектностью» базовых категорий иммунологии – «свое-чужое», «иммунная агрессия», «иммунная защита». Это противоречие в иммунологии пытался преодолеть И.И. Мечников при обосновании фагоцитоза как функциональной системы, обладающей ценностными характеристиками. В современной иммунологии преодоление этих противоречий может быть начато с помощью холистических субъектно- объектных моделей, как, например, симбионтной модели, уже применяемой в иммунологии растений.
![pages](/img/style/pages.png)
![views](/img/style/views.png)
![](/img/style/loadingSmall.gif)